本文關(guān)鍵詞：usp9x基因在三陰性乳腺癌化療耐藥中的作用及其機(jī)制研究

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【摘要】：實驗?zāi)康娜橄侔?BreastCancer)是現(xiàn)今女性最常見的惡性腫瘤之一,作為一個特殊的乳腺癌亞型,三陰性乳腺癌(TNBC)侵襲力強(qiáng)、易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。尋找合適靶點(diǎn)提高TNBC的化療敏感性是其研究的關(guān)鍵。X染色體連鎖的泛素特異性蛋白酶9(usp9x)是一種編碼泛素特異性蛋白酶的基因,在包括TNBC在內(nèi)的多種腫瘤內(nèi)高表達(dá),其編碼的去泛素化酶usp9x作為一種對蛋白泛素化起到逆向調(diào)節(jié)作用的重要調(diào)節(jié)因子在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起了關(guān)鍵作用,能調(diào)節(jié)靶基因的轉(zhuǎn)錄,控制腫瘤細(xì)胞生長、分化及凋亡。隨著對泛素化酶usp9x研究的深入,其在腫瘤耐藥中的作用被逐漸提出。本研究的目的就是觀察usp9x在三陰性乳腺癌對順鉑耐藥性中的作用及其可能機(jī)制。材料與方法本研究用順鉑處理MDA-MB-231、MDA-MB-468和Bcap-37三種乳腺癌細(xì)胞株,利用細(xì)胞活力檢測試劑盒(CCK-8)檢測乳腺癌癌細(xì)胞系的細(xì)胞活力,細(xì)胞增殖檢測試劑盒(EdU試驗)檢測乳腺癌細(xì)胞系的增殖情況,蛋白免疫印跡技術(shù)(Western-blot)內(nèi)usp9x蛋白的表達(dá)情況。用usp9x抑制劑WP1130抑制乳腺癌細(xì)胞株內(nèi)usp9x的活性,研究單純順鉑處理和進(jìn)行順鉑和usp9x抑制劑WP1130聯(lián)合處理后,MDA-MB-231、MDA-MB-468和Bcap-37三種細(xì)胞株細(xì)胞活力、增殖情況以及細(xì)胞內(nèi)usp9x蛋白的表達(dá)情況的變化。用usp9x siRNA干擾乳腺癌細(xì)胞系內(nèi)usp9x的表達(dá),研究單純順鉑處理和進(jìn)行順鉑和usp9xsiRNA聯(lián)合處理后,MDA-MB-231、MDA-MB-468和Bcap-37三種細(xì)胞株細(xì)胞活力的變化,以及usp9x siRNA干擾乳腺癌細(xì)胞系內(nèi)usp9x的表達(dá)再聯(lián)合usp9x抑制劑WP1130處理后MDA-MB-231、MDA-MB-468和Bcap-37三種細(xì)胞株細(xì)胞活力的變化。為探討usp9x影響乳腺癌耐藥的機(jī)制,我們在檢測各種處理下MDA-MB-231、MDA-MB-468和Bcap-37三種細(xì)胞株中內(nèi)usp9x的表達(dá)情況的同時也檢測了三種細(xì)胞株中抗凋亡蛋白Mcl-1的表達(dá)情況,并分析了 Mcl-1變化與usp9x表達(dá)的關(guān)系。結(jié)果實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)順鉑處理后,三種乳腺癌細(xì)胞株的細(xì)胞活力及增殖情況均下降,乳腺癌細(xì)胞系對順鉑的敏感性與usp9x的表達(dá)高低負(fù)相關(guān);(2)聯(lián)合應(yīng)用usp9x活性抑制后,ER陰性的乳腺癌細(xì)胞株的細(xì)胞活力、增殖情況以及usp9x的表達(dá)均下降,即乳腺癌細(xì)胞系對順鉑的敏感性增加,而ER陽性的細(xì)胞株不受影響;(3)siRNA敲除usp9x后,usp9x的表達(dá)均下降,ER陰性的乳腺癌細(xì)胞株對順鉑的敏感性增加,而ER陽性的細(xì)胞株不受影響;(4)siRNA敲除usp9x后再行usp9x活性抑制處理,則不能增加三種乳腺癌細(xì)胞系對順鉑的敏感性(5)usp9x活性抑制處理和siRNA敲除usp9x處理后三種細(xì)胞株內(nèi)usp9x的表達(dá)變化與抗凋亡蛋白Mcl-1蛋白的表達(dá)變化正相關(guān)。結(jié)論:uSp9x的高表達(dá)會明顯降低乳腺癌細(xì)胞對順鉑的敏感性。通過降低乳腺癌細(xì)胞系內(nèi)usp9x的活性或抑制乳腺癌細(xì)胞系內(nèi)usp9x的表達(dá),均可以顯著增加ER陰性的乳腺癌細(xì)胞對順鉑的敏感性,但不能影響ER陽性的乳腺癌細(xì)胞對順鉑的反應(yīng)。uSp9x可能通過影響抗凋亡蛋白Mcl-1途徑影響ER陰性的乳腺癌細(xì)胞系對順鉑的敏感性。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R737.9

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃嘯原;用“印度閱兵”形容乳腺癌合適嗎?[J];診斷病理學(xué)雜志;2001年02期

2 張嘉慶,王殊,喬新民;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠(yuǎn)景[J];中華外科雜志;2002年03期

3 張維彬,汪波,石靈春;中醫(yī)藥在現(xiàn)代乳腺癌治療中的運(yùn)用[J];中國中西醫(yī)結(jié)合急救雜志;2002年01期

4 薛志勇;食物與乳腺癌[J];山東食品科技;2002年04期

5 王旬果,王建軍,鄭國華;乳腺癌相關(guān)標(biāo)志物的研究進(jìn)展[J];山東醫(yī)藥;2002年33期

6 陸尚聞;;男人也患乳腺癌[J];環(huán)境;2003年12期

7 ;新技術(shù)清晰拍攝早期乳腺癌細(xì)胞[J];上海生物醫(yī)學(xué)工程;2005年04期

8 田富國;郭向陽;張華一;;乳腺癌診治研究新進(jìn)展[J];腫瘤研究與臨床;2005年S1期

9 馬濤,谷俊朝;血管內(nèi)皮生長因子與乳腺癌的臨床研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(外科學(xué)分冊);2005年01期

10 郭慶良,谷俊朝;乳腺癌和瘦素相關(guān)性研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;2005年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于永利;;抗乳腺癌免疫治療融合蛋白[A];中國免疫學(xué)會第四屆學(xué)術(shù)大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

2 郭紅飛;;中醫(yī)治療乳腺癌的策略[A];江西省中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2012年

3 龐朋沙;伍會健;;乳腺癌治療靶標(biāo)的研究進(jìn)展[A];北方遺傳資源的保護(hù)與利用研討會論文匯編[C];2010年

4 陸勁松;邵志敏;吳炅;韓企夏;沈鎮(zhèn)宙;;新型維甲酸抑制乳腺癌細(xì)胞的生長及誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制研究[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會論文集[C];2000年

5 劉愛國;胡冰;;乳腺癌臨床治療進(jìn)展[A];安徽省抗癌協(xié)會第四次代表大會暨乳腺癌、肺癌專業(yè)委員會成立會議、安徽省腫瘤防治進(jìn)展學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2001年

6 張嘉慶;王殊;喬新民;;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠(yuǎn)景[A];第一屆全國中西醫(yī)結(jié)合乳腺疾病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2002年

7 劉清俊;;乳腺癌綜合治療的新進(jìn)展[A];山西省抗癌協(xié)會第六屆腫瘤學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2003年

8 邵志敏;;21世紀(jì)乳腺癌治療的展望[A];第三屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會教育論文集[C];2004年

9 陳松旺;張明;;乳腺癌治療的回顧與展望[A];西部地區(qū)腫瘤學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

10 白霞;傅建新;丁凱陽;王兆鉞;阮長耿;;組織因子途徑抑制物-2在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)研究[A];第10屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要匯編[C];2005年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;血檢有望揭示乳腺癌治療效果[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2004年

2 記者 鄭曉春;乳腺癌細(xì)胞擴(kuò)散基因被找到[N];科技日報;2007年

3 中國軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤中心主任 宋三泰;乳腺癌有了新療法[N];中國婦女報;2002年

4 王艷紅;抑制ＤＮＡ修補(bǔ)可消滅乳腺癌細(xì)胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2005年

5 詹建;乳腺癌飲食 兩個時期不一樣[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

6 辛君;乳腺癌擴(kuò)散基因“浮出水面”[N];大眾衛(wèi)生報;2009年

7 記者 毛黎;美發(fā)現(xiàn)有效抑制乳腺癌細(xì)胞生長的分子[N];科技日報;2010年

8 記者 吳春燕　通訊員 王麗霞;乳腺癌治療將有新途徑[N];光明日報;2011年

9 王樂　沈基飛;我科學(xué)家發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致乳腺癌耐藥的新標(biāo)志物[N];科技日報;2011年

10 劉霞;一種天然分子能阻止乳腺癌惡化[N];科技日報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 柴紅燕;疾病狀態(tài)下CYP4Z1和4A的生物學(xué)行為及其藥物干預(yù)研究[D];武漢大學(xué);2012年

2 李凱;ID(inhibitor of DNA binding)家族蛋白調(diào)控乳腺細(xì)胞的分化并影響乳腺癌的預(yù)后[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 江一舟;乳腺癌新輔助化療前后基因變異檢測及其功能論證[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 馬邵;酪氨酸去磷酸化增強(qiáng)表皮生長因子受體在乳腺癌治療中靶向性的研究[D];山東大學(xué);2015年

5 姚若斯;精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶PRMT7誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞發(fā)生表皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)換及轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制研究[D];東北師范大學(xué);2015年

6 侯培鋒;α-酮戊二酸二甲酯(DM-2KG)上調(diào)缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)誘發(fā)高致瘤性干細(xì)胞樣乳腺癌細(xì)胞機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

7 李麗麗;分泌蛋白SHON調(diào)控乳腺癌細(xì)胞EMT的分子機(jī)制研究[D];東北師范大學(xué);2015年

8 陳麗艷;PI3K抑制劑聯(lián)合組蛋白去乙�；敢种苿⿲θ橄侔﹨f(xié)同殺傷作用的分子機(jī)制研究[D];延邊大學(xué);2015年

9 樸俊杰;乳腺癌差異基因篩選及PAIP1對其生物學(xué)行為的影響[D];延邊大學(xué);2015年

10 汪[?如;染色體6q25.1區(qū)域基因多態(tài)性與乳腺癌遺傳易感性的關(guān)聯(lián)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 杜文英;乳腺癌分子亞型的臨床與病理特點(diǎn)[D];鄭州大學(xué);2011年

2 賈曉菲;彩色多普勒超聲與乳腺癌病理及免疫組化指標(biāo)的相關(guān)性研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

3 靳文;乳腺癌全基因組DNA甲基化修飾的研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

4 吳坤琳;TLR4/MyD88信號通路對乳腺癌侵襲性影響的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

5 葛廣哲;樹，

本文編號：1292387