智三針干預對AD模型大鼠學習記憶的影響及作用機制研究
發(fā)布時間:2018-03-13 09:22
本文選題:老年性癡呆 切入點:智三針 出處:《廣州中醫(yī)藥大學》2015年博士論文 論文類型:學位論文
【摘要】:目的:本研究以AD大鼠模型為實驗載體,應用智三針進行干預,通過觀察智三針對AD大鼠的學習記憶能力、大腦海馬PP1/PP2A蛋白表達、AChAT:膽堿乙;)、AGhE(乙酰膽堿酯酶)活性以及大鼠血清GSH-Px活力影響,初步探討針刺的抗AD作用機制。方法:將80只SD雄性大鼠按體重隨機分成A、B、C、 D四組,每組20只,分別編予A1~20號、B1-20號、C1-20、D1~20號,其中D組又稱正常組。4組均經(jīng)腹腔內連續(xù)注射D-半乳糖50mg/Kg/d6周,之后ABC三組進行造模。模型組大鼠用牙科鉆在顱骨上打孔,注射A β 1-40溶液2ul(10ug)。AD模型大鼠被分為三組,分別是智三針組、非穴組和模型組。造模成功1周后,智三針組予針刺神庭及雙側本神穴,非穴組予針刺大鼠雙肋下固定非穴點針刺方法:毫針針刺,均勻捻轉,角度180°,頻率60次/min。持續(xù)刺激2min,休息1min,如此反復,持續(xù)15min。療程:每天1次,周末休息,治療4周,共20次。正常組大鼠和模型組大鼠同樣抓取、固定、取穴、消毒,但是不予針刺治療。沿額極后2mm-8mm冠狀位切取大腦海馬組織,做免疫組化。大鼠學習記憶能力測試在Y迷宮系統(tǒng)中進行。實驗結束后處死實驗大鼠,檢測大腦海馬PP1、PP2A蛋白表達、AChAT(膽堿乙;)、AChE(乙酰膽堿酯酶)活性以及大鼠血清GSH-Px活力。成果:1.相同時間點,不同組間TRT比較:第1、2、3、4、31天,模型組、智三針組都大于正常組(P0.05);第31天,智三針組小于模型組(P0.05)。同一組別,不同時間點TRT比較:(1)模型組第1天與第2、3、4、31天比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),第2、3、4、31天兩兩比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)正常組第1天與第2天比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);與第3、4、31天比較,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.05);第2天與第3、4天比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);與第31天比較,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.05);第3、4、31天兩兩比較,差異無統(tǒng)計學意義(PO.05)。(3)智三針組第1天與第2、3、4、31天比較,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.05);第2天與第3、4天比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);與第31天比較,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.05)。2.免疫組織化學檢測研究表明,與正常組大鼠比較,模型組大鼠大腦海馬的PP1、 PP2A蛋白表達均顯著降低,經(jīng)過智三針干預PP1、PP2A蛋白表達均顯著上升,但跟正常大鼠比較還有顯著差異。3.與正常組大鼠比較,模型組大鼠大腦海馬的ChAT、AchE活性均顯著降低,經(jīng)過智三針干預ChAT、AchE活性均顯著上升,但跟正常組的大鼠比較還有顯著差異,而與非穴位組的大鼠的ChAT、AchE活性進行比較,差異顯著。4.模型組、非穴位組及智三針組大鼠血清的GSH-Px活力較正常組均顯著降低,經(jīng)統(tǒng)計學分析,差異有極顯著性(P0.001),智三針組與模型組外周血清GSH-Px活力比較,經(jīng)統(tǒng)計學分析,差異有極顯著性(P0.01),非穴組與智三針組外周血清GSH-Px活力比較,經(jīng)統(tǒng)計學分析,差異有極顯著性(P0.01)。結論:1.智三針干預治療AD模型大鼠可以減少全天總反應時間(TRT),且TRT明顯較模型組和非穴位組縮短,差異均有統(tǒng)計學意義,表明智三針可以改善AD大鼠的學習記憶功能。2.智三針干預AD模型大鼠可能是通過升高大鼠大腦海馬的PP1、PP2A蛋白表達起作用的。3.智三針對AD大鼠模型的治療作用可能是通過增強大鼠腦內ChAT、chE活性而產(chǎn)生的,針刺治療可以使AD模型大鼠腦組織乙酰膽堿含量增高,ChAT、 AchE活性增強,使AD大鼠中樞膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)處于活躍狀態(tài)。通過“智三針”治療,AD模型大鼠腦組織內乙酰膽堿合成和釋放降解速度加快,利用率顯著提升,腦組織乙酰膽堿含量得到提高。4.智三針能阻抑氧自由基對模型大鼠神經(jīng)系統(tǒng)的氧化性損傷,起保護性作用。
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本文編號:1605760
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