Livin在TGF-β1誘導(dǎo)的人腎小管上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)分化中的作用及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間：2021-04-02 06:02
目的:慢性腎臟疾病（Chronic kidney disease,CKD）是指各種原因引起的慢性腎臟結(jié)構(gòu)和功能障礙。慢性腎臟疾病不但病死率高,同時(shí)能夠明顯增加患者合并心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn),往往維持治療需要巨額的經(jīng)濟(jì)支出。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,慢性腎臟病發(fā)病率呈逐年增高的趨勢(shì),因此它已經(jīng)成為備受關(guān)注的全球性公共健康問(wèn)題之一。腎間質(zhì)纖維化是CKD進(jìn)展成為腎臟衰竭甚至終末期腎衰竭的重要病理表現(xiàn)。在導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化的眾多途徑中,腎小管上皮細(xì)胞-間質(zhì)轉(zhuǎn)分化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）占據(jù)著重要的地位,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子beta1（Transforming growth factor beta,TGF-β1）被認(rèn)為是能夠?qū)е履I小管EMT的最關(guān)鍵的促纖維化因子之一。而本文研究的Livin/BIRC7最初是在黑色素瘤中被發(fā)現(xiàn),后被歸類于凋亡抑制蛋白（Inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族。Livin在正常高分化器官中少有表達(dá),但在多種實(shí)體腫瘤中參與調(diào)控腫瘤的侵襲,轉(zhuǎn)移和對(duì)化療藥物的耐藥等生物學(xué)行為。而近期來(lái)相關(guān)的研究發(fā)現(xiàn),Livin除...
【文章來(lái)源】： 周潔清 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【部分圖文】：
TGF-β誘導(dǎo)HK2細(xì)胞發(fā)生EMT
圖 2 TGF-β 誘導(dǎo) HK2 細(xì)胞發(fā)生 EMT圖 2A：2ng/ml TGF-β1 刺激 HK2 細(xì)胞 48h 細(xì)胞形態(tài)的變化(x200)。圖 2B：2ng/ml TGF-β1 刺激 48h，E-ca、α-SMA 及 vim 的蛋白表達(dá)變化。圖 2C：2ng/ml TGF-β1 刺激 48h，檢測(cè) E-ca、α-SMA 及 vim 蛋白表達(dá)及分布的影響（免疫熒光×200）。圖 2D：2ng/ml TGF-β1 刺激 48h，qPCR 檢測(cè) TGF-β1 處理組 E-ca 的 mRNA 表達(dá)下降，*P＜0.05，α-SMA 和 vim 的 mRNA 表達(dá)增高，**P＜0.01。圖 2E：2ng/ml TGFβ1 刺激 48 小時(shí)細(xì)胞遷移能力的變化，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，**P＜0.01（×100）。注：con 代表對(duì)照組；TGF-β1 代表用 2ng/ml TGF-β1 刺激 HK2 細(xì)胞 48 小時(shí)組，與對(duì)照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01。3.5 TGF-β1 誘導(dǎo) HK2 細(xì)胞的 Livin 蛋白及 mRNA 的表達(dá)
1 誘導(dǎo) HK2 細(xì)胞形態(tài)改變的結(jié)果及 Livin 蛋白表達(dá)水平的改變，選擇 TGF-β1ng/ml 刺激 HK2 細(xì)胞 48 小時(shí)為本實(shí)驗(yàn)的條件，見圖 3A。免疫熒光結(jié)果顯示，照組 HK2 細(xì)胞中細(xì)胞漿及細(xì)胞核中有極少量的 Livin 蛋白表達(dá)，經(jīng) 2ng/mlGF-β1 刺激 HK2 細(xì)胞 48 小時(shí)后，HK2 細(xì)胞中 Livin 蛋白的表達(dá)量明顯升高，在細(xì)胞漿及細(xì)胞核中均有表達(dá)升高，見圖 3B。.5.2 TGF-β1 誘導(dǎo) HK2 細(xì)胞 Livin 的 mRNA 表達(dá)qPCR 結(jié)果顯示正常對(duì)照組 HK-2 細(xì)胞中 Livin 的 mRNA 表達(dá)水平很低，GF-β1 作用后 Livin 的 mRNA 表達(dá)量呈增多趨勢(shì)。使用不同濃度梯度的 TGF-1（0ng/ml、1ng/ml、2ng/ml、5ng/ml 及 10ng/ml）作用細(xì)胞 48h，結(jié)果顯示GF-β1 濃度為 2ng/ml 時(shí) Livin 的 mRNA 表達(dá)即有明顯的升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差(P<0.05)。Livin 的 mRNA 表達(dá)水平基本與 Livin 蛋白表達(dá)趨勢(shì)一致。見圖C。
本文編號(hào)：3114734
【文章來(lái)源】： 周潔清 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【部分圖文】：
TGF-β誘導(dǎo)HK2細(xì)胞發(fā)生EMT
圖 2 TGF-β 誘導(dǎo) HK2 細(xì)胞發(fā)生 EMT圖 2A：2ng/ml TGF-β1 刺激 HK2 細(xì)胞 48h 細(xì)胞形態(tài)的變化(x200)。圖 2B：2ng/ml TGF-β1 刺激 48h，E-ca、α-SMA 及 vim 的蛋白表達(dá)變化。圖 2C：2ng/ml TGF-β1 刺激 48h，檢測(cè) E-ca、α-SMA 及 vim 蛋白表達(dá)及分布的影響（免疫熒光×200）。圖 2D：2ng/ml TGF-β1 刺激 48h，qPCR 檢測(cè) TGF-β1 處理組 E-ca 的 mRNA 表達(dá)下降，*P＜0.05，α-SMA 和 vim 的 mRNA 表達(dá)增高，**P＜0.01。圖 2E：2ng/ml TGFβ1 刺激 48 小時(shí)細(xì)胞遷移能力的變化，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，**P＜0.01（×100）。注：con 代表對(duì)照組；TGF-β1 代表用 2ng/ml TGF-β1 刺激 HK2 細(xì)胞 48 小時(shí)組，與對(duì)照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01。3.5 TGF-β1 誘導(dǎo) HK2 細(xì)胞的 Livin 蛋白及 mRNA 的表達(dá)
1 誘導(dǎo) HK2 細(xì)胞形態(tài)改變的結(jié)果及 Livin 蛋白表達(dá)水平的改變，選擇 TGF-β1ng/ml 刺激 HK2 細(xì)胞 48 小時(shí)為本實(shí)驗(yàn)的條件，見圖 3A。免疫熒光結(jié)果顯示，照組 HK2 細(xì)胞中細(xì)胞漿及細(xì)胞核中有極少量的 Livin 蛋白表達(dá)，經(jīng) 2ng/mlGF-β1 刺激 HK2 細(xì)胞 48 小時(shí)后，HK2 細(xì)胞中 Livin 蛋白的表達(dá)量明顯升高，在細(xì)胞漿及細(xì)胞核中均有表達(dá)升高，見圖 3B。.5.2 TGF-β1 誘導(dǎo) HK2 細(xì)胞 Livin 的 mRNA 表達(dá)qPCR 結(jié)果顯示正常對(duì)照組 HK-2 細(xì)胞中 Livin 的 mRNA 表達(dá)水平很低，GF-β1 作用后 Livin 的 mRNA 表達(dá)量呈增多趨勢(shì)。使用不同濃度梯度的 TGF-1（0ng/ml、1ng/ml、2ng/ml、5ng/ml 及 10ng/ml）作用細(xì)胞 48h，結(jié)果顯示GF-β1 濃度為 2ng/ml 時(shí) Livin 的 mRNA 表達(dá)即有明顯的升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差(P<0.05)。Livin 的 mRNA 表達(dá)水平基本與 Livin 蛋白表達(dá)趨勢(shì)一致。見圖C。
本文編號(hào)：3114734
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