PRSS（蛋白酶/絲氨酸）家族成員編碼絲氨酸蛋白酶,在睪丸特異性表達(dá)的成員多數(shù)定位在雄性生殖細(xì)胞質(zhì)膜,在雄性生殖中發(fā)揮著重要作用。PRSS41、PRSS42和PRSS43通過調(diào)控精母細(xì)胞減數(shù)分裂參與小鼠睪丸發(fā)育和精子發(fā)生;精子質(zhì)膜GPI錨定蛋白PRSS21缺失導(dǎo)致精子體外穿過透明帶能力下降;PRSS37在小鼠中通過影響精子在雌性生殖道內(nèi)遷移和體外精卵識(shí)別/結(jié)合參與雄性生殖;PRSS37在人類精子中的低表達(dá)與不明原因男性不育直接相關(guān)。利用基因打靶小鼠模型是研究未知基因生物學(xué)功能的重要有效手段。本課題組利用基因敲除小鼠,對(duì)Prss55基因在小鼠生殖過程中的作用進(jìn)行研究。PRSS55,又名testis serine protease（T-SP1）,編碼睪丸特異性胰酶樣的絲氨酸蛋白酶。Prss55在小鼠中是一個(gè)功能未知的基因,組織表達(dá)譜分析表明Prss55在睪丸特異性表達(dá)。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),Prss55基因在小鼠出生后28天開始出現(xiàn)轉(zhuǎn)錄和翻譯活動(dòng),即在延長期精子中開始表達(dá)。PRSS55在雄性生殖細(xì)胞中是一個(gè)GPI錨定蛋白,且具有絲氨酸蛋白酶的活性。Prss55敲除小鼠雄鼠不育,但睪丸發(fā)育、精子發(fā)... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：126 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

來自七個(gè)不同物種的PRSS55蛋白保守序列多重序列比對(duì)Figure1.1AmultiplealignmentofaminoacidsequencesofPRSS55fromsevendifferentspecies，人；，小鼠；，大鼠；，黑猩

Prss55在小鼠中的組織表達(dá)譜

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文44曲精小管無腔，原始生殖細(xì)胞位于中央部，支持細(xì)胞位于基底部。在之后一周內(nèi)，原始生殖細(xì)胞經(jīng)過有絲分裂形成精原細(xì)胞，精原細(xì)胞進(jìn)一步有絲分裂進(jìn)行增殖和自我更新形成精母細(xì)胞。從出生后第7天到35天，精母細(xì)胞經(jīng)歷有絲分裂、減數(shù)分裂和精子發(fā)生階段形成成熟精子（圖1.3）[68]。小鼠的精子發(fā)生要經(jīng)歷4個(gè)半生精上皮周期。第1~4個(gè)周期都分為12期，最后半個(gè)周期分為8期，其中最后的1個(gè)半周期為精子形成過程[69]。同時(shí)，根據(jù)精子細(xì)胞核及頂體的形態(tài)變化，又可以將精子形成細(xì)分為16歩[70,71]。圖1.3各類生殖細(xì)胞在小鼠第一生精波中出現(xiàn)的理想時(shí)序[72]Figure1.3Idealizedtimingofthefirstwaveofspermatogenesis通常情況下，基因時(shí)空表達(dá)的特異性及在組織細(xì)胞中的定位模式往往與基因功能密切相關(guān)。為進(jìn)一步明確Prss55在雄鼠生殖系統(tǒng)中的表達(dá)情況，我們利用Real-timePCR和westernblotting技術(shù)分析了出生后2周、4周、6周和8周睪丸和附睪中Prss55的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平。鑒于市售抗體特異性差（SIGMA,P26938；AVNASYSTEMSBIOLOGY,ARP71472ARP71471），我們自己免疫小鼠制備了PRSS55抗體并在小鼠睪丸和精子組織中驗(yàn)證了效價(jià)及特異性（圖1.4）。


本文編號(hào)：3451640