本文關(guān)鍵詞：Ad-HGF促進(jìn)老年大鼠心梗后c-kit陽性心臟干細(xì)胞的增殖與分化及機(jī)制研究　出處：《南京醫(yī)科大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：背景缺血性心臟病因其嚴(yán)重的致死率與極差的預(yù)后引起了極大的重視。在我國,缺血性心臟病死亡率呈明顯上升趨勢,平均為62.5/100,000人,是45歲以上男性和65歲以上女性的主要死亡原因。據(jù)統(tǒng)計(jì),2015年我國65歲及以上人口為14434萬人,近十年65歲及以上人口逐年增加,人口老齡化的高峰即將到來。這將導(dǎo)致老年群體中缺血性心臟病尤其是心肌梗死的發(fā)病人數(shù)進(jìn)一步增加。傳統(tǒng)治療方法包括藥物治療、血管介入成形術(shù)和外科冠脈旁路移植術(shù),這些方法雖然提高了心肌梗死的生存率和生活質(zhì)量,但對(duì)壞死心肌作用有限,尤其對(duì)彌漫性冠狀動(dòng)脈病變難以奏效,心肌梗死已成為心力衰竭的首要原因。因此,探索老年人心梗后心肌再生修復(fù)的策略尤為重要。C-kit陽性心臟干細(xì)胞(C-kit+CSCs)的發(fā)現(xiàn)為我們修復(fù)損傷的心臟提供了治療方向。C-kit陽性心臟干細(xì)胞具有高度自我更新能力,能夠特異性分化為心臟結(jié)構(gòu)細(xì)胞(心肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞)。然而,在老年心肌梗死的心臟中c-kit+CSCs的增殖和分化的調(diào)控機(jī)制仍不清楚。我們前期研究發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞生長因子(HGF)對(duì)心梗后心臟具有保護(hù)作用,然而HGF對(duì)于老年心梗后c-kit+ CSCs的增殖與分化的影響尚不清楚。目的本研究旨在探討HGF對(duì)于老年大鼠心梗后心臟c-kit+ CSCs的增殖和分化的影響及潛在的分子機(jī)制。方法1.應(yīng)用免疫熒光與Western blot技術(shù)分別檢測幼年(2-3天)、中年(6-10月齡)和老年(18-22月齡)大鼠心臟中c-kit+ CSCs的表達(dá)情況與心肌組織中HGF及其磷酸化受體p-Met的表達(dá)水平,進(jìn)而評(píng)價(jià)c-kit+CSCs與HGF在不同年齡大鼠心臟中的表達(dá)水平是否具有相關(guān)性;2.采用冠狀動(dòng)脈左前降支(LAD)結(jié)扎法構(gòu)建老年大鼠的心肌梗死模型,并將腺病毒攜帶的肝細(xì)胞生長因子(Ad-HGF)注射到大鼠心肌梗死的周邊區(qū),研究Ad-HGF對(duì)于c-kit+ CSCs增殖和分化的影響;3.采用Western blot與免疫熒光技術(shù)檢測Ad-HGF對(duì)老年大鼠心梗后心肌細(xì)胞壞死性凋亡的影響并進(jìn)一步應(yīng)用壞死性凋亡抑制劑Necrostatin-1(Nec-1)抑制壞死性凋亡,探討其對(duì)c-kit+ CSCs增殖與分化的影響;4.采用Western blot、免疫熒光與ELISA技術(shù)研究Ad-HGF對(duì)心肌組織及外周血清中高遷移率族蛋白B1(HMGB1)的水平與骨髓中c-kit+干細(xì)胞表達(dá)情況的影響;5.采用免疫熒光、Western blot、心臟超聲與馬松染色技術(shù)評(píng)價(jià)Ad-HGF對(duì)老年大鼠心梗后心肌重塑及心臟功能的影響。結(jié)果1.隨著大鼠年齡的增長,其心臟中c-kit+ CSCs與HGF蛋白的表達(dá)水平逐漸降低,并且二者之間呈現(xiàn)出顯著正相關(guān);2.Ad-HGF促進(jìn)了老年大鼠心肌梗死后心臟中c-kit+CSCs的增殖與分化,并進(jìn)一步促進(jìn)了梗死周邊區(qū)域心肌細(xì)胞的增殖與血管的再生;3.Ad-HGF誘導(dǎo)了老年大鼠心梗后心肌細(xì)胞壞死性凋亡的發(fā)生,提高了心肌組織與外周血中HMGB1蛋白的表達(dá)水平,并增加了骨髓中c-kit+干細(xì)胞的數(shù)量;4.抑制壞死性凋亡減弱了 Ad-HGF誘導(dǎo)的老年大鼠心梗后c-kit陽性心臟干細(xì)胞的增殖與分化,減少了梗死周邊區(qū)心肌和血管的再生,同時(shí)降低了心肌組織與外周血中HMGB1蛋白表達(dá)水平及梗死后大鼠骨髓中c-kit陽性干細(xì)胞的數(shù)量;5.Ad-HGF抑制了老年大鼠心梗后心肌細(xì)胞的凋亡,減輕了梗死區(qū)域心肌纖維化的水平,并改善了心梗后的心臟功能。結(jié)論Ad-HGF促進(jìn)了老年大鼠心梗后心臟中c-kit+ CSCs的增殖與分化并進(jìn)一步促進(jìn)了心肌和血管的再生,改善了心梗后的心肌重塑與心臟功能。這可能與Ad-HGF誘導(dǎo)了梗死區(qū)域心肌壞死性凋亡的發(fā)生,進(jìn)而增加了心肌組織與外周血中HMGB1的表達(dá)水平,并促進(jìn)骨髓中c-kit+干細(xì)胞的增殖有關(guān)。
[Abstract]:Objective To investigate the effects of HGF on the proliferation and differentiation of c - kit + CSCs in aged rats .

【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R542.22

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 ;HGF percutaneous endocardial injection induces cardiomyocyte proliferation and rescues cardiac function in pigs[J];Journal of Biomedical Research;2010年03期

2 張金生;王階;;三七總皂苷動(dòng)員心肌梗死大鼠骨髓干細(xì)胞出髓效率的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國中藥雜志;2009年07期

3 ;Treatment of chronical myocardial ischemia by adenovirus-mediated hepatocyte growth factor gene transfer in minipigs[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2008年06期

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本文編號(hào)：1430842