本文選題：運脾開胃方　切入點：厭食癥　出處：《南京中醫(yī)藥大學》2017年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：研究目的:研究運脾開胃方對厭食癥大鼠血清、胃竇、空腸部Ghrelin、VIP水平及其下游信號蛋白的表達影響,明確運脾開胃方對Ghrelin、VIP信號通路的干預作用;探究運脾開胃方中存在的化學成分,明確其在治療厭食癥質(zhì)量方面的物質(zhì)基礎(chǔ)。研究方法:1.用特制飼料建立厭食癥的大鼠模型,使用運脾開胃方治療,觀察大鼠的食欲、體重變化觀察情況。2.檢測大鼠血清、胃腸道中VIP、Ghrelin水平;檢測胃腸道中VIP、Ghrelin受體及其下游信號蛋白的表達及磷酸化水平。3.用運脾開胃含藥血清刺激HGSMC,觀測細胞內(nèi)Ca2+水平的變化情況,檢測細胞內(nèi)IP3R、PKC、MLC及其磷酸化水平。4.運用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析運脾開胃方的單體化學成分。5.用Ghrelin受體抑制劑阻斷人胃竇平滑肌細胞HGSMC上的GHSR,用取得的化學成分刺激HGSMC,觀測細胞內(nèi)Ca2+、MLC及其磷酸化水平變化情況。6.選擇對HGSMC內(nèi)Ga2+有干預作用的化學單體成分給小鼠口服灌胃,同時予以Ghrelin受體抑制劑阻斷小鼠體內(nèi)的GHSR,檢測小鼠胃排空的變化情況及小鼠胃部MLC及其磷酸化水平的變化。結(jié)果:1.經(jīng)特制飼料喂養(yǎng)8周后,各組雌、雄大鼠進食量、體重均出現(xiàn)顯著下降,出現(xiàn)顯著厭食癥癥狀(P0.05或0.01)。經(jīng)運脾開胃方治療4-6周后,低、中劑量組大鼠進食量明顯升高和模型組、自然恢復組出現(xiàn)顯著統(tǒng)計學差異(P0.05或0.01),但高劑量組和模型組、自然恢復組相比未見統(tǒng)計學差異(P0.05)。給藥6周后,低、中、高劑量雄性大鼠體重和模型組、自然恢復組相比出現(xiàn)顯著統(tǒng)計學差異(P0.05或0.01)。但雌性大鼠的體重只有低、中劑量組和模型組、自然恢復組相比出現(xiàn)統(tǒng)計學差異(P0.05或0.01),高劑量組只和自然恢復組出現(xiàn)統(tǒng)計學差異(P0.05)。2.運脾開胃方可以顯著提高厭食癥大鼠血清中Ghrelin水平,以中劑量組最為明顯,和空白組、模型組、自然恢復組相比均有顯著統(tǒng)計學差異(P0.01),其次為低劑量組。經(jīng)運脾開胃方干預后,低、中劑量組大鼠胃竇部Ghrelin水平顯著升高并具有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01),而高劑量組大鼠胃竇部Ghrelin水平只和模型組相比有明顯上升(P0.05)。和空白組、模型組相比,運脾開胃高劑量組空腸Ghrelin水平明顯上升具有統(tǒng)計學差異(P0.05或0.01),低、中劑量組只和模型組相比具有統(tǒng)計學差異(P0.05)。和空白組、模型組、自然恢復組相比,經(jīng)各劑量的運脾開胃方干預后大鼠胃竇部GHSR水平未見明顯變化(P0.05);運脾開胃低、高劑量組大鼠胃竇部p-IP3R出現(xiàn)顯著升高,和空白組、模型組、自然恢復組相比均有顯著統(tǒng)計學差異(P0.01);低、中、高組大鼠胃竇部P-PKC水平較模型組、自然恢復相比均出現(xiàn)顯著升高(P0.01);經(jīng)運脾開胃方干預后,只有中劑量組大鼠胃竇部的p-MLC水平出現(xiàn)了顯著的上調(diào),和空白組、模型組、自然恢復組相比均有統(tǒng)計學差異(P0.01)。經(jīng)低、中劑量的運脾開胃方干預后,厭食癥大鼠空腸部GHSR未見明顯變化(P0.05);經(jīng)運脾開胃方干預后,低、中劑量組大鼠空腸部p-IP3R較模型組、空白組出現(xiàn)顯著升高趨勢(P0.01),但是自然恢復組p-IP3R水平較模型組也同樣出現(xiàn)顯著的上調(diào)趨勢(P0.01);經(jīng)運脾開胃方各劑量干預后,低、中、高組大鼠胃竇部p-PKC水平較模型組、自然恢復相比均出現(xiàn)顯著升高的趨勢(P0.01);和其他各組相比,模型組p-MLC表達明顯降低,且具有不同程度的統(tǒng)計學差異(P0.01或P0.05)。3.經(jīng)各劑量運脾開胃方治療后,低、中、高劑量組厭食癥大鼠的VIP水平出現(xiàn)一定程度的上升,但是只有高劑量組的VIP水平出現(xiàn)明顯的上調(diào),和空白組、模型組、自然恢復組相比出現(xiàn)統(tǒng)計學差異(P0.05)。低、中、高劑量組和空白組大鼠胃竇、空腸部VIP水雖出現(xiàn)了一定程度的升高,但是沒有統(tǒng)計學差異(P0.05)。經(jīng)運脾開胃方低、中、高劑量組干預后厭食癥大鼠胃竇部VPAC2水平顯著升高(P0.01);低、中、高劑量組大鼠胃竇部p-PKA均出現(xiàn)了顯著的上調(diào)趨勢,但是和空白組相比只有高劑量組體現(xiàn)出了顯著提高趨勢(P0.01);和模型組、自然恢復組相比,經(jīng)運脾開胃方干預后低、中劑量組厭食癥大鼠胃竇部p-eNOS水平明顯升高,且具有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01),而低劑量組p-eNOS表達水平卻未見明顯變化(P0.05)。和模型組、自然恢復組相比,經(jīng)運脾開胃方低、中、高劑量組干預后厭食癥大鼠胃竇部VPAC2水平顯著升高(P0.01);和模型組、自然恢復組相比,經(jīng)運脾開胃方干預后,低、中、高劑量組大鼠胃竇部p-PKA均出現(xiàn)了顯著的上調(diào)趨勢(P0.05或0.01),但是和空白組相比卻體現(xiàn)出了顯著下降趨勢(P0.01)。和模型組、自然恢復組相比,經(jīng)運脾開胃方干預后只有低劑量組厭食癥大鼠胃竇部p-eNOS水平明顯升高,且具有顯著統(tǒng)計學意義(P0.05或0.01)。4.運脾開胃含藥血清中、高劑量組能在10-40s時間段內(nèi)顯著提升HGSMCs內(nèi)的Ca2+熒光強度(P0.01),低劑量組運脾開胃含藥血清刺激HGSMCs20s后相對熒光強度開始出現(xiàn)顯著統(tǒng)計學差異(P0.01),持續(xù)20s。運脾開胃含藥血清刺激10、20 min后可以顯著上調(diào)p-IP3R水平且具有明顯的量效依賴關(guān)系;運脾開胃各劑量組含藥血清刺激HGSMCs 1Omin后,可見HGSMCs內(nèi)p-PKC、p-MLC水平顯著上升(P0.01或0.05)且具有明顯的量效依賴關(guān)系,其余時段運脾開胃各組p-PKC、p-MLC水平雖然也有一定程度的上升,但是上調(diào)的程度不及1Omin。(D-Lys3)-GHRP-6能顯著抑制運脾開胃含藥血清對p-IP3R、p-PKC、p-MLC的上調(diào)作用且具有顯著統(tǒng)計學意義(P0.01);D-HBSS和Thapsigargin能顯著抑制運脾開胃含藥血清對p-IP3R、p-MLC的上調(diào)作用(P0.01),但是卻不能抑制運脾開胃含藥血清對p-PKC的上調(diào)作用。5.UPLC-LTQ-Qrbitrap色譜圖和質(zhì)譜結(jié)果顯示,運脾開胃方中存在蘆丁、牡荊素、柚皮苷、橙皮苷、川陳皮素、桔皮素、蒼術(shù)素、綠原酸、金絲桃苷、木犀草素、芹菜素、槲皮素12個化學單體成分,分別來自于陳皮、山楂和蒼術(shù),未發(fā)現(xiàn)來源于雞內(nèi)金的成分。6.在運脾開胃12個化學單體成分中,只有柚皮苷、蒼術(shù)素引起的Ca2+內(nèi)流能被(D-Lys3)-GHRP-6所阻斷。蒼術(shù)素在10min左右可以顯著提高p-MLC水平,同時具有明顯的量效依賴關(guān)系(P0.01)。(D-Lys3)-GHRP-6、D-HBSS 和 Thapsigargin 均能抑制蒼術(shù)素對HGSMCs內(nèi)p-MLC的上調(diào)作用。蒼術(shù)素可以顯著提高昆明小鼠的胃排空率,但是只有蒼術(shù)素中、高劑量組的升高具有統(tǒng)計學意義(P0.05或0.01),而低、中、高劑量的蒼術(shù)素還能上調(diào)小鼠胃竇部的p-MLC水平(P0.05或0.01);在使用(D-Lys3)-GHRP-6對小鼠腹腔進行注射后,蒼術(shù)素對小鼠的促胃排空和上調(diào)胃竇部p-MLC水平的能力均被明顯抑制(P0.01)。結(jié)論:1.運脾開胃方可以顯著改善成年厭食癥大鼠進食減少和體重減輕的癥狀,對大鼠厭食癥有著非常顯著的療效。2.低、中、高劑量的運脾開胃方可以顯著上調(diào)厭食癥大鼠血清和胃竇部Ghrelin的水平,對大鼠胃竇、空腸部的p-IP3R、p-PKC、p-MLC有不同程度的上調(diào)的作用,對厭食癥大鼠的胃腸運動有顯著的促進作用。3.運脾開胃方各劑量組能不同程度上調(diào)厭食癥大鼠胃竇、空腸部VIP下游p-PKA、p-eNOS水平,促進胃腸道平滑肌的容受性舒張,其機制可能和上調(diào)VIP受體VPAC2有關(guān)。4.運脾開胃含藥血清能顯著上調(diào)HGSMCs中p-IP3R、p-PKC、p-MLC水平,其機制與促進細胞內(nèi)Ca2+釋放和激活Ghrelin受體GHSR有關(guān)。5.UPLC-LTQ-Qrbitrap技術(shù)顯示運脾開胃方的水提物中存在蘆丁、牡荊素、柚皮苷、橙皮苷、川陳皮素、桔皮素、蒼術(shù)素、綠原酸、金絲桃苷、橙皮苷、木犀草素、芹菜素、槲皮素這12個化學單體成分,可能為運脾開胃方的物質(zhì)基礎(chǔ)。.6.在運脾開胃方12個化學單體成分中,蒼術(shù)素可以激活HGSMCs表面的GHSR,促進Ca2+內(nèi)流進而上調(diào)細胞內(nèi)p-MLC水平,同時經(jīng)由GHSR促進小鼠胃排空上調(diào)胃竇部p-MLC水平,是運脾開胃方激活Ghrelin信號通路的物質(zhì)基礎(chǔ)之一。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 高峰,何玉秀,張靜;Ghrelin在機體生長與肥胖中的作用研究進展[J];中國運動醫(yī)學雜志;2005年02期

2 鄭吉敏,姜慧卿;Ghrelin研究進展[J];國外醫(yī)學(內(nèi)科學分冊);2005年02期

3 苗培;楊國宇;惠永華;;Ghrelin的研究進展[J];乳業(yè)科學與技術(shù);2007年01期

4 張玉芳;;Ghrelin研究進展[J];醫(yī)學理論與實踐;2007年07期

5 郭曉莉;王平芳;;Ghrelin的最新進展[J];醫(yī)學綜述;2007年24期

6 李楊;李曉南;;Ghrelin在兒童生長發(fā)育及肥胖中的作用研究[J];醫(yī)學綜述;2008年05期

7 王楠;吳發(fā)興;李曉成;黃保續(xù);王洪斌;張燕霞;;Ghrelin的生物學功能及應用前景[J];中國動物檢疫;2008年07期

8 張捷;劉榮鳳;;Ghrelin的研究進展[J];實用醫(yī)學雜志;2009年10期

9 葛月輝;劉巖;;Ghrelin與透析患者的關(guān)系研究進展[J];醫(yī)學綜述;2011年11期

10 王麗曄;李峰;宋月晗;馬佳美;李思耐;關(guān)冰河;;Ghrelin發(fā)現(xiàn)和結(jié)構(gòu)的研究現(xiàn)狀[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2011年18期

相關(guān)會議論文 前10條

1 聶慶華;方梅霞;張細權(quán);;動物生長素(Ghrelin)基因的比較分析[A];第十次全國畜禽遺傳標記研討會論文集[C];2006年

2 陳黎龍;江青艷;張永亮;;Ghrelin與動物的采食調(diào)控[A];全國動物生理生化第十次學術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2008年

3 趙潔;張金山;李臻;張遠強;;Ghrelin在小鼠應激性胸腺萎縮中的表達及其意義[A];中國解剖學會第十一屆全國組織學與胚胎學青年學術(shù)研討會論文匯編[C];2009年

4 陳黎龍;江青艷;傅偉龍;;Ghrelin及其受體研究概況[A];動物生理生化學分會第八次學術(shù)會議暨全國反芻動物營養(yǎng)生理生化第三次學術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2004年

5 林浩然;;Ghrelin:結(jié)構(gòu)、分布和生理功能[A];第二屆中國動物學會比較內(nèi)分泌學分會和發(fā)育生物學分會聯(lián)合學術(shù)研討會論文集[C];2005年

6 火焱;楊銀鳳;王秀梅;;生長素-Ghrelin的研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖學及組織胚胎學分會第十四次學術(shù)研討會論文集[C];2006年

7 李樂;張佳林;李曉航;張城碩;程穎;趙寧;劉永鋒;;Ghrelin對地塞米松誘導胰島細胞凋亡保護作用的研究[A];2012中國器官移植大會論文匯編[C];2012年

8 李玉姝;金本巨哲;有安宏之;巖倉浩;中尾一和;赤水尚史;;甲狀腺激素對Ghrelin基因轉(zhuǎn)錄和分泌的影響[A];2008中國醫(yī)師協(xié)會內(nèi)分泌代謝科醫(yī)師分會年會論文匯編[C];2008年

9 胡翠竹;胡健;霍海洋;趙衛(wèi)華;;Ghrelin抑制尼古丁誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞趨化因子的表達[A];中華醫(yī)學會第11次心血管病學術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

10 蘇娟;雷治海;張文龍;武楓林;施玉萍;姚遠;楊桂紅;;Ghrelin對豬生殖調(diào)節(jié)的體外研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖學及組織胚胎學分會第十六次學術(shù)研討會論文集[C];2010年

相關(guān)重要報紙文章 前1條

1 崔翔宇;Ghrelin：其結(jié)構(gòu)及生理學的重要性 Discovery of Ghrelin：Its Structure and Physiological Significance[N];中國醫(yī)藥報;2006年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 葉博;短鏈脂肪酸促進人和小鼠gastroids中產(chǎn)ghrelin細胞分化和小鼠胃排空的生理機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2015年

2 周利;電針對Ghrelin介導的FD大鼠腦腸軸失衡調(diào)節(jié)作用的實驗研究[D];湖北中醫(yī)藥大學;2015年

3 吳志勤;1.Ghrelin對糖尿病心肌病大鼠心功能保護效應及機制研究 2.大黃素對糖尿病心肌病大鼠心功能保護效應及機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2015年

4 葉楠;Ghrelin通過MAPK通路誘導兔BMSCs增殖及成骨分化的機制研究[D];重慶醫(yī)科大學;2016年

5 萬晶晶;Ghrelin對巨噬細胞源性泡沫細胞形成的抑制作用及其機制研究[D];華中科技大學;2009年

6 王彥富;Ghrelin抗動脈粥樣硬化的基礎(chǔ)與臨床研究[D];華中科技大學;2009年

7 董靜;Ghrelin在糖尿病小鼠攝食調(diào)節(jié)與能量平衡中的作用[D];青島大學;2005年

8 許嶺翎;Ghrelin基因多態(tài)性與2型糖尿病及其危險因素的相關(guān)性研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2006年

9 杜改梅;斷奶仔豬胃腸道Ghrelin表達及其對胃功能的調(diào)節(jié)[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2006年

10 楊丹;Ghrelin對肺動脈內(nèi)皮細胞損傷的保護作用及其與內(nèi)皮舒縮分子關(guān)系的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 劉麗麗;原發(fā)性高血壓患者血清Ghrelin和Hcy水平的變化及其臨床意義[D];河北醫(yī)科大學;2015年

2 王箏;Ghrelin/Obestatin與妊娠期肥胖孕婦代謝紊亂相關(guān)性研究[D];華北理工大學;2015年

3 郝小可;Ghrelin對蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的保護作用研究[D];第二軍醫(yī)大學;2015年

4 陳瑩瑩;Ghrelin預處理對H9C2心肌細胞缺氧/復氧損傷的影響[D];安徽醫(yī)科大學;2015年

5 肖華貞;急性心力衰竭患者血漿Ghrelin水平的變化及其與住院死亡率的關(guān)系[D];福建醫(yī)科大學;2015年

6 白云;中等負荷有氧運動結(jié)合控食對肥胖大鼠腦腸肽Ghrelin的影響[D];山西大學;2014年

7 尹利莎;銀屑病患者脂肪因子Ghrelin和Leptin的表達[D];濱州醫(yī)學院;2014年

8 牛明璐;Ghrelin及其受體對小鼠情緒的調(diào)節(jié)作用及機制探討[D];青島大學;2015年

9 郭艷;不同日糧NDF/淀粉水平對新西蘭肉兔肝臟Leptin、Ghrelin、PCNA水平的影響[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2015年

10 黃雅懔;逍遙散對焦慮癥大鼠胃腸道Ghrelin和Obestatin含量表達的調(diào)節(jié)作用[D];北京中醫(yī)藥大學;2016年

，

本文編號：1578101