目的:促進(jìn)白色脂肪組織（WAT）棕色化和增強(qiáng)棕色脂肪組織（BAT）活性是治療肥胖等代謝性疾病非常有前景的策略。本研究旨在探討嘌呤核苷酸代謝相關(guān)基因Adssl1和介導(dǎo)神經(jīng)突觸連接的基因Clstn3在米色脂肪細(xì)胞能量代謝中的調(diào)控作用及機(jī)制。方法:1)使用Q-PCR和免疫印跡觀察Adssl1的表達(dá)譜。介導(dǎo)米色脂肪細(xì)胞中Adssl1的敲減和過表達(dá),檢測細(xì)胞分化、成脂和產(chǎn)熱等相關(guān)基因的表達(dá)。使用Seahorse檢測米色脂肪細(xì)胞耗氧量。使用毛細(xì)電泳-質(zhì)譜串聯(lián)的方法檢測細(xì)胞內(nèi)嘌呤核苷酸相關(guān)代謝物的水平。使用RNA-seq檢測Adssl1敲減（ADsi）后的基因表達(dá)譜變化。使用線粒體染色,DNA拷貝數(shù)檢測以及電鏡來檢測細(xì)胞內(nèi)線粒體數(shù)目。2)鑒定出在WAT棕色化和BAT激活過程中差異表達(dá)的預(yù)測分泌基因（DEPSGs）。檢測寒冷刺激后WAT和BAT中成熟脂肪細(xì)胞中關(guān)鍵基因的表達(dá)變化。使用ISO處理分化的脂肪細(xì)胞以檢測關(guān)鍵基因的表達(dá)變化。結(jié)果:1)Adssl1高表達(dá)于棕色脂肪和肌肉組織等代謝旺盛的組織。過表達(dá)或敲減Adssl1不影響米色脂肪細(xì)胞的分化和成脂功能。ADsi組UCP1表達(dá)水平增高,具有更高的耗氧... 

【文章來源】：上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

白色脂肪組織在寒冷暴露后Adssl1基因的表達(dá)變化

CL316243刺激后白色脂肪組中織Adssl1基因的表達(dá)變化

棕色脂肪組織激活后Adssl1基因的表達(dá)變化


本文編號：3399081