本文關(guān)鍵詞： 胃癌 HOTAIR 組蛋白修飾 上皮間皮轉(zhuǎn)化 分子標(biāo)記物　出處：《天津醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：在中國(guó),癌癥的發(fā)生率和死亡率與日俱增,已經(jīng)成為了影響公共健康問題的首要疾病之一。其中胃癌的死亡率在我國(guó)相關(guān)癌癥死亡中排在第二位,并且,由于其較高的侵襲性和轉(zhuǎn)移能力,進(jìn)展期胃癌的治療目前尚不理想,臨床的傳統(tǒng)化療和放療方案對(duì)晚期胃癌也存在較大的局限性,療效與預(yù)后仍然不樂觀。因此,更早的診斷胃癌以及更有針對(duì)性的靶向治療,將成為目前研究胃癌的重點(diǎn)方向。第一部分,探索長(zhǎng)鏈非編碼RNA HOTAIR對(duì)胃癌發(fā)生發(fā)展的促進(jìn)作用。分別采用了體內(nèi)試驗(yàn)與體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)行研究。體外實(shí)驗(yàn)包括檢測(cè)癌癥細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn),遷移實(shí)驗(yàn),以及克隆增殖實(shí)驗(yàn),以上細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在胃癌細(xì)胞系中敲低HOTAIR會(huì)顯著的抑制了細(xì)胞的遷移能力,侵襲能力以及增殖能力,每種實(shí)驗(yàn)均分別在倆種胃癌細(xì)胞系中進(jìn)行了三次驗(yàn)證,充分驗(yàn)證了原癌基因HOTAIR具有促進(jìn)胃癌進(jìn)展的潛能。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,用穩(wěn)定表達(dá)干擾HOTAIR的胃癌細(xì)胞系MGC-803構(gòu)建裸鼠皮下模型,經(jīng)過檢測(cè)皮下腫瘤生長(zhǎng)的大小體積,裸鼠的體重變化,將Lenti-HOTAIR si組與對(duì)照組相比較,從而得出結(jié)論,HOTAIR明顯促進(jìn)胃癌的生長(zhǎng)。因此,通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,進(jìn)一步驗(yàn)證了原癌基因HOTAIR在胃癌發(fā)生發(fā)展中的重要地位,探索其在胃癌發(fā)生過程中的形成機(jī)制尤為重要。第二部分,通過探討HOTAIR對(duì)組蛋白甲基化及乙�；揎椀挠绊�,來闡明其促進(jìn)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的機(jī)制研究。首先在胃癌細(xì)胞系MGC-803和SGC-7901中檢測(cè)組蛋白H3K4以及H3K27甲基化,乙酰化表達(dá)水平。結(jié)果發(fā)現(xiàn),低表達(dá)HOTAIR處理后,H3K27me1,H3K27me2,H3K27me3,H3K4ac的表達(dá)水平均明顯降低,然而,H3K27ac,H3K4me1,H3K4me2,H3K4me3的表達(dá)水平均明顯升高。在上皮腫瘤肝癌細(xì)胞系BEL-7402以及膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U87中也得到了同樣的組蛋白修飾變化,證明了HOTAIR對(duì)組蛋白H3K4與H3K27修飾的影響具有普遍性。既往研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)HOTAIR具有促進(jìn)組蛋白甲基化修飾酶EZH2與其靶點(diǎn)H3K27me3相互作用的功能,因此,本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探索HOTAIR與組蛋白修飾H3K27me3及H3K27ac的具體機(jī)制。研究結(jié)果顯示,組蛋白甲基化酶EZH2直接與H3K27me3相互作用,而組蛋白乙酰化酶CBP催化H3K27ac。并且,HOTAIR具有結(jié)合PRC2復(fù)合物(EZH2,SUZ12,EED)的能力,并將復(fù)合物帶到組蛋白H3K27修飾位點(diǎn),從而達(dá)到EZH2促進(jìn)H3K27me3表達(dá)的目的,并與此同時(shí)可能通過復(fù)合物組成之一SUZ12抑制了CBP與H3K27ac的作用而造成了乙�；降慕档�。由此得出結(jié)論,HOTAIR通過對(duì)甲基化酶EZH2及乙酰化酶CBP的影響,導(dǎo)致了H3K27me3表達(dá)升高,H3K27ac表達(dá)降低,從而影響了下游相關(guān)基因的表達(dá)水平,進(jìn)而達(dá)到促進(jìn)胃癌發(fā)生發(fā)展的結(jié)局。第三部分,探索HOTAIR通過對(duì)組蛋白修飾的影響進(jìn)而促進(jìn)胃癌上皮間皮轉(zhuǎn)化(EMT)。基于第一部分的研究結(jié)果驗(yàn)證了HOTAIR對(duì)胃癌細(xì)胞的促癌作用,進(jìn)一步檢測(cè)HOTAIR對(duì)EMT相關(guān)因子的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,HOTAIR抑制上皮因子E-cadherin的表達(dá),同時(shí)促進(jìn)間皮因N-cadherin,Twist,Slug,Snail,β-catenin的表達(dá),達(dá)到促進(jìn)胃癌細(xì)胞EMT的過程。基于第二部分的研究結(jié)果表明HOTAIR升高H3K27me3表達(dá)水平,降低H3K27ac表達(dá)水平,通過Gene brownser數(shù)據(jù)分析得到在E-cadherin啟動(dòng)子區(qū)存在了H3K27me3和H3K27ac的表達(dá),提示HOTAIR通過對(duì)H3K27me3/ac的拮抗調(diào)控作用進(jìn)而影響了EMT相關(guān)因子E-cadherin的表達(dá)水平。因此,Ch IP實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,抑制HOTAIR的表達(dá)可以降低H3K27me3與E-cadherin的結(jié)合,升高H3K27ac與E-cadherin的結(jié)合,從而激活了E-cadherin的后續(xù)表達(dá)。說明HOTAIR可以通過對(duì)組蛋白修飾的影響調(diào)控EMT相關(guān)因子的轉(zhuǎn)錄水平,進(jìn)而促進(jìn)胃癌的發(fā)生發(fā)展。綜上所述,在本課題中首先通過體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了長(zhǎng)鏈非編碼RNA HOTAIR對(duì)胃癌細(xì)胞具有促進(jìn)增殖,遷移及侵襲的作用,是胃癌發(fā)生發(fā)展過程中的至關(guān)重要的一個(gè)原癌基因。隨后,進(jìn)一步探索了HOTAIR對(duì)組蛋白修飾的影響以及其對(duì)組蛋白H3K27me3及H3K27ac相關(guān)修飾酶的作用機(jī)制。最后,通過Ch IP實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)HOTAIR通過組蛋白H3K27me3及H3K27ac的拮抗調(diào)控機(jī)制,從而抑制了E-cadherin的表達(dá)水平,闡明了HOTAIR促進(jìn)胃癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)機(jī)制。本課題研究結(jié)果提示HOTAIR可作為胃癌診斷的一個(gè)指標(biāo),并與表觀遺傳治療相結(jié)合進(jìn)行靶向結(jié)合治療,為胃癌的早期診斷與有效治療提供新的思路。
[Abstract]:In vivo experiments , the effects of HOTAIR on the development of gastric cancer cells were studied . The results showed that HOTAIR could significantly inhibit the growth of gastric cancer . The effect of HOTAIR on the expression of H3K27me3 and E - cadherin in gastric cancer cells was investigated . The results showed that HOTAIR inhibited the expression of H3K27me3 and E - cadherin and increased the expression level of HH3K27me3 and E - cadherin .

【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R735.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 向仲素;乙型肝炎表面抗原與胃癌患者肝轉(zhuǎn)移關(guān)系的初步探討[J];中國(guó)血液流變學(xué)雜志;2002年04期

2 王建國(guó),陳學(xué)英;胃癌肝轉(zhuǎn)移的綜合治療[J];中國(guó)鄉(xiāng)村醫(yī)藥;2004年08期

3 董虹亮;劉蓉;;進(jìn)展期胃癌肝轉(zhuǎn)移72例診治[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2007年14期

4 吳鐵成;邵永孚;;胃癌肝轉(zhuǎn)移的外科預(yù)防及治療[J];中華普外科手術(shù)學(xué)雜志(電子版);2008年01期

5 陳明祥;李揚(yáng);呂俊明;張信強(qiáng);陳加順;;胃癌肝轉(zhuǎn)移患者治療過程中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子水平的變化[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年11期

6 陳峻青;胃癌肝轉(zhuǎn)移的治療原則[J];中國(guó)實(shí)用外科雜志;1995年05期

7 王沛，周而復(fù);第12講胃癌[J];中國(guó)農(nóng)村醫(yī)學(xué);1995年04期

8 楊君，，郭衛(wèi)東，葛箭;未能手術(shù)切除的進(jìn)展期胃癌196例臨床分析[J];寧夏醫(yī)學(xué)雜志;1996年01期

9 王海寧;丁永斌;夏建國(guó);張苗;劉德林;單留群;吳昌德;;胃癌伴肝轉(zhuǎn)移臨床病理特征分析[J];江蘇醫(yī)藥;2014年14期

10 胡建昆,陳志新,陳佳平,彭德恕,于永揚(yáng),陳詠梅;胃癌肝轉(zhuǎn)移八例的外科治療[J];中華普通外科雜志;2000年09期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 黃品同;李艷萍;薛念余;李世巖;趙雅萍;鄭志強(qiáng);張超;郭心璋;;超聲雙重造影對(duì)進(jìn)展期胃癌肝轉(zhuǎn)移的評(píng)價(jià)[A];第二屆長(zhǎng)三角超聲醫(yī)學(xué)論壇暨2009年浙江省超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

2 薛念余;黃品同;李世巖;黃福光;鄭志強(qiáng);王宗敏;;胃癌組織超聲造影定量分析在胃癌肝轉(zhuǎn)移的價(jià)值[A];第二屆長(zhǎng)三角超聲醫(yī)學(xué)論壇暨2009年浙江省超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

3 薛念余;黃品同;李世巖;趙雅萍;黃福光;鄭志強(qiáng);王宗敏;;超聲雙重造影在胃癌肝轉(zhuǎn)移中的價(jià)值[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

4 孫元水;許曉東;胡俊峰;徐繼;邵欽樹;葉再元;;胃癌肝轉(zhuǎn)移的肝切除術(shù)[A];2009年浙江省外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

5 ;胃癌[A];第三屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2004年

6 鄒壽椿;;胃癌肝轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)、診斷和治療[A];胃癌診治進(jìn)展學(xué)習(xí)班專題講義[C];2006年

7 徐惠綿;;進(jìn)展期胃癌轉(zhuǎn)移規(guī)律及亞臨床轉(zhuǎn)移診治的系列研究[A];第四屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議教育集[C];2006年

8 薛文成;馮凱;孟冬婭;鄭燕華;張建中;康輝;辛彥;;胃癌相關(guān)血清標(biāo)志分子的篩選與初步應(yīng)用[A];第四屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

9 劉偉中;;復(fù)發(fā)性胃癌術(shù)前評(píng)估與再次手術(shù)策略(附48例報(bào)道)[A];江西省第二屆胃腸外科學(xué)術(shù)會(huì)議暨江西省第十二次中西醫(yī)結(jié)合普通外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

10 蘇炳光;蔣鳳蓮;蔡茂德;吳祥誠;鐘良清;;40例異時(shí)性胃癌肝轉(zhuǎn)移的臨床分析[A];第四屆中國(guó)腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前3條

1 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 易善永;胃癌有哪些表現(xiàn)？[N];健康時(shí)報(bào);2006年

2 北京軍區(qū)總醫(yī)院主任醫(yī)師 張禹;胃癌術(shù)后常做的檢查[N];家庭醫(yī)生報(bào);2005年

3 記者 馬曉芳;揭秘華為架構(gòu)變動(dòng)：與EMT并行 董事會(huì)走向臺(tái)前[N];第一財(cái)經(jīng)日?qǐng)?bào);2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 宋s

本文編號(hào)：1472810