雙氫青蒿素對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞體外作用及其機(jī)制的研究
本文關(guān)鍵詞:雙氫青蒿素對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞體外作用及其機(jī)制的研究
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【摘要】:目 的:本實(shí)驗(yàn)旨在探究雙氫青蒿素在體外對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的作用并探討其相關(guān)的作用機(jī)制為臨床上使用雙氫青蒿素治療人增生性瘢痕提供一定的理論基礎(chǔ)。材料與方法:使用噻唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)雙氫青蒿素作用24h和48h的細(xì)胞毒性。通過臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)活細(xì)胞檢測(cè)雙氫青蒿素作用24h和48h后對(duì)細(xì)胞增殖的影響。劃痕實(shí)驗(yàn)用來檢測(cè)雙氫青蒿素對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞遷移能力的作用。對(duì)雙氫青蒿素作用24h后的細(xì)胞進(jìn)行AV-PI雙染色通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡。雙氫青蒿素作用24h后細(xì)胞周期變化則通過試劑盒染色后用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。應(yīng)用Western blot對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1 (TGF-β1)、半胱天冬蛋白酶3(caspase3)、細(xì)胞周期蛋白D1(CyclinD1)和Ⅰ型膠原的蛋白表達(dá)進(jìn)行定量。TGF-β 1 mRNA的表達(dá)則通過實(shí)時(shí)定量PCR (Real time RT-PCR)來檢測(cè)。結(jié) 果:1.雙氫青蒿素呈時(shí)間依賴性和劑量依賴性地對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞表現(xiàn)出明顯的細(xì)胞毒性(24h的IC50值為14.0u M,48h的IC50值為9.3 μ M)并能顯著抑制人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的增殖。2.雙氫青蒿素可以劑量依賴性地抑制人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的遷移。3.雙氫青蒿素可以劑量依賴性地激活caspase3來增加人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的凋亡還可以通過抑制Cyclin D1表達(dá)將人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞周期阻滯在G0-G1期。4.雙氫青蒿素可以劑量依賴性地抑制人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞內(nèi)TGF-β 1和Ⅰ型膠原的表達(dá)。結(jié)論:1.雙氫青蒿素通過激活caspase3來增加人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的凋亡并通過抑制Cyclin D1誘導(dǎo)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞周期阻滯在G0-G1期從而對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞表現(xiàn)出細(xì)胞毒性和增殖抑制作用。2.雙氫青蒿素抑制人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的遷移。3.雙氫青蒿素通過下調(diào)TGF-β1基因和蛋白的表達(dá)而減少Ⅰ型膠原的表達(dá)可能是雙氫青蒿素抑制人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】:雙氫青蒿素 人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1 Ⅰ型膠原
【學(xué)位授予單位】:遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R622
【目錄】:
- 摘要4-6
- abstract6-8
- 英文縮略語8-9
- 前言9-12
- 材料與方法12-27
- 實(shí)驗(yàn)結(jié)果(附論文圖片)27-35
- 討論35-40
- 結(jié)論40-41
- 本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)41-42
- 參考文獻(xiàn)42-46
- 附錄 綜述46-56
- 參考文獻(xiàn)51-56
- 在學(xué)期間科研成績(jī)56-57
- 致謝57-58
- 個(gè)人簡(jiǎn)介58
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1 徐麗敏;陳學(xué)榮;屠呦呦;;雙氫青蒿素對(duì)狼瘡性BXSB小鼠的作用[A];2003中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2003年
2 程恅W;鄔伯安;c謖,
本文編號(hào):865906
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