【摘要】：非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是指除外酒精和其他明確的損肝因素所致的肝細胞內脂肪過度沉積為主要特征的臨床病理綜合征,其包括單純性脂肪肝(SFL)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)及其相關肝硬化。對該疾病機制研究顯示其與胰島素抵抗和遺傳易感性密切相關。前期的研究結果顯示,護肝清脂片作為一種中藥復方,展現(xiàn)出了良好的降脂抗炎作用。然而,其對NAFLD的防治作用的相關機制還不是很明確。在本次研究中,我們首先驗證檢測了護肝清脂片對游離脂肪酸誘導的L02細胞脂肪變性的保護作用。然后運用血清藥理學與iTRAQ蛋白標記定量技術相結合的方法來闡明護肝清脂片對游離脂肪酸誘導的L02細胞脂肪變性的保護作用機制。結果顯示護肝清脂片能顯著地改善游離脂肪酸導致的L02細胞中相關炎癥因子、氧化應激以及脂質積累的影響。后續(xù)的的iTRAQ蛋白定量結果顯示:游離脂肪酸單獨刺激組與空白組比較,有355個蛋白表達發(fā)生改變,即鑒定到355個差異蛋白。同樣地,護肝清脂藥物血清高劑量組干預后與單獨游離脂肪酸誘導組比較,有359個差異蛋白;護肝清脂藥物血清高劑量組干預后與空白組比較,有365個差異蛋白。對所有差異蛋白的pathway分析結果顯示有多條信號通路被注釋到,比如:微生物在不同環(huán)境中的代謝(microbial metabolism in diverse environments),脂肪酸代謝(fatty acid metabolism),過氧化物酶體增殖物激活受體信號通路(peroxisome proliferator activated receptor signaling pathway),絲裂原活化蛋白激酶信號通路(mitogen-activated protein kinase signaling pathway)等與護肝清脂片對游離脂肪酸誘導的L02細胞脂肪變性的保護作用有關。此外,本次試驗還對其中的一些差異蛋白包括 heat shock protein 27(HSP27),acetyl-CoA acetyltransferase 1,calnexin,and integrin-linked kinase進行了后續(xù)的Western blotting驗證。最后運用特異性siRNA將HSP27沉默,檢測了 ROS、IL-6以及TNF-α水平,進一步揭示了 HSP27蛋白在護肝清脂片藥物血清對游離脂肪酸誘導的L02細胞脂肪變性的保護作用中所扮演的角色。以上所有結果證明護肝清脂片對游離脂肪酸誘導的L02細胞具有很好的保護作用,且該與上述蛋白的功能有關。
【圖文】：

ＣＶ邋（Ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ邋ｏｆ邋Ｖａｒｉａｔｉｏｎ）變異系數(shù)可以反映數(shù)據的離散程度，是數(shù)據標逡逑準方差和平均值的比值，用百分數(shù)表示，具體表達式為ＣＶ邋＝邋（標準偏差ＳＤ／平均逡逑值ｍｅａｎ）ｘ邋１邋00％。圖２－２表示不同樣品的ＣＶ值分布及盒形圖，從左圖中可以看出，逡逑當ＣＶ的閾值設置在２０％時，三組樣品（Ｃ、ＦＦＡ、ＨＨ）的ＣＶ累計百分比分別逡逑為９０．４５％、９１．２５％以及８８．５４％，相對來說，ＦＦＡ樣品的ＣＶ值更加集中在低值逡逑區(qū)域，說明ＦＦＡ樣品的重復性更好。而通過右側ＣＶ盒形圖更加直觀的顯示出不逡逑同實驗組ＣＶ值的對比，不同顏色的盒形圖代表了不同實驗組的ＣＶ分布，盒子逡逑的上下兩邊為上下四分位數(shù)線，，盒子中間的黑色橫線是數(shù)據中位數(shù)（數(shù)據中占據逡逑中間位置的數(shù)）。通過盒子的上下四分位數(shù)可以判斷出，相對來說，Ｃ樣品的ＣＶ逡逑３８逡逑

ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ＊邋ＣＶ邋ｖａｌｕｅ，邋Ｂｌａｃｋ邋ｌｉｎｅ邋ｏｎ邋ｔｈｅ邋ｔｏｐ邋ｏｆ邋Ｂｏｘ邋ｓｈｏｗｅｄ邋ｔｈｅ邋ｐｏｓｉｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ｍｅｄｉａｎ．逡逑４．３邋ｉＴＲＡＱ各實驗組樣品相關性分析逡逑相關性分析可以衡量出不同樣品之間的相關密切程度。圖２－３綜合的反映了逡逑不同實驗樣品（１１３：Ｃ１，邋１１４：Ｃ２，邋１１５：ＦＦＡ１，１１６：ＦＦＡ２，邋１１７：ＦＦＡ３，邋１１８：ＨＨ１，逡逑１１９：邋ＨＨ２，邋１２１：邋ＨＨ３）中重復樣品的Ｐｅａｒｓｏｎ相關性，數(shù)據來源于：以１１３標記逡逑樣品（Ｃ１）作為分母，所有差異蛋白質（經比值和Ｐ值判斷）的比值經過以２為逡逑底數(shù)的對數(shù)轉化后的值，從結果中可以看出，重復樣品的比值相關系數(shù)達到了邋０．７逡逑以上，說明本項目的重復性較好。逡逑３９逡逑
【學位授予單位】：南方醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 王心昶,譚朝柱,布譯仁,李永忠,劉旭明,賈氳;肝脂肪變性65例臨床分析[J];實用內科雜志;1990年02期

2 陳云茹;劉敏;陳天艷;張樹林;;丙型肝炎病毒核心蛋白引發(fā)肝脂肪變性及其分子學機制[J];國際流行病學傳染病學雜志;2006年05期

3 任星峰;葛婭;楊群;趙甫濤;;慢性乙型肝炎肝脂肪變性的組織學特點[J];世界華人消化雜志;2003年01期

4 張?zhí)O蘋;王亞東;趙彩彥;;慢性病毒性肝炎與肝脂肪變性[J];國際內科學雜志;2008年07期

5 周金煦;;1-磷酸葡萄糖對肝脂肪變性的作用[J];藥學文摘;1958年10期

6 胡錫琪;胡德昌;張希德;印建芳;;妊娠急性肝脂肪變性的臨床病理研究[J];上海醫(yī)學;1990年04期

7 鄭進方,王海東,梁力建;一氧化氮對大鼠全胃腸外營養(yǎng)肝脂肪變性的防護作用(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2002年09期

8 劉曉;朱月永;任杰;江家驥;傅瑾;;醫(yī)用脂肪乳誘導的肝脂肪變性細胞模型的建立[J];肝臟;2010年06期

9 周劍莉;;肝脂肪變性和肝細胞水樣變的一種診斷實驗法[J];醫(yī)學信息(上旬刊);2011年04期

10 G.d'Assignies;M.Ruel;A.Khiat;L.Lepanto;M.Chagnon;C.Kauffmann;郭雪梅;;磁共振與生物分析法無創(chuàng)定量分析人肝脂肪變性[J];國際醫(yī)學放射學雜志;2009年05期

相關會議論文 前1條

1 高鑫;范建高;;中華醫(yī)學會內分泌學分會“非酒精性脂肪性肝病與相關代謝紊亂診療共識”[A];中華內分泌學分會《肝病與代謝》學組年會暨2012年復旦大學脂肪肝與代謝紊亂論壇論文集[C];2012年

相關重要報紙文章 前2條

1 成都 代廷榮;急性肝脂肪變性腦病蠻兇險[N];大眾衛(wèi)生報;2003年

2 維巧;警惕急性肝脂肪變性腦病[N];大眾衛(wèi)生報;2005年

相關博士學位論文 前1條

1 夏凡;護肝清脂片對FFA誘導的肝脂肪變性L02細胞的藥理保護作用及蛋白質組學研究[D];南方醫(yī)科大學;2017年

相關碩士學位論文 前8條

1 康娜玲;血清銅藍蛋白對于慢性乙型肝炎患者合并肝脂肪變性預測價值的初步研究[D];福建醫(yī)科大學;2015年

2 曾璐;基于肝脂肪變性HepG2細胞模型探討護肝清脂片主要成分對脂質代謝的影響及可能機制[D];南方醫(yī)科大學;2015年

3 陳曉;阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征與脂肪肝指數(shù)的相關性[D];福建醫(yī)科大學;2015年

4 伍小瓊;肝脂肪變性和肝脂肪酸結合蛋白在乙肝相關性肝細胞癌癌組織的表達研究[D];中南大學;2011年

5 劉靖;甘氨酸對小鼠脂質代謝的影響及對肝脂肪變性的抑制作用[D];暨南大學;2005年

6 張哲;慢性病毒性肝炎繼發(fā)肝脂肪變性小鼠模型的建立[D];南方醫(yī)科大學;2013年

7 殷錦錦;護肝清脂片對肝脂肪變性L02細胞模型的藥理作用及機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2014年

8 胡金祥;內源性一氧化氮與慢性酒精性肝脂肪變性關系的研究[D];浙江大學;2002年

本文編號：2569502