RNA沉默是植物自身免受病毒侵染的一種有效和通用的機(jī)制,而植物病毒為逃避該機(jī)制進(jìn)化出了不同的反防御策略,其中最為有效的是編碼RNA沉默抑制子(Viral suppressor of RNA silencing,VSR)。馬鈴薯卷葉病毒屬病毒(poleroviruses)在世界范圍內(nèi)發(fā)生分布,侵染很多具有經(jīng)濟(jì)重要性的作物,引起嚴(yán)重病害。該屬病毒編碼的P0蛋白是VSR,不同成員的P0在序列和抑制子功能上存在差異。PO具有保守的類F-box基序(F-box-like motif),并且F-box-like motif是P0抑制子活性及P0與SKP1互作必不可少的因素,而最新研究表明馬鈴薯卷葉病毒內(nèi)蒙分離物編碼的沉默抑制子P0蛋白具有保守的F-box-like motif,卻不能與SKP1互作。目前P0與SKP1的互作在沉默抑制中的作用仍存在爭議。同時(shí),目前關(guān)于P0蛋白與寄主蛋白互作的報(bào)道極少。因此,本論文在已有基礎(chǔ)上,主要圍繞蕓薹黃化病毒基因型A(Brassica yellows virus genotype A,BrYV-A)P0蛋白,進(jìn)一步研究了P0BrA發(fā)揮功能的關(guān)鍵氨基酸區(qū)域及位點(diǎn),...

【文章頁數(shù)】：124 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 RNA沉默
    1.2 馬鈴薯卷葉病毒屬P0蛋白研究進(jìn)展
    1.3 葉綠體在植物免疫中的作用
    1.4 葉綠體與植物病毒的互作
    1.5 二磷酸核酮糖羧化酶組裝因子2(RAF2)蛋白研究概況
    1.6 本論文研究意義與目的
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 溶液和培養(yǎng)基的配制
    2.3 具體實(shí)驗(yàn)所用試劑及配制
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
第三章 BrYV P0與NbSKP1互作機(jī)制研究
    3.1 P0^BrA蛋白部分關(guān)鍵氨棊酸定位
    3.2 P0^BrA突變體與NbSKP1互作驗(yàn)證
    3.3 P0^BrA和NbSKP1互作不是P0^BrA抑制活性所必需的
    3.4 P0^BrA介導(dǎo)AGO1的降解不依賴于P0-NbSKP1的互作
    3.5 P0^BrA突變體LP可通過26S蛋白酶體途徑降解
    3.6 突變體LPKs活性分析
    3.7 本章小結(jié)與討論
第四章 BrYV-A P0蛋白與NbRAF2互作機(jī)制研究
    4.1 本生煙NbRAF2的克隆及功能分析
    4.2 P0^BrA蛋白與本生煙NbRAF2蛋白互作
    4.3 P0^BrA表達(dá)時(shí)NbRAF2的亞細(xì)胞定位
    4.4 P0^BrA抑制NbRAF2在細(xì)胞核中積累需要NbRAF2葉綠體和細(xì)胞核雙重定位
    4.5 P0^BrA抑制NbRAF2在細(xì)胞核中積累不依賴于P0^BrA VSR、致壞死和與SKP1互作功能
    4.6 BrYV-A侵染抑制NbRAF2在細(xì)胞核中積累
    4.7 沉默NbRAF2促進(jìn)BrYV-A侵染
    4.8 超表達(dá)細(xì)胞核中的RAF2蛋白增強(qiáng)對BrYV-A的抗性
    4.9 小結(jié)與討論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄Ⅰ P0^BrA突變體功能匯總
附錄Ⅱ 引物列表
個(gè)人簡歷



本文編號：3845043