發(fā)布時間：2017-12-29 16:34

  本文關鍵詞：MicroRNA-20b通過NFAT信號通路對胸腺瘤伴重癥肌無力T細胞的影響　出處：《吉林大學》2017年博士論文　論文類型：學位論文

  更多相關文章： microRNA-20b NFAT5 CAMTA1 胸腺瘤 重癥肌無力

【摘要】：目的:研究microRNA-20b對胸腺瘤伴重癥肌無力T細胞的影響。方法:1.運用RT-PCR方法,比較miR-20b在胸腺瘤及正常胸腺組織中的表達。2.通過MTT等方法研究miR-20b對T細胞增殖及活化功能的影響。3.應用miRanda及TargetScan軟件預測miR-20b的靶基因,利用RT-PCR及western blot方法驗證靶向關系。4.應用MTT法檢測靶基因?qū)urkat細胞增殖和活化的影響。5.選用RT-PCR法及Western blot等方法分析miR-20b與NFAT5及CAMTA1在胸腺瘤中的關系。6.利用MTT及Western blot等方法通過沉默靶基因驗證miR-20b對靶基因的調(diào)控作用及分析調(diào)控作用的機制。結果:1.相對于無重癥肌無力患者和單純有重癥肌無力但不伴胸腺瘤的患者,胸腺瘤伴重癥肌無力患者血清中miR-20b的表達水平明顯下降。2.活化的Jurkat細胞及CD4+T細胞中miR-20b的表達水平下降,miR-20b轉(zhuǎn)染組G0/G1期細胞比例明顯升高、S期細胞比例有所降低、G2/M期細胞比例亦有所降低,而Anti-miR-20b轉(zhuǎn)染組則完全相反,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3.細胞內(nèi)靶基因的表達在轉(zhuǎn)染miR-20b mimics后明顯下降,而轉(zhuǎn)染anti-miR-20b后明顯升高。4.Jurkat細胞系轉(zhuǎn)染miR-20b mimics后,IL2、IL10、CD25及CD69的表達明顯下降,細胞增殖活性明顯受到抑制,而轉(zhuǎn)染anti-miR-20b后則均升高。5.miR-20b與靶基因在胸腺瘤中呈明顯的負相關。6.Jurkat細胞轉(zhuǎn)染miR-20b mimics后能產(chǎn)生明顯的抑制細胞增殖和活化的作用,而且沉默靶基因引起的抑制作用可以被低表達的miR-20b部分消除。這些都有利的證明了NFAT5及CAMTA1是miR-20b在胸腺瘤伴重癥肌無力中調(diào)控的靶基因。結論:因其對T細胞增殖以及活化的抑制作用,miR-20b在胸腺瘤伴重癥肌無力患者細胞免疫中發(fā)揮著負調(diào)控作用。其免疫調(diào)節(jié)作用是通過對NFAT5及CAMTA1基因的調(diào)控而完成的。由于明顯的低表達特性,使得miR-20b可以作為診斷胸腺瘤的腫瘤標志物。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R736.3;R746.1

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本文編號：1351001