MicroRNA-20b通過(guò)NFAT信號(hào)通路對(duì)胸腺瘤伴重癥肌無(wú)力T細(xì)胞的影響
本文關(guān)鍵詞:MicroRNA-20b通過(guò)NFAT信號(hào)通路對(duì)胸腺瘤伴重癥肌無(wú)力T細(xì)胞的影響 出處:《吉林大學(xué)》2017年博士論文 論文類型:學(xué)位論文
更多相關(guān)文章: microRNA-20b NFAT5 CAMTA1 胸腺瘤 重癥肌無(wú)力
【摘要】:目的:研究microRNA-20b對(duì)胸腺瘤伴重癥肌無(wú)力T細(xì)胞的影響。方法:1.運(yùn)用RT-PCR方法,比較miR-20b在胸腺瘤及正常胸腺組織中的表達(dá)。2.通過(guò)MTT等方法研究miR-20b對(duì)T細(xì)胞增殖及活化功能的影響。3.應(yīng)用miRanda及TargetScan軟件預(yù)測(cè)miR-20b的靶基因,利用RT-PCR及western blot方法驗(yàn)證靶向關(guān)系。4.應(yīng)用MTT法檢測(cè)靶基因?qū)urkat細(xì)胞增殖和活化的影響。5.選用RT-PCR法及Western blot等方法分析miR-20b與NFAT5及CAMTA1在胸腺瘤中的關(guān)系。6.利用MTT及Western blot等方法通過(guò)沉默靶基因驗(yàn)證miR-20b對(duì)靶基因的調(diào)控作用及分析調(diào)控作用的機(jī)制。結(jié)果:1.相對(duì)于無(wú)重癥肌無(wú)力患者和單純有重癥肌無(wú)力但不伴胸腺瘤的患者,胸腺瘤伴重癥肌無(wú)力患者血清中miR-20b的表達(dá)水平明顯下降。2.活化的Jurkat細(xì)胞及CD4+T細(xì)胞中miR-20b的表達(dá)水平下降,miR-20b轉(zhuǎn)染組G0/G1期細(xì)胞比例明顯升高、S期細(xì)胞比例有所降低、G2/M期細(xì)胞比例亦有所降低,而Anti-miR-20b轉(zhuǎn)染組則完全相反,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.細(xì)胞內(nèi)靶基因的表達(dá)在轉(zhuǎn)染miR-20b mimics后明顯下降,而轉(zhuǎn)染anti-miR-20b后明顯升高。4.Jurkat細(xì)胞系轉(zhuǎn)染miR-20b mimics后,IL2、IL10、CD25及CD69的表達(dá)明顯下降,細(xì)胞增殖活性明顯受到抑制,而轉(zhuǎn)染anti-miR-20b后則均升高。5.miR-20b與靶基因在胸腺瘤中呈明顯的負(fù)相關(guān)。6.Jurkat細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-20b mimics后能產(chǎn)生明顯的抑制細(xì)胞增殖和活化的作用,而且沉默靶基因引起的抑制作用可以被低表達(dá)的miR-20b部分消除。這些都有利的證明了NFAT5及CAMTA1是miR-20b在胸腺瘤伴重癥肌無(wú)力中調(diào)控的靶基因。結(jié)論:因其對(duì)T細(xì)胞增殖以及活化的抑制作用,miR-20b在胸腺瘤伴重癥肌無(wú)力患者細(xì)胞免疫中發(fā)揮著負(fù)調(diào)控作用。其免疫調(diào)節(jié)作用是通過(guò)對(duì)NFAT5及CAMTA1基因的調(diào)控而完成的。由于明顯的低表達(dá)特性,使得miR-20b可以作為診斷胸腺瘤的腫瘤標(biāo)志物。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R736.3;R746.1
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,本文編號(hào):1351001
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