研究背景:蛛網(wǎng)膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）是一種具有高死亡率和高致殘率的腦血管疾病,也是神經(jīng)外科常見的危急重癥,發(fā)病后往往具有毀滅性后果。盡管SAH僅占所有卒中的5%-10%,但由于其高死亡率,高致殘率和臨床預(yù)后差的特點(diǎn)給社會(huì)帶來了沉重負(fù)擔(dān)。盡管研究者們對(duì)SAH進(jìn)行了數(shù)十年的研究,但它仍是一個(gè)全球性的嚴(yán)重威脅生命健康的問題。迄今為止,SAH造成腦損傷的潛在機(jī)制仍不清楚。目前對(duì)SAH機(jī)制的研究主要集中在早期腦損傷（early brain injury,EBI）和延遲性腦損傷（delayed brain injury,DBI）。但隨著針對(duì)DBI臨床研究的失敗,研究人員已開始將研究重點(diǎn)轉(zhuǎn)向EBI。EBI是指顱內(nèi)血管破裂出血后,72小時(shí)以內(nèi)腦組織所出現(xiàn)的一系列病理生理性事件,是一個(gè)非常復(fù)雜的病理生理過程,所涉及的分子機(jī)制也是多種多樣,其中神經(jīng)炎癥被認(rèn)為是造成早期腦損傷的一個(gè)重要分子機(jī)制。研究證明TLR4介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥在SAH后早期腦損傷階段發(fā)揮著重要作用。TLR4可通過與兩個(gè)調(diào)節(jié)促炎因子基因表達(dá)的不同銜接蛋白（My D88和TRIF）相互作用,從而激活兩... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

蛛網(wǎng)膜下腔出血后TLR4信號(hào)通路概述Figure2.1.OverviewofToll-likereceptor-4signalingpathwayafterSAH.EndogenousligandrecognitionisfacilitatedbyTLR4withtheassistanceofCD14andMD-2,whichleadstotherecruitmentofvariousadaptorproteinslikeTRAM/TRIFandTIRAP/MyD88

20carotidartery,CCA)、頸內(nèi)動(dòng)脈(internalcarotidartery，ICA)和頸外動(dòng)脈(externalcarotidartery，ECA)結(jié)構(gòu)。鏡下小心游離ECA，在距離“Y”形分叉口5mm處電凝燒灼并離斷ECA，接著用臨時(shí)動(dòng)脈阻斷夾夾閉CCA，輕拉ECA使之與ICA成一直線，用顯微剪在ECA殘端剪開一“V”形小口，迅速將準(zhǔn)備好的5cm長(zhǎng)的3-0單絲尼龍線(前端切成斜面，并在距離前端20mm處標(biāo)記)從破口處插入頸內(nèi)動(dòng)脈防止逆流血液外溢污染視野，輕輕推送尼龍線進(jìn)入約20mm深度時(shí)可感受到輕微阻力，此時(shí)繼續(xù)推入1~2mm，有落空感提示尼龍線尖端刺破大腦前動(dòng)脈及大腦中動(dòng)脈分叉處動(dòng)脈壁,留置3~5s后迅速拔出尼龍線。同時(shí)，結(jié)扎ECA破口并撤去臨時(shí)動(dòng)脈阻斷夾，可見動(dòng)物呼吸驟然停頓后出現(xiàn)急促樣呼吸，提示造模成功。給大鼠縫合創(chuàng)口后用碘伏再次消毒，并將動(dòng)物放入37℃恒溫箱內(nèi)至麻醉蘇醒。圖3.1蛛網(wǎng)膜下腔出血血管穿孔模型Figure3.1EndovascularperforationforSAHmodel3.3.7RT-qPCR3.3.7.1RNA提取1）各組取15-20mg腦組織，液氮冷凍后用研磨杵研磨成粉末，將粉末轉(zhuǎn)移至離心管中，每10mg左右的組織加0.3ml的BB4（每1mlBB4，加10μlβ-巰基乙醇，現(xiàn)用現(xiàn)配）和15μlProteinaseK，混勻后56℃處理10-20分鐘。2）室溫12000r/min離心5分鐘，吸上清于一RNase-free的離心管中。

C），從而證實(shí)結(jié)果是可靠的，并且可以應(yīng)用于后續(xù)分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Toll-like receptor 4 as a possible therapeutic target for delayed brain injuries after aneurysmal subarachnoid hemorrhage[J]. Takeshi Okada,Hidenori Suzuki.  Neural Regeneration Research. 2017(02)
[2]Tenascin-C in aneurysmal subarachnoid hemorrhage: deleterious or protective?[J]. Hidenori Suzuki,Fumihiro Kawakita.  Neural Regeneration Research. 2016(02)



本文編號(hào)：3302737