殼聚糖/羅非魚多肽生物醫(yī)用材料燙傷修復及止血性能研究
發(fā)布時間:2021-06-10 01:10
創(chuàng)傷是人體組織或器官最常見的疾病之一。局部戰(zhàn)爭、恐怖襲擊、自然災害及突發(fā)事故,如割傷、摔傷、墜落傷、車禍、燒傷及燙傷等均是創(chuàng)傷發(fā)生的重要原因。對創(chuàng)傷患者的治療,不僅需要及時止血,還需要關注組織再生和功能的有效恢復。該類疾病具有較高的永久性疤痕發(fā)生風險,患者醫(yī)療負擔重,心理壓力大,威脅人類的健康。因此,如何有效控制創(chuàng)傷后出血,實現(xiàn)組織的快速修復和功能的有效恢復,是創(chuàng)傷修復生物醫(yī)用材料研究開發(fā)的熱點和難點。殼聚糖(CS)和羅非魚多肽(TP)均具有良好生物相容性、生物可降解性,無毒、無免疫原性等多種生物活性,有開發(fā)成止血和創(chuàng)傷修復醫(yī)用材料的巨大潛力。研究以CS和TP為原料,通過生物活性篩選、配比優(yōu)化、材料成型及機制解析,不僅為基于殼聚糖/羅非魚多肽的創(chuàng)傷修復生物醫(yī)用材料制備奠定基礎,還為海洋生物資源的高值化利用提供方法學借鑒。主要研究內容和結果如下:1、以金黃色葡萄球菌和大腸桿菌為指示菌,研究不同濃度和不同分子量CS對指示菌的抑菌活性。結果表明,隨著濃度的增大,CS抑菌圈直徑增大。分子量為100 kDa的CS對金黃色葡萄球菌的抑菌效果最好;分子量3.5 kDa和100 kDa的CS均對大腸桿...
【文章來源】:廣東海洋大學廣東省
【文章頁數(shù)】:125 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
皮膚的結構
1.2.1 殼聚糖概述殼聚糖是從多種海洋生物中分離得到的一種具有生物相容性和生物可降解性的甲殼素多糖,它是由甲殼素脫乙酰基而獲得(見圖 1-2)。甲殼素最常見的來源是蝦蟹殼,我國每年約有 230 萬噸的蝦蟹殼作為食物廢料被廢棄[20, 21]。殼聚糖是一種線性多糖,由葡萄糖胺和 N-乙酰葡萄糖胺經β(1-4)糖苷鍵連接形成基本單元,其結構式如圖 1-2 所示。殼聚糖一般不溶于水和堿性溶液,可溶解在稀酸溶液中,比如稀鹽酸、稀醋酸、有機酸等。在殼聚糖溶液中,游離的氨基可被質子化使其帶正電荷,這賦予殼聚糖很多優(yōu)良的特性[22]。有研究報道,帶正電荷的殼聚糖可與紅細胞表面的負電荷作用促使紅細胞的粘附聚集,從而促進凝血,有利于保護受損傷的皮膚[23]。殼聚糖的陽離子可以與細菌細胞壁表面的陰離子結合,破壞細菌細胞的通透性,從而抑制了細菌細胞內部物質的合成與運輸導致細菌死亡[22]。此外,殼聚糖的氨基可通過螯合金屬離子得到季銨鹽殼聚糖其羥基還可經醚化和酯化反應得到 N,O-羧甲基殼聚糖和雙胍鹽殼聚糖等殼聚糖衍生物[24],由此所得出的殼聚糖衍生物既保留了殼聚糖優(yōu)良的性能,又賦予殼聚糖新的活性,拓寬了殼聚糖在生物醫(yī)學領域的應用[25]。
聚糖/羅非魚多肽生物醫(yī)用材料燙傷修復及止血性能研細胞無此功能。用二甲基亞砜溶出該紫色結晶物,測量值,該紫色結晶物的形成量與活細胞數(shù)成正比,可以反映活力[99, 100]。生長曲線的繪制方法培養(yǎng)細胞,取生長良好的細胞,用新鮮的 PBS 沖洗化,加入新鮮的細胞培養(yǎng)液終止消化,離心后取上清,加細胞懸浮液,將細胞密度調整為 5.0 × 104個/mL,接種 細胞懸液,培養(yǎng)板邊緣孔用無菌 PBS 填充。培養(yǎng)板置養(yǎng)箱中培養(yǎng),每隔一定時間取出待測的 96 孔板,每孔 MTT 繼續(xù)培養(yǎng) 4 小時,甩去 96 孔板中的培養(yǎng)基,然后砜(DMSO)溶液,避光震蕩 5 min,用酶標儀在波長光值。最后以培養(yǎng)時間為橫坐標,吸光值為縱坐標,繪制
本文編號:3221707
【文章來源】:廣東海洋大學廣東省
【文章頁數(shù)】:125 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
皮膚的結構
1.2.1 殼聚糖概述殼聚糖是從多種海洋生物中分離得到的一種具有生物相容性和生物可降解性的甲殼素多糖,它是由甲殼素脫乙酰基而獲得(見圖 1-2)。甲殼素最常見的來源是蝦蟹殼,我國每年約有 230 萬噸的蝦蟹殼作為食物廢料被廢棄[20, 21]。殼聚糖是一種線性多糖,由葡萄糖胺和 N-乙酰葡萄糖胺經β(1-4)糖苷鍵連接形成基本單元,其結構式如圖 1-2 所示。殼聚糖一般不溶于水和堿性溶液,可溶解在稀酸溶液中,比如稀鹽酸、稀醋酸、有機酸等。在殼聚糖溶液中,游離的氨基可被質子化使其帶正電荷,這賦予殼聚糖很多優(yōu)良的特性[22]。有研究報道,帶正電荷的殼聚糖可與紅細胞表面的負電荷作用促使紅細胞的粘附聚集,從而促進凝血,有利于保護受損傷的皮膚[23]。殼聚糖的陽離子可以與細菌細胞壁表面的陰離子結合,破壞細菌細胞的通透性,從而抑制了細菌細胞內部物質的合成與運輸導致細菌死亡[22]。此外,殼聚糖的氨基可通過螯合金屬離子得到季銨鹽殼聚糖其羥基還可經醚化和酯化反應得到 N,O-羧甲基殼聚糖和雙胍鹽殼聚糖等殼聚糖衍生物[24],由此所得出的殼聚糖衍生物既保留了殼聚糖優(yōu)良的性能,又賦予殼聚糖新的活性,拓寬了殼聚糖在生物醫(yī)學領域的應用[25]。
聚糖/羅非魚多肽生物醫(yī)用材料燙傷修復及止血性能研細胞無此功能。用二甲基亞砜溶出該紫色結晶物,測量值,該紫色結晶物的形成量與活細胞數(shù)成正比,可以反映活力[99, 100]。生長曲線的繪制方法培養(yǎng)細胞,取生長良好的細胞,用新鮮的 PBS 沖洗化,加入新鮮的細胞培養(yǎng)液終止消化,離心后取上清,加細胞懸浮液,將細胞密度調整為 5.0 × 104個/mL,接種 細胞懸液,培養(yǎng)板邊緣孔用無菌 PBS 填充。培養(yǎng)板置養(yǎng)箱中培養(yǎng),每隔一定時間取出待測的 96 孔板,每孔 MTT 繼續(xù)培養(yǎng) 4 小時,甩去 96 孔板中的培養(yǎng)基,然后砜(DMSO)溶液,避光震蕩 5 min,用酶標儀在波長光值。最后以培養(yǎng)時間為橫坐標,吸光值為縱坐標,繪制
本文編號:3221707
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