本文關(guān)鍵詞： 青光眼 視神經(jīng)保護(hù) 通竅明目4號(hào) MMP-9 AQP4　出處：《黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:研究臨床經(jīng)驗(yàn)方通竅明目4號(hào)對高眼壓模型大鼠視網(wǎng)膜中基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)及水通道蛋白4(AQP4)表達(dá)的影響,以探討中藥方劑對視神經(jīng)保護(hù)的分子學(xué)作用機(jī)制。方法:選擇8-12周齡、體重200±12.09g、雌雄各半SD大鼠323只,采用前房注射復(fù)方卡波姆方法建立大鼠慢性高眼壓模型。造模成功后按體重隨機(jī)分為空白組和實(shí)驗(yàn)組,空白組為17只大鼠,實(shí)驗(yàn)組又分為三組,分別為實(shí)驗(yàn)高眼壓1周組(實(shí)高1組)、高眼壓2周組(實(shí)高2組)、高眼壓3周組(實(shí)高3組),每組大鼠102只。每一實(shí)驗(yàn)組再分6組,分別為通竅明目4號(hào)低劑量組、中劑量組、高劑量組,對照組(VitB1、VitB12灌胃)、模型1組、模型2組(生理鹽水灌胃),每組大鼠17只。模型1組給藥前處死并取材,其余持續(xù)給藥兩周后處死并取材。采用免疫組化法及Western blot法觀察AQP4和MMP-9的表達(dá)。結(jié)果:1、免疫組化及免疫印跡檢查下對MMP-9表達(dá)的提示:三組高眼壓組各組內(nèi)比較均提示正常狀態(tài)下,MMP-9呈現(xiàn)低表達(dá)狀態(tài),當(dāng)受到高眼壓的影響后,MMP-9表達(dá)上調(diào),維持一段時(shí)間后,又逐漸下降。其中3周高眼壓組組間比較不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明高眼壓三周后MMP-9的表達(dá)已經(jīng)明顯減少�？v向組間比較可知,MMP-9在正常視網(wǎng)膜為低表達(dá)狀態(tài),在出現(xiàn)眼壓升高的情況下,各高眼壓組MMP-9表達(dá)發(fā)生上調(diào),第1周末達(dá)到高峰,以后逐漸減少,高表達(dá)持續(xù)較長時(shí)間,直至第4周時(shí)才恢復(fù)正常水平。通竅明目4號(hào)治療后對MMP-9表達(dá)的提示:組內(nèi)比較顯示1周高眼壓組中各治療組均可使MMP-9下降的趨勢減慢,且這種作用高劑量組優(yōu)于中低劑量組和對照組,中低劑量組和對照組未達(dá)到治療效果。2周高眼壓組中高中劑量組和對照組MMP-9的表達(dá)均高于模型2組,且高中劑量組MMP-9的表達(dá)顯著上調(diào),高于模型1組和低劑量組。3周高眼壓組高劑量組治療后可使MMP-9的表達(dá)上調(diào),其他各治療組上調(diào)的作用不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義�？v向組間比較顯示,各治療組均可使MMP-9表達(dá)上調(diào),其中高劑量組作用最強(qiáng)。2、免疫組化及免疫印跡檢查下對AQP4表達(dá)的提示:三組高眼壓組各組內(nèi)比較均顯示AQP4在空白組呈低表達(dá),受到高眼壓影響后,AQP4的表達(dá)上調(diào)即模型1組,但隨著高眼壓持續(xù)時(shí)間的延長,AQP4的表達(dá)又呈現(xiàn)下降趨勢即模型2組;縱向組間比較可知,AQP4在正常情況為低表達(dá)狀態(tài),在出現(xiàn)眼壓升高的情況下,AQP4表達(dá)發(fā)生上調(diào),第1周末的時(shí)候達(dá)到高峰,以后逐漸減少,高表達(dá)持續(xù)較長時(shí)間,直至第4周時(shí)才恢復(fù)正常水平。通竅明目4號(hào)治療后對AQP4表達(dá)的提示:三組高眼壓組各組內(nèi)比較均顯示,各治療組與模型2組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,未起到治療作用。其中高眼壓2組中通竅明目4號(hào)高低劑量組和對照組使AQP4的表達(dá)發(fā)生了上調(diào)。高眼壓3周中通竅明目4號(hào)低劑量組和對照組使AQP4的表達(dá)又發(fā)生了上調(diào)�？v向組間比較顯示各藥物治療組未能抑制AQP4的表達(dá)。其中2周高眼壓組中通竅明目4號(hào)高低劑量組和對照組使AQP4的表達(dá)上調(diào)較1、3周高眼壓組為最高。結(jié)論:通竅明目4號(hào)可以促進(jìn)MMP-9表達(dá)上調(diào),減輕高眼壓造成的視網(wǎng)膜病理改變,糾正可逆的變性細(xì)胞,減輕高眼壓狀態(tài)下的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(RGCs)凋亡,促進(jìn)神經(jīng)的再生,發(fā)揮視神經(jīng)保護(hù)作用。機(jī)制可能與破壞MMP-9的天然抑制劑,改變基因轉(zhuǎn)錄率,激活MMP-9酶原的活性有關(guān)。通竅明目4號(hào)對AQP4未起到抑制作用。
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本文編號(hào)：1462790