本文選題：西達(dá)本胺　切入點：地西他濱　出處：《南京醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：目的:探討西達(dá)本胺、地西他濱以及兩藥聯(lián)合對白血病細(xì)胞株HL60及NB4的增殖抑制作用及其可能的相關(guān)分子機(jī)制。方法:以不同濃度的西達(dá)本胺、地西他濱單藥及兩藥聯(lián)合處理HL60和NB4細(xì)胞,采用CCK-8法測定HL60、NB4細(xì)胞的增殖抑制情況,并用CompuSyn軟件分析兩藥協(xié)同效果;采用倒置顯微鏡觀察藥物處理后細(xì)胞形態(tài)變化;AnnexinV/PI雙染法流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡情況;DNA Ladder法檢測細(xì)胞凋亡條帶;PI染色流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期變化;實時定量PCR(RT-PCR)技術(shù)來檢測凋亡相關(guān)基因(Bax、Bcl-2、Caspase-3)mRNA表達(dá)水平;Western Blot檢測p21、Procaspase-3、Bax及Bcl-2蛋白的表達(dá)情況;ELISA法測定西達(dá)本胺對組蛋白去乙�；傅囊种谱饔靡约癢estern Blot檢測西達(dá)本胺干預(yù)后組蛋白H3(Histone H3)的表達(dá)情況。所有實驗均重復(fù)3次,結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((?)±s,%)表示,P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1.西達(dá)本胺能明顯抑制白血病細(xì)胞株HL60及NB4的增殖,在0.25-8 μmol/L的濃度范圍內(nèi),其抑制作用可呈劑量和時間依賴性(P0.05);地西他濱在0.5-100μmol/L的濃度范圍內(nèi),其對白血病細(xì)胞株HL60及NB4的增殖抑制作用也呈劑量及時間依賴性(P0.05);西達(dá)本胺聯(lián)合地西他濱能明顯增加對白血病細(xì)胞株HL60及NB4的抑制作用,兩藥聯(lián)合作用強(qiáng)于單藥(P0.05),CompuSyn軟件分析表明兩個藥物之間有顯著的協(xié)同抗白血病效果。2.西達(dá)本胺、地西他濱單藥或兩藥聯(lián)合處理后,倒置顯微鏡下觀察可見HL60、NB4細(xì)胞出現(xiàn)的細(xì)胞死亡形態(tài)改變。3.西達(dá)本胺有效地抑制組蛋白去乙酰化酶活性,誘導(dǎo)乙�；M蛋白H3表達(dá)水平升高。4.西達(dá)本胺可使HL60和NB4細(xì)胞阻滯于G0/G1期,而地西他濱使HL60和NB4細(xì)胞的G2/M期細(xì)胞比例明顯增加,兩藥聯(lián)合組以G2/M期增加為主。Western Blot檢測細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白p21表達(dá)水平明顯提高。5.西達(dá)本胺、地西他濱單藥或聯(lián)合用藥后,HL60及NB4白血病細(xì)胞的凋亡率明顯增高(P0.05),聯(lián)合用藥組細(xì)胞凋亡率顯著高于單獨用藥組(P0.05)。單藥組和聯(lián)合用藥組均可引起B(yǎng)ax、Caspase-3蛋白表達(dá)水平增加、Bcl-2蛋白表達(dá)水平下降。結(jié)論:1.西達(dá)本胺、地西他濱單藥均能明顯抑制白血病細(xì)胞株HL60、NB4的增殖,并呈劑量及時間依賴性;兩藥聯(lián)合則能顯著抑制HL60、NB4細(xì)胞的增殖,兩藥具有協(xié)同性。2.西達(dá)本胺、地西他濱單藥及兩藥聯(lián)合對HL60、NB4細(xì)胞增殖抑制作用是通過誘導(dǎo)凋亡及周期阻滯來實現(xiàn)的。3.西達(dá)本胺是通過抑制組蛋白去乙�；富钚�,上調(diào)乙酰化組蛋白H3水平發(fā)揮作用的。4.促進(jìn)HL60、NB4細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制為直接或間接增加p21、Caspase-3蛋白的表達(dá),調(diào)控Bcl-2家族蛋白。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R733.7

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1686474