目的:慢性腎臟疾�。–hronic kidney disease,CKD）是指各種原因引起的慢性腎臟結構和功能障礙。慢性腎臟疾病不但病死率高,同時能夠明顯增加患者合并心血管疾病的風險,往往維持治療需要巨額的經濟支出。統計數據顯示,慢性腎臟病發(fā)病率呈逐年增高的趨勢,因此它已經成為備受關注的全球性公共健康問題之一。腎間質纖維化是CKD進展成為腎臟衰竭甚至終末期腎衰竭的重要病理表現。在導致腎間質纖維化的眾多途徑中,腎小管上皮細胞-間質轉分化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）占據著重要的地位,轉化生長因子beta1（Transforming growth factor beta,TGF-β1）被認為是能夠導致腎小管EMT的最關鍵的促纖維化因子之一。而本文研究的Livin/BIRC7最初是在黑色素瘤中被發(fā)現,后被歸類于凋亡抑制蛋白（Inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族。Livin在正常高分化器官中少有表達,但在多種實體腫瘤中參與調控腫瘤的侵襲,轉移和對化療藥物的耐藥等生物學行為。而近期來相關的研究發(fā)現,Livin除... 

【文章來源】： 周潔清 中國醫(yī)科大學

【文章頁數】：69 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

TGF-β誘導HK2細胞發(fā)生EMT

圖 2 TGF-β 誘導 HK2 細胞發(fā)生 EMT圖 2A：2ng/ml TGF-β1 刺激 HK2 細胞 48h 細胞形態(tài)的變化(x200)。圖 2B：2ng/ml TGF-β1 刺激 48h，E-ca、α-SMA 及 vim 的蛋白表達變化。圖 2C：2ng/ml TGF-β1 刺激 48h，檢測 E-ca、α-SMA 及 vim 蛋白表達及分布的影響（免疫熒光×200）。圖 2D：2ng/ml TGF-β1 刺激 48h，qPCR 檢測 TGF-β1 處理組 E-ca 的 mRNA 表達下降，*P＜0.05，α-SMA 和 vim 的 mRNA 表達增高，**P＜0.01。圖 2E：2ng/ml TGFβ1 刺激 48 小時細胞遷移能力的變化，組間比較差異具有統計學意義，**P＜0.01（×100）。注：con 代表對照組；TGF-β1 代表用 2ng/ml TGF-β1 刺激 HK2 細胞 48 小時組，與對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01。3.5 TGF-β1 誘導 HK2 細胞的 Livin 蛋白及 mRNA 的表達

1 誘導 HK2 細胞形態(tài)改變的結果及 Livin 蛋白表達水平的改變，選擇 TGF-β1ng/ml 刺激 HK2 細胞 48 小時為本實驗的條件，見圖 3A。免疫熒光結果顯示，照組 HK2 細胞中細胞漿及細胞核中有極少量的 Livin 蛋白表達，經 2ng/mlGF-β1 刺激 HK2 細胞 48 小時后，HK2 細胞中 Livin 蛋白的表達量明顯升高，在細胞漿及細胞核中均有表達升高，見圖 3B。.5.2 TGF-β1 誘導 HK2 細胞 Livin 的 mRNA 表達qPCR 結果顯示正常對照組 HK-2 細胞中 Livin 的 mRNA 表達水平很低，GF-β1 作用后 Livin 的 mRNA 表達量呈增多趨勢。使用不同濃度梯度的 TGF-1（0ng/ml、1ng/ml、2ng/ml、5ng/ml 及 10ng/ml）作用細胞 48h，結果顯示GF-β1 濃度為 2ng/ml 時 Livin 的 mRNA 表達即有明顯的升高，具有統計學差(P<0.05)。Livin 的 mRNA 表達水平基本與 Livin 蛋白表達趨勢一致。見圖C。


本文編號：3114734