本文關(guān)鍵詞：阿薩希毛孢子菌氟康唑耐藥機(jī)制的蛋白質(zhì)組學(xué)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景：阿薩希毛孢子菌作為常見(jiàn)病原真菌(白念珠菌、煙曲霉、隱球菌)之外的又一個(gè)重要的毒力較強(qiáng)的條件致病性真菌,播散性毛孢子菌感染的病死率高達(dá)50-80%�！づR床及實(shí)驗(yàn)室研究表明唑類藥物具有較好的體內(nèi)外抗阿薩希毛孢子菌活性,但隨著臨床唑類藥物(特別是氟康唑)的廣泛使用,其對(duì)唑類藥物耐藥的報(bào)道逐漸增多。目的：尋找阿薩希毛孢子菌敏感株與相應(yīng)氟康唑誘導(dǎo)耐藥株在氟康唑作用前后的差異蛋白,探尋該菌對(duì)氟康唑耐藥的可能機(jī)制。材料與方法：1 選取氟康唑敏感的臨床株(CBS2479、CBS8904)進(jìn)行氟康唑體外誘導(dǎo)耐藥,獲得耐藥表型穩(wěn)定的耐藥株2479R、8904R;2 iTRAQ多重化學(xué)標(biāo)記-LC-MS質(zhì)譜分析CBS2479和2479R,CBS8904和8904R在氟康唑作用前后蛋白表達(dá)差異；3 應(yīng)用生物信息學(xué)分析手段,對(duì)得到的蛋白質(zhì)組學(xué)研究數(shù)據(jù)結(jié)果,從蛋白質(zhì)功能、通路及網(wǎng)絡(luò)層面篩選耐藥相關(guān)(細(xì)胞膜、離子通道、酶活性等功能)差異蛋白質(zhì)；4 根據(jù)生物信息學(xué)分析的結(jié)果,綜合文獻(xiàn)分析,推測(cè)與阿薩希毛孢子菌唑類耐藥機(jī)制可能相關(guān)的差異蛋白。結(jié)果：1體外誘導(dǎo)獲得阿薩希毛孢子菌穩(wěn)定氟康唑耐藥株；2 iTRAQ多重化學(xué)標(biāo)記-LC-MS質(zhì)譜分析得到CBS2479組質(zhì)譜,鑒定分析出77320個(gè)質(zhì)譜,其中肽段30682個(gè),唯一肽段26847,以及7174個(gè)蛋白點(diǎn)；CBS8904組質(zhì)譜,鑒定分析出35653個(gè)質(zhì)譜,其中肽段12746個(gè),唯一肽段12022,以及4585個(gè)蛋白點(diǎn)；3 CBS8904組生物信息學(xué)分析結(jié)果：以1.5倍作為差異表達(dá)蛋白質(zhì)篩選的條件,CBS8904與誘導(dǎo)耐藥菌株8904R相比,差異表達(dá)蛋白68個(gè),其中上調(diào)及下調(diào)蛋白各34個(gè)；CBS8904氟康唑作用后發(fā)現(xiàn),差異表達(dá)蛋白33個(gè),上調(diào)蛋白9個(gè),下調(diào)蛋白24個(gè)；CBS8904和8904R在氟康唑作用后差異表達(dá)蛋白38個(gè),上調(diào)蛋白31個(gè),下調(diào)蛋白7個(gè)；其中參與類固醇代謝的蛋白Erg2、Erg4、Erg5、Erg7、Erg11、Erg26,參與細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)蛋白Ste12、TOR1、DDR48、HSP70與 Calcineurin相關(guān)蛋白與阿薩希毛孢子菌的耐藥機(jī)制相關(guān)。4 CBS2479組生物信息學(xué)分析結(jié)果：以以1.5倍作為差異表達(dá)蛋白質(zhì)篩選的條件,CBS2479與誘導(dǎo)耐藥菌株2479R相比,差異表達(dá)蛋白167個(gè),其中上調(diào)蛋白91個(gè),下調(diào)蛋白個(gè)；CBS2479氟康唑作用后,差異表達(dá)蛋白55個(gè),上調(diào)蛋白32個(gè),下調(diào)蛋白23個(gè)；CBS2479和2479R在氟康唑作用后差異表達(dá)蛋白159個(gè),上調(diào)蛋白78個(gè),下調(diào)蛋白81個(gè)；其中參與類固醇代謝的蛋白Erg4、Erg5、Erg6、Erg26,細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)蛋白DDR48、calcineurin相關(guān)蛋白、HSP與阿薩希毛孢子菌的耐藥機(jī)制相關(guān)。結(jié)論：1體外誘導(dǎo)阿薩希毛孢子菌可以獲得穩(wěn)定的阿薩希毛孢子菌耐藥株,并用于阿薩希毛孢子菌的耐藥研究；2阿薩希毛孢子菌敏感株與氟康唑誘導(dǎo)耐藥株,在氟康唑干預(yù)下存在差異表達(dá)蛋白,參與類固醇代謝和細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)的相關(guān)蛋白與阿薩希毛孢子菌的耐藥機(jī)制相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：阿薩希毛孢子菌 氟康唑 耐藥機(jī)制 蛋白質(zhì)組學(xué)
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R519
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-15
• 1 阿薩希毛孢子菌概述12-13
• 2 本課題的設(shè)計(jì)來(lái)源13-15
• 第一部分 微量液基稀釋法檢測(cè)T.ASAHII體外藥物敏感性15-21
• 1 研究背景15
• 2 實(shí)驗(yàn)材料15-17
• 3 實(shí)驗(yàn)方法17-19
• 4 結(jié)果19-20
• 5 討論20-21
• 第二部分 阿薩希毛孢子菌人工誘導(dǎo)氟康唑耐藥株模型構(gòu)建及其生物學(xué)特性的初步研究21-31
• 1 研究背景21
• 2 實(shí)驗(yàn)材料21
• 3 實(shí)驗(yàn)方法21-24
• 4 結(jié)果24-28
• 5 討論28-31
• 第三部分 ITRAQ多重化學(xué)標(biāo)記-LC-MS質(zhì)譜分析比較誘導(dǎo)耐藥株與親本及氟康唑干預(yù)后蛋白表達(dá)差異31-51
• 1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>31
• 2 實(shí)驗(yàn)材料31
• 3 實(shí)驗(yàn)步驟31-34
• 4 數(shù)據(jù)搜索34
• 5 蛋白差異結(jié)果34-48
• 6 討論48-51
• 第四部分 差異蛋白質(zhì)的生物信息學(xué)分析(CBS2479和CBS8904)51-150
• 1 研究目的51
• 2 生物信息學(xué)方法51
• 3 CBS8904生物信息學(xué)分析結(jié)果51-98
• 4 CBS2479生物信息學(xué)分析結(jié)果98-142
• 5 研究小結(jié)142-144
• 6 討論144-150
• 參考文獻(xiàn)150-156
• 綜述一156-164
• 參考文獻(xiàn)160-164
• 中英文縮略詞表164-165
• 博士在讀期間發(fā)表的文章與參與的課題165-166
• 致謝166

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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 楊蓉婭;敖俊紅;王文嶺;張潔;郝震鋒;萬(wàn)U

本文編號(hào)：278896