目的:軸突導(dǎo)向因子Semaphorin4D（Sema4D）在多種人體腫瘤組織中高表達,且對腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及促血管發(fā)生起重要作用。但是,關(guān)于Sema4D在結(jié)腸癌發(fā)展過程中的作用及其分子機制的研究報道甚少。本文從Sema4D在結(jié)腸癌組織中的表達情況開始研究,分析Sema4D的表達與結(jié)腸癌臨床病理各因素及預(yù)后的相關(guān)性,通過構(gòu)建慢病毒轉(zhuǎn)染載體,干擾Sema4D的表達,體外、體內(nèi)實驗觀察Sema4D對結(jié)腸癌細胞增殖、侵襲、遷移、促血管生成等生物學(xué)行為的影響,再檢測下游信號通路,探討Sema4D在結(jié)腸癌發(fā)展過程中的生物學(xué)功能及其作用機制,希望為結(jié)腸癌的診斷和治療提供新的靶點。方法:免疫組化染色分析Sema4D在人體結(jié)腸癌組織中表達情況,對Sema4D與臨床各因素（腫瘤大小、部位、組織類型、分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移、TNM分期等方面）進行統(tǒng)計學(xué)研究,分析Sema4D的表達與結(jié)腸癌預(yù)后的相關(guān)性。利用Sema4D shRNA的慢病毒感染,選取其中穩(wěn)定敲低的HCT-116和LoVo細胞株作為研究對象,體外實驗采用MTT實驗、Transwell侵襲、遷移實驗、內(nèi)皮細胞成管實驗,檢測Sema4D對結(jié)腸癌細胞生物學(xué)行為... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：124 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

Sema4D在正常結(jié)腸粘膜及結(jié)腸癌組織中的免疫組化染色

在ＬｏＶｏ、ＳＷ－４８０、Ｃａｃｏ－２細胞組中居于中間位置，而在ＨＴ－２９細??胞組中偏低；但實驗中所有結(jié)腸癌細胞系中Ｓｅｍａ４Ｄ的表達水平明顯高于人正常??結(jié)腸上皮細胞ＣＣＤ８４１ＣＯＮ。（如圖２）??ｐ－ａｃｔｍ?？＊＊？?■■飜?Ｉ?ｉｎｉ?ｉｍｉｎｉ?ｍｍ??ＣＣＤ８４１Ｃ〇Ｎ?ＨＣＴ－１１６?ＨＴ－２９?ＬｏＶｏ?Ｃａｃｏ－２?ＳＷ－４８０??２．５－１??氺??Ｉ２－０－??Ｉ－?■?■?１１??ｌ－ｎｉ?■?１１??ｉＨｎｎｉｉｉｉ??、分、ｃ、ｆ、４、?ｖ。＃?夕??、、?＇??圖２正常結(jié)腸上皮細胞ＣＣＤ８４１ＣｏＮ及結(jié)腸癌細胞??ＨＣＴ－１１６、ＨＴ－２９、ＬｏＶｏ、Ｃａｃｏ－２、ＳＷ－４８０?中?Ｓｅｍａ４Ｄ?的表達。??注：＊表示Ｐ＜０．０５。??３２??

染組（ＧＦＰ組）和Ｓｅｍａ４Ｄ?ｓｈＲＮＡ慢病毒感染組（ｓｈＳ４Ｄ組）。分別用Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ??和ＲＴ－ＰＣＲ檢查Ｓｅｍａ４Ｄ的表達，結(jié)果顯示：??在ＨＣＴ－１１６細胞中（如圖３），Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測（圖３Ａ）在蛋白表達層面，??無病毒感染組（Ｃｏｎｔｒｏｌ組）與對照慢病毒感染組（ＧＦＰ組）間，Ｓｅｍａ４Ｄ表達水??平相當(dāng)，Ｓｅｍａ４ＤｓｈＲＮＡ慢病毒感染組（ｓｈＳ４Ｄ組）Ｓｅｍａ４Ｄ表達水平與前兩組??相比均降低。ＲＴ－ＰＣＲ檢測（圖３Ｂ）在ｍＲＮＡ層面，無病毒感染組（Ｃｏｎｔｒｏｌ??組）Ｓｅｍａ４Ｄ的表達水平與對照慢病毒感染組（ＧＦＰ組）相當(dāng)，Ｐ＞０．０５；?Ｓｅｍａ４Ｄ??３３??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3374570