研究背景:蛛網(wǎng)膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）是一種具有高死亡率和高致殘率的腦血管疾病,也是神經(jīng)外科常見的危急重癥,發(fā)病后往往具有毀滅性后果。盡管SAH僅占所有卒中的5%-10%,但由于其高死亡率,高致殘率和臨床預(yù)后差的特點給社會帶來了沉重負擔(dān)。盡管研究者們對SAH進行了數(shù)十年的研究,但它仍是一個全球性的嚴重威脅生命健康的問題。迄今為止,SAH造成腦損傷的潛在機制仍不清楚。目前對SAH機制的研究主要集中在早期腦損傷（early brain injury,EBI）和延遲性腦損傷（delayed brain injury,DBI）。但隨著針對DBI臨床研究的失敗,研究人員已開始將研究重點轉(zhuǎn)向EBI。EBI是指顱內(nèi)血管破裂出血后,72小時以內(nèi)腦組織所出現(xiàn)的一系列病理生理性事件,是一個非常復(fù)雜的病理生理過程,所涉及的分子機制也是多種多樣,其中神經(jīng)炎癥被認為是造成早期腦損傷的一個重要分子機制。研究證明TLR4介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥在SAH后早期腦損傷階段發(fā)揮著重要作用。TLR4可通過與兩個調(diào)節(jié)促炎因子基因表達的不同銜接蛋白（My D88和TRIF）相互作用,從而激活兩... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

蛛網(wǎng)膜下腔出血后TLR4信號通路概述Figure2.1.OverviewofToll-likereceptor-4signalingpathwayafterSAH.EndogenousligandrecognitionisfacilitatedbyTLR4withtheassistanceofCD14andMD-2,whichleadstotherecruitmentofvariousadaptorproteinslikeTRAM/TRIFandTIRAP/MyD88

20carotidartery,CCA)、頸內(nèi)動脈(internalcarotidartery，ICA)和頸外動脈(externalcarotidartery，ECA)結(jié)構(gòu)。鏡下小心游離ECA，在距離“Y”形分叉口5mm處電凝燒灼并離斷ECA，接著用臨時動脈阻斷夾夾閉CCA，輕拉ECA使之與ICA成一直線，用顯微剪在ECA殘端剪開一“V”形小口，迅速將準備好的5cm長的3-0單絲尼龍線(前端切成斜面，并在距離前端20mm處標記)從破口處插入頸內(nèi)動脈防止逆流血液外溢污染視野，輕輕推送尼龍線進入約20mm深度時可感受到輕微阻力，此時繼續(xù)推入1~2mm，有落空感提示尼龍線尖端刺破大腦前動脈及大腦中動脈分叉處動脈壁,留置3~5s后迅速拔出尼龍線。同時，結(jié)扎ECA破口并撤去臨時動脈阻斷夾，可見動物呼吸驟然停頓后出現(xiàn)急促樣呼吸，提示造模成功。給大鼠縫合創(chuàng)口后用碘伏再次消毒，并將動物放入37℃恒溫箱內(nèi)至麻醉蘇醒。圖3.1蛛網(wǎng)膜下腔出血血管穿孔模型Figure3.1EndovascularperforationforSAHmodel3.3.7RT-qPCR3.3.7.1RNA提取1）各組取15-20mg腦組織，液氮冷凍后用研磨杵研磨成粉末，將粉末轉(zhuǎn)移至離心管中，每10mg左右的組織加0.3ml的BB4（每1mlBB4，加10μlβ-巰基乙醇，現(xiàn)用現(xiàn)配）和15μlProteinaseK，混勻后56℃處理10-20分鐘。2）室溫12000r/min離心5分鐘，吸上清于一RNase-free的離心管中。

C），從而證實結(jié)果是可靠的，并且可以應(yīng)用于后續(xù)分析

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Toll-like receptor 4 as a possible therapeutic target for delayed brain injuries after aneurysmal subarachnoid hemorrhage[J]. Takeshi Okada,Hidenori Suzuki.  Neural Regeneration Research. 2017(02)
[2]Tenascin-C in aneurysmal subarachnoid hemorrhage: deleterious or protective?[J]. Hidenori Suzuki,Fumihiro Kawakita.  Neural Regeneration Research. 2016(02)



本文編號：3302737