養(yǎng)血固腎湯對(duì)大鼠骨折愈合影響的實(shí)驗(yàn)觀察研究
本文關(guān)鍵詞: 養(yǎng)血固腎湯 骨折愈合 試驗(yàn)研究 鈣磷乘積 出處:《廣州中醫(yī)藥大學(xué)》2017年博士論文 論文類(lèi)型:學(xué)位論文
【摘要】:目的:骨折是臨床上常見(jiàn)的疾病之一,主要分為骨小梁中斷裂和骨皮質(zhì)斷裂,而當(dāng)中最棘手的問(wèn)題是骨折不愈合或延遲愈合。骨折的愈合過(guò)程是一個(gè)極其復(fù)雜的過(guò)程,當(dāng)中牽涉組織學(xué)、生物學(xué)、內(nèi)分泌學(xué)及生物力學(xué)等知識(shí)。影響骨折愈合的因素眾多,包括全身因素和局部因素、醫(yī)源性因素、骨生長(zhǎng)因子、微量元素、生物力學(xué)因素。對(duì)于如何促進(jìn)骨折的愈合過(guò)程、恢復(fù)骨的正常功能及結(jié)構(gòu)一直是醫(yī)學(xué)界研究的焦點(diǎn)及熱點(diǎn)。學(xué)者們經(jīng)過(guò)不同的研究及實(shí)驗(yàn)方法,從多角色去探討,才有現(xiàn)今對(duì)骨折愈合過(guò)程的認(rèn)識(shí),F(xiàn)行的治療骨折的方法很多,而且部份療效顯著,但亦有好多的不足,在這樣立足點(diǎn)上,祖國(guó)醫(yī)治骨折病癥的長(zhǎng)遠(yuǎn)經(jīng)驗(yàn)及技術(shù)累積可以好好發(fā)揮作用,因其有簡(jiǎn)單方便、安全有效、毒副作用低及成本低廉等優(yōu)點(diǎn),一直被醫(yī)生及患者認(rèn)可。本課題在祖國(guó)醫(yī)學(xué)理論指導(dǎo)下,展開(kāi)"養(yǎng)血固腎湯"對(duì)骨折愈合過(guò)程的促進(jìn)作用效果的研究,嘗試從多角度著手,透過(guò)不同層面的觀察,剖析養(yǎng)血固腎湯對(duì)骨折愈合的干涉作用及解釋當(dāng)中的機(jī)制;谖墨I(xiàn)記錄上,有關(guān)觀察"養(yǎng)血固腎湯"對(duì)骨折愈合過(guò)程的促進(jìn)作用效應(yīng)研究目前未見(jiàn)報(bào)導(dǎo)。本文起著先導(dǎo)的作用,于不同研究層面上,對(duì)"養(yǎng)血固腎湯"進(jìn)行觀察,從而提高對(duì)"養(yǎng)血固腎湯"于骨折愈合過(guò)程的理解,以利指導(dǎo)臨床工作,為推動(dòng)中醫(yī)藥的普及使用出一分綿力。研究方法:動(dòng)物模型準(zhǔn)備工作:80只SD雄性大鼠,開(kāi)始體重為168.5~237.2g,四肢無(wú)畸形,活動(dòng)自如,生命體征平穩(wěn),飲食正常,無(wú)傳染病,整個(gè)飼養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)過(guò)程在SPF級(jí)環(huán)境內(nèi)進(jìn)行。到體重合適時(shí)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始,于大鼠左脛骨中段行開(kāi)放性骨折模型造模,行克氏針骨髓腔逆行內(nèi)固定,縫合切口,不包扎。手術(shù)后挑選造模成功的72只大鼠,按體重隨機(jī)分為空白組、對(duì)照組及養(yǎng)血固腎湯劑組,每組24只?瞻捉M、對(duì)照組及養(yǎng)血固腎湯劑組分別給予純凈水、恒古骨傷愈合劑及養(yǎng)血固腎湯按體重灌胃給藥。第一部份生化指標(biāo)觀察:術(shù)后d7,d14,d24及d35各組按之前隨機(jī)編定的數(shù)字,各解剖6只動(dòng)物,采取血液樣本。用全自動(dòng)生化檢測(cè)儀器,檢查血鈣、血磷及ALP三項(xiàng)生化指標(biāo)。第二部份組織病理學(xué)觀察:于前述每段時(shí)間隨機(jī)解剖的6只動(dòng)物中,處死后取左下肢脛骨連股骨中下段的部分作成標(biāo)本,作組織病理學(xué)分析;根據(jù)組織病理學(xué)指導(dǎo)下,檢測(cè)組織標(biāo)本,用光學(xué)顯微鏡隨性取3個(gè)視野點(diǎn),觀察骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、成骨細(xì)胞指數(shù)及破骨細(xì)胞指數(shù)。第三部份微計(jì)算器斷層掃描技術(shù)(Micro-CT)觀察:于前述每段時(shí)間隨機(jī)解剖的6只動(dòng)物中,隨機(jī)取當(dāng)中3只動(dòng)物,取左下肢脛骨連股骨中下段的部分作成標(biāo)本,送往檢測(cè)中進(jìn)行Micro-Ct檢測(cè)。使用Micro-CT檢測(cè)骨折部位,選取感興建區(qū)(region of interest,ROD),利用軟件重塑圖像,透過(guò)分析圖像及系統(tǒng)檢測(cè),采集BMD,BV/TV,TV,Tb.Th,Tb.Sp,Tb.N及SMI等多項(xiàng)骨參數(shù)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:所有數(shù)據(jù)采用(x±s)表示,應(yīng)用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;計(jì)量資料數(shù)據(jù)方差齊,或數(shù)據(jù)經(jīng)轉(zhuǎn)換后方差齊,則采用單因素方差分析;若數(shù)據(jù)經(jīng)轉(zhuǎn)換后方差仍不齊,采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。成果:于生化指標(biāo)上,養(yǎng)血固腎湯劑組實(shí)驗(yàn)早期相比空白組及對(duì)照組明顯增加血磷值(P0.05),以及增加鈣磷乘積值(P0.01),促進(jìn)鈣鹽沉積,血鈣值伴隨減低(P0.05),從而令到血液中的鈣離子進(jìn)入基質(zhì),由于成骨細(xì)胞的作用,使鈣及磷積聚及結(jié)合,形成鈣鹽沉積,加速骨痂的建立及重塑,有利于骨折愈合的發(fā)展。而當(dāng)中血清的鈣離子濃度亦會(huì)相應(yīng)降低。于組織病理學(xué)上,d7,相比空白組,養(yǎng)血固腎湯劑組在骨痂出現(xiàn)的基礎(chǔ)上,更早出現(xiàn)軟骨痂及骨小梁的排列,個(gè)別動(dòng)物可見(jiàn)機(jī)化的血腫,骨痂內(nèi)可見(jiàn)大量軟骨細(xì)胞及稀疏的骨小梁。d14,相比空白組,養(yǎng)血固腎湯劑組動(dòng)物骨折處可見(jiàn)纖維性骨痂及大量軟骨、致密的骨小梁,于數(shù)量上比較多。d24,相比空白組,養(yǎng)血固腎湯劑組大部分動(dòng)物的骨小梁及骨痂轉(zhuǎn)變加快,表現(xiàn)為骨小梁明顯增粗,外骨痂開(kāi)始形成板狀骨,骨痂內(nèi)可見(jiàn)少量軟骨細(xì)胞,個(gè)別動(dòng)物骨髓腔再通幾方面。d35,空白組與養(yǎng)血固腎湯劑組部分動(dòng)物俱見(jiàn)外骨痂形成板狀骨,骨髓腔內(nèi)可見(jiàn)骨髓細(xì)胞,部分動(dòng)物骨痂內(nèi)可見(jiàn)少量軟骨細(xì)胞和增粗的骨小梁。反映養(yǎng)血固腎湯能促進(jìn)骨痂的產(chǎn)生時(shí)間,而且對(duì)骨痂其后的改變,如軟骨性骨痂及硬骨痂的產(chǎn)生時(shí)間都有促進(jìn)作用;于骨小梁結(jié)構(gòu)方面同樣有作用,表現(xiàn)為催使骨小梁的結(jié)構(gòu)提早出現(xiàn)及結(jié)構(gòu)稠密度增加兩方面,更能促進(jìn)骨折愈合。于Micro-CT采集的骨參數(shù)結(jié)果中,有關(guān)BMD,BV/TV,TV,Tb.Th,Tb.Sp,Tb.N及SMI各組間未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。d35,相比空白組,SMI數(shù)值明顯接近0,代表骨小梁多呈板狀骨,亦代表骨小梁的強(qiáng)度相比較高,對(duì)比Micro CT數(shù)據(jù)所整合的平面圖像,相比空白組,養(yǎng)血固腎湯能加促骨髓腔再通的時(shí)間,于骨小梁結(jié)構(gòu)方面同樣有作用,表現(xiàn)為催使骨小梁的結(jié)構(gòu)提早出現(xiàn)及結(jié)構(gòu)稠密度增加兩方面,更能促進(jìn)骨折愈合。結(jié)論:1.養(yǎng)血固腎湯能夠升高血磷,使鈣磷乘積高峰顯著升高,促進(jìn)鈣鹽沉積,提高骨折愈合中血清堿性磷酸酶的活性,增強(qiáng)體內(nèi)成骨細(xì)胞的活動(dòng),促進(jìn)骨折愈合。2.養(yǎng)血固腎湯能促進(jìn)骨痂的產(chǎn)生時(shí)間,而且對(duì)骨痂其后的改變,如軟骨性骨痂及硬骨痂的產(chǎn)生時(shí)間都有促進(jìn)作用;于骨小梁結(jié)構(gòu)方面同樣有作用,表現(xiàn)為催使骨小梁的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生及結(jié)構(gòu)稠密度增加兩方面,促進(jìn)骨折愈合。3.養(yǎng)血固腎湯于Micro-CT采集的骨參數(shù)及所整合的平面圖像中,反映能加促骨髓腔再通的時(shí)間,致密性骨小梁及骨性骨痂的出現(xiàn)提早。
[Abstract]:Objective : To study the effect of nourishing blood and kidney soup on fracture healing process . A total of 72 rats were randomly divided into blank group , control group and blood - nourishing solid - kidney decoction group . In comparison with the blank group , there was no statistical difference in bone callus formation and bone callus formation . Compared with blank group , nourishing blood and strengthening kidney soup can increase blood phosphorus , increase the activity of serum alkaline phosphatase in fracture healing and promote fracture healing .
【學(xué)位授予單位】:廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R285.5
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