目的:明確腫瘤干細(xì)胞內(nèi)鐵代謝情況,篩選腫瘤干細(xì)胞中發(fā)揮重要作用的鐵代謝基因,并初步探討其作用機(jī)制。同時(shí)我們通過合成包載降鐵藥物的納米材料,靶向腫瘤內(nèi)腫瘤干細(xì)胞,抑制腫瘤進(jìn)展。方法:我們培養(yǎng)腫瘤干細(xì)胞并檢測(cè)了腫瘤干細(xì)胞內(nèi)的鐵代謝情況,發(fā)現(xiàn)與鐵調(diào)節(jié)相關(guān)的基因很多發(fā)生了明顯的改變,隨后我們探究了在腫瘤干細(xì)胞內(nèi)的鐵代謝情況及可能的主要調(diào)節(jié)基因;隨后我們通過相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),腫瘤干細(xì)胞具有很強(qiáng)的腫瘤起始能力,我們構(gòu)建了BMPR1A,TFRC,SFXN5等穩(wěn)轉(zhuǎn)低表達(dá)細(xì)胞系,并進(jìn)一步檢測(cè)腫瘤干細(xì)胞成瘤能力;同時(shí)通過流式細(xì)胞學(xué)方法,檢測(cè)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響;并檢測(cè)了PC3細(xì)胞化療敏感性相關(guān)ABC蛋白家族成員蛋白表達(dá)水平的影響。我們合成降鐵藥物-去鐵胺（DFO）衍生物DFCAF和納米脂質(zhì)體-DFO,并通過腫瘤干細(xì)胞形成能力檢測(cè)等方法檢測(cè)小分子化合物DFCAF對(duì)腫瘤干細(xì)胞能力的抑制作用和納米脂質(zhì)體的降鐵效果。結(jié)果:腫瘤干細(xì)胞具有很強(qiáng)的腫瘤起始和快速生長(zhǎng)能力,根據(jù)基因轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果,腫瘤干細(xì)胞的鐵代謝調(diào)節(jié)基因穩(wěn)態(tài)明顯改變,同時(shí)WNT等與腫瘤干細(xì)胞明顯相關(guān)性的基因表達(dá)量也明顯升高;根據(jù)RT-qPCR及WB蛋白檢... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

腫瘤細(xì)胞中鐵代謝基因[9]

圖 2 腫瘤干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞鐵代謝的不同最近幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室報(bào)告了腫瘤干細(xì)胞與鐵之間的新聯(lián)系。有報(bào)道稱膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 CSCs 高表達(dá) TFR1 和其配體 Tf。同時(shí)進(jìn)行鐵追蹤實(shí)驗(yàn)，證明了腫瘤干細(xì)胞顯示這些細(xì)胞比腫瘤細(xì)胞，能夠更加有效的從微環(huán)境中提取鐵。隨后的分析表明TFR1 和鐵蛋白是對(duì)體內(nèi)腫瘤的繁殖和形成至關(guān)重要。相關(guān)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了。與腫瘤細(xì)胞相比，乳腺腫瘤干細(xì)胞中的細(xì)胞鐵和 Tf 含量很高[13]。對(duì)來自 MCF7 細(xì)胞的成球?qū)嶒?yàn)的結(jié)果表明，體外培養(yǎng)的腫瘤干細(xì)胞內(nèi)含有的 LIP，線粒體鐵含量也明顯升高，腫瘤干細(xì)胞對(duì)鐵螯合劑的敏感性更高。卵巢腫瘤干細(xì)胞也表達(dá)了更高的 TFR1 和 TF 水平，和低水平的 FPN。這些變化的最終結(jié)果是過量細(xì)胞內(nèi)鐵的積累，細(xì)胞的快速增殖可能和細(xì)胞內(nèi)鐵含量呈現(xiàn)相關(guān)依賴性。細(xì)胞內(nèi)鐵的含量減少會(huì)減少卵巢干細(xì)胞的致瘤性，隨后的分析表明，細(xì)胞內(nèi)鐵增加增加能夠通過基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，促進(jìn)侵襲的轉(zhuǎn)移性擴(kuò)散并促進(jìn)與腫瘤 EMT 過程相關(guān) IL-6的合成。目前，關(guān)于腫瘤干細(xì)胞內(nèi)鐵代謝情況，引起了相關(guān)科學(xué)家的廣泛研究。在腫

一、對(duì)象和方法1.1 研究對(duì)象1.1.1 細(xì)胞系及組織人源 PC3，A549,G2 細(xì)胞系，鼠源 RM-1,4T1,LG-12 細(xì)胞系，由天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院前列腺研究室及中科院生態(tài)環(huán)境研究中心凍存。我們分別構(gòu)建了TGF-β，BMPR1,TFRC 和 SFXN5 穩(wěn)定低表達(dá)的各個(gè)腫瘤細(xì)胞系，由天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院及中科院生態(tài)環(huán)境研究中心構(gòu)建并轉(zhuǎn)染后凍存并傳代培養(yǎng)。1.1.2 質(zhì)粒質(zhì)粒 1：PLK0.1-Control Vector 由公司購(gòu)買，具體信息如下圖 3。


本文編號(hào)：3388391