目的:糖尿病腎病是一種較常見的糖尿病并發(fā)癥,其特有的病理生理學(xué)改變提高了麻醉風(fēng)險(xiǎn),越來越受到臨床麻醉醫(yī)生的重視。右美托咪定作為α2-腎上腺素受體激動(dòng)劑,具有較穩(wěn)定的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛作用,且對(duì)急性腎損傷和腎缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。糖尿病患者體內(nèi)長期處于高血糖狀態(tài),可導(dǎo)致組織和細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷,進(jìn)而引起腎小管上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）,其與腎間質(zhì)纖維化關(guān)系密切,嚴(yán)重影響腎臟功能。本研究利用體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),探討右美托咪定對(duì)糖尿病腎病的保護(hù)作用及其相關(guān)機(jī)制,旨在為糖尿病腎病的麻醉藥物選擇提供可靠的理論依據(jù),并為糖尿病腎病的臨床麻醉管理提供一定的指導(dǎo)作用。方法:1.體外建立高糖對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞（HK-2細(xì)胞）損傷模型,加入不同濃度（0 m M、10 m M、20 m M、30 m M、40 m M、50 m M、60 m M）葡萄糖處理HK-2細(xì)胞6 h,通過CCK-8法檢測不同濃度各組細(xì)胞存活率,利用倒置顯微鏡鏡下觀察不同濃度葡萄糖各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,通過Western blotting法檢測不同濃度各組細(xì)胞AKT、... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

1痛覺通路的相關(guān)調(diào)節(jié)遞質(zhì)[103]

第4章結(jié)果31第4章結(jié)果4.1高糖誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化4.1.1CCK-8法檢測不同濃度葡萄糖處理HK-2細(xì)胞存活率如圖4.1.1A所示，和Normal組（0mM組）相比，20mM、30mM、40mM、50mM、60mM濃度的Glu組細(xì)胞存活率均有明顯下降，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）并且在相同時(shí)間隨著葡萄糖處理濃度的增高，HK-2細(xì)胞存活率逐漸下降，呈劑量依賴性。與Normal組相比較，甘露醇濃度為20mM（M20mM組）和40mM（M40mM組）時(shí)的細(xì)胞存活率與Normal組差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與Normal組相比較，在葡萄糖濃度為40mM處理6h時(shí)，HK-2細(xì)胞存活率約在85%。通過查閱文獻(xiàn)，結(jié)合上述研究結(jié)果，最終選擇40mM處理6h作為本研究高糖對(duì)HK-2損傷的建模條件。圖4.1.1不同濃度葡萄糖對(duì)HK-2細(xì)胞存活率的影響Fig.4.1.1Effectsofglucoseconcentrationonsurvivalrateofhk-2cellsA．隨著葡萄糖處理濃度的增高，HK-2細(xì)胞存活率逐漸下降。與Normal組相比，20mM、30mM、40mM、50mM和60mM組的細(xì)胞存活率明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與Normal組相比，10mM、M20mM和M40mM組的細(xì)胞存活率差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）

吉林大學(xué)博士學(xué)位論文324.1.2不同濃度葡萄糖處理對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞的形態(tài)學(xué)影響在6孔板中按照前述方法鋪好HK-2細(xì)胞，確保不同濃度的孔內(nèi)細(xì)胞密度均勻一致，分組情況為：Normal組（0mM組）、10mM組、20mM組、30mM組、40mM組、50mM組，分別加入相應(yīng)濃度的葡萄糖處理6小時(shí)后通過倒置顯微鏡觀察，我們發(fā)現(xiàn)，如圖4.1.2A所示，Normal組HK-2細(xì)胞呈圓形或橢圓形（鋪路石樣）緊密排列，貼壁生長狀態(tài)較好，但隨著葡萄糖處理濃度的增加，細(xì)胞形狀由近似圓形逐漸變?yōu)殚L梭形，且細(xì)胞間隙變大、貼壁細(xì)胞減少，生長狀態(tài)變差。A圖4.1.2人腎小管上皮細(xì)胞葡萄糖不同濃度的形態(tài)學(xué)改變Fig.4.1.2MorphologicalchangesofhumantubularepithelialcellsindifferentglucoseconcentrationA．隨著葡萄糖濃度增加，HK-2細(xì)胞形態(tài)學(xué)明顯改變，貼壁細(xì)胞數(shù)量明顯減少標(biāo)尺=200μm4.1.3不同濃度葡萄糖處理HK-2細(xì)胞AKT和ERK蛋白表達(dá)通過Westernblot檢測不同濃度葡萄糖處理各組HK-2細(xì)胞的AKT和ERK蛋白表達(dá)情況，如圖4.1.3A所示，和Normal組（0mM組）相比，相同時(shí)間隨著葡萄糖處理濃度的升高，HK-2細(xì)胞總蛋白AKT表達(dá)略有下降（P0.05），p-AKT表達(dá)稍有上調(diào)（P0.05），但p-AKT和AKT比值（p-AKT/AKT）明顯升高（P0.01）。和Normal組（0mM組）相比，相同時(shí)間隨著葡萄糖處理濃度的升高，HK-2細(xì)胞總蛋白ERK表達(dá)明顯上調(diào)（P0.01），p-ERK表達(dá)明顯上調(diào)（P0.05），

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]How tubular epithelial cells dictate the rate of renal fibrogenesis?[J]. Kevin Louis,Alexandre Hertig.  World Journal of Nephrology. 2015(03)



本文編號(hào)：3298061