立題依據(jù):研究背景:惡性淋巴瘤（ML）是一組起源于淋巴系統(tǒng)的惡性腫瘤,多發(fā)生于淋巴結(jié)和（或）結(jié)外部位淋巴組織,通過(guò)腫瘤細(xì)胞表面的白細(xì)胞分化抗原不同可將其分為T細(xì)胞來(lái)源淋巴瘤及B細(xì)胞來(lái)源淋巴瘤兩大類。T細(xì)胞淋巴瘤臨床較B細(xì)胞淋巴瘤較為少見(jiàn),僅約占所有淋巴瘤的10%-15%。但這類淋巴瘤由于其亞洲人群高發(fā)病率、明顯的個(gè)體異質(zhì)性、廣泛的癥狀特異性、較差的治療預(yù)后和轉(zhuǎn)歸及大多數(shù)在治療2-3年內(nèi)復(fù)發(fā)的特點(diǎn),也一直受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛重視。復(fù)方苦參注射液由于其抗腫瘤、鎮(zhèn)痛、增強(qiáng)免疫等功效,常用于晚期患者的維持治療及放化療輔助治療。中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院首席研究員、中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院腫瘤科前主任林洪生教授在多年的淋巴瘤患者診治過(guò)程中發(fā)現(xiàn)復(fù)方苦參注射液在治療緩慢進(jìn)展的T細(xì)胞淋巴瘤,尤以伴以多種形式皮膚損傷的患者效果顯著,填補(bǔ)了緩慢進(jìn)展或除皮膚受累癥狀外并無(wú)其他淋巴結(jié)或結(jié)外器官受累癥狀的患者等待觀察期無(wú)藥可用的空白,緩解了患者癥狀,顯著改善生活質(zhì)量。研究目的:本研究分別通過(guò)體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),探索復(fù)方苦參注射液對(duì)不同人源淋巴瘤細(xì)胞系的干預(yù)作用,并在小鼠體內(nèi)模型中進(jìn)一步驗(yàn)證和探索其免疫調(diào)控作用機(jī)制。為復(fù)方苦... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：166 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．淋巴瘤相關(guān)皮損復(fù)方苦參注射液治療前后對(duì)比??

?復(fù)方苦參注射液對(duì)惡性Ｔ細(xì)胞淋巴瘤作用機(jī)制研究???０１＝?５７０?ｎｍ處ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ試劑的氧化摩爾吸光系數(shù)??０２＝６００?ｎｍ處ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ試劑的氧化摩爾吸光系數(shù)??Ｒｌ＝５７０?ｎｍ處ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ試劑的還原摩爾吸光系數(shù)??Ｒｌ＝５７０?ｎｍ處ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ試劑的還原摩爾吸光系數(shù)??Ａｌ＝測(cè)試孔在５７０?ｎｍ處的吸光度??Ａ２＝測(cè)試孔在６００?ｎｍ處的吸光度??Ｎｌ＝單純培養(yǎng)基在５７０?ｎｍ處的吸光度??Ｎ２＝單純培養(yǎng)基在６００ｎｍ處的吸光度??計(jì)算不同分組及復(fù)孔的吸光度，比較ＣＣＫ８及Ｐｒｅｓｔｏｂｌｕｅ的敏感度及對(duì)復(fù)方??苦參注射液顏色的影響程度，選擇更優(yōu)的細(xì)胞活力鑒定方法。??１?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１１?１２??５?２．５?１．２５?０．６２５?０．３１３?（ｍｇ／ｍ?ｉ）??Ｂ??ｃ?④④④④④④④④④④??Ｄ?④④④④④④④④④④??Ｅ?④④④④④④？④④？??Ｆ?④④④④④④④④④④??Ｇ?④④④④④④④④④④??Ｈ?（／ｈｏｌｅ）?１Ｘ１０＾?５Ｘ１０３?Ｚ５Ｘ１０３?１．２ＳＸ１０３?ｍｅｄｉｉｍ?ｏｎｌｙ??圖２．細(xì)胞活力鑒定方法學(xué)比較及建立的鋪板方法??２．３復(fù)方苦參注射液對(duì)不同淋巴瘤細(xì)胞系增殖的影響??為確保評(píng)估復(fù)方苦參注射液對(duì)不同淋巴瘤細(xì)胞系增殖影響的準(zhǔn)確性，本研究??選擇了對(duì)復(fù)方苦參注射液顏色的影響程度更小的Ｐｒｅｓｔｏｂｌｕｅ試劑用以細(xì)胞增殖－??活力檢測(cè)；同時(shí)使用細(xì)胞計(jì)數(shù)法重復(fù)驗(yàn)證復(fù)方苦參注射液對(duì)不同淋巴瘤細(xì)胞系增??５７??

ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ讀數(shù)／對(duì)照組ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ讀數(shù)平均值－單??純培養(yǎng)基ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ讀數(shù)??１?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１１?１２??／＼?ｃｏｎｔｒｏｌ?０．０３９?０．０７８?０．１５６?０．?３１３?０．?６２５?１．２５?Ｚ?５?５?（ｍｇ／ａｉ）??°?④④④④④④④④④④??Ｄ?④④④④④④④④④④??Ｅ?④④④④④④？④④④??Ｆ?④④④④④④④④??。＾④④？④④④④④④??Ｈ?ｒｎｅｄｉｕｎ?ｏｎｌｙ?ＣＫＩ?ｏｎｌｙ??圖３．復(fù)方苦參注射液對(duì)不同淋巴瘤細(xì)胞系增殖的影響鋪板方法??２．３２細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)??在?３７ＧＣ，５％Ｃ０２?培養(yǎng)箱中將?Ｈｕｔ－７８、ＥＬ４、Ｌｏｕｃｙ、Ｊｕｒｋａｔ、Ｒａｊｉ?細(xì)胞傳代培??養(yǎng)一周保證其細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定，根據(jù)細(xì)胞增殖的速度快慢，每２－３天分瓶換液或離??心換液。當(dāng)５種細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的時(shí)候，以２ｘｌ０４／孔密度鋪于２４孔板中用??于檢測(cè)，每組３個(gè)復(fù)孔。在鋪板培養(yǎng)２４ｈ后加入??以不同細(xì)胞對(duì)應(yīng)的完全培養(yǎng)基將復(fù)方苦參注射液梯度稀釋為１０?ｍｇ／ｍｌ、??５ｍｇ／ｍｌ、２．５ｍｇ／ｍｌ、１．２５ｍｇ／ｍｌ、０．６２５ｍｇ／ｍｌ、０．３１２５ｍｇ／ｍｌ、０＿１５６２５ｍｇ／ｍｌ７?種濃??度，（將復(fù)方苦參注射液原液濃度視為２０ｍｇ／ｍｌ?（總生物堿濃度））于次日分別添??加于對(duì)應(yīng)孔中，放置培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)４８ｈ、７２ｈ后，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。??細(xì)胞的計(jì)數(shù)：１．細(xì)胞計(jì)數(shù)板：將培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞及培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至１５ｍｌ離心??５９??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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