雙氫青蒿素對人增生性瘢痕成纖維細胞體外作用及其機制的研究
本文關鍵詞:雙氫青蒿素對人增生性瘢痕成纖維細胞體外作用及其機制的研究
更多相關文章: 雙氫青蒿素 人增生性瘢痕成纖維細胞 轉化生長因子-β1 Ⅰ型膠原
【摘要】:目 的:本實驗旨在探究雙氫青蒿素在體外對人增生性瘢痕成纖維細胞的作用并探討其相關的作用機制為臨床上使用雙氫青蒿素治療人增生性瘢痕提供一定的理論基礎。材料與方法:使用噻唑藍(MTT)實驗檢測雙氫青蒿素作用24h和48h的細胞毒性。通過臺盼藍染色計數(shù)活細胞檢測雙氫青蒿素作用24h和48h后對細胞增殖的影響。劃痕實驗用來檢測雙氫青蒿素對人增生性瘢痕成纖維細胞遷移能力的作用。對雙氫青蒿素作用24h后的細胞進行AV-PI雙染色通過流式細胞儀檢測細胞凋亡。雙氫青蒿素作用24h后細胞周期變化則通過試劑盒染色后用流式細胞儀檢測。應用Western blot對轉化生長因子-β1 (TGF-β1)、半胱天冬蛋白酶3(caspase3)、細胞周期蛋白D1(CyclinD1)和Ⅰ型膠原的蛋白表達進行定量。TGF-β 1 mRNA的表達則通過實時定量PCR (Real time RT-PCR)來檢測。結 果:1.雙氫青蒿素呈時間依賴性和劑量依賴性地對人增生性瘢痕成纖維細胞表現(xiàn)出明顯的細胞毒性(24h的IC50值為14.0u M,48h的IC50值為9.3 μ M)并能顯著抑制人增生性瘢痕成纖維細胞的增殖。2.雙氫青蒿素可以劑量依賴性地抑制人增生性瘢痕成纖維細胞的遷移。3.雙氫青蒿素可以劑量依賴性地激活caspase3來增加人增生性瘢痕成纖維細胞的凋亡還可以通過抑制Cyclin D1表達將人增生性瘢痕成纖維細胞周期阻滯在G0-G1期。4.雙氫青蒿素可以劑量依賴性地抑制人增生性瘢痕成纖維細胞內TGF-β 1和Ⅰ型膠原的表達。結論:1.雙氫青蒿素通過激活caspase3來增加人增生性瘢痕成纖維細胞的凋亡并通過抑制Cyclin D1誘導人增生性瘢痕成纖維細胞周期阻滯在G0-G1期從而對人增生性瘢痕成纖維細胞表現(xiàn)出細胞毒性和增殖抑制作用。2.雙氫青蒿素抑制人增生性瘢痕成纖維細胞的遷移。3.雙氫青蒿素通過下調TGF-β1基因和蛋白的表達而減少Ⅰ型膠原的表達可能是雙氫青蒿素抑制人增生性瘢痕成纖維細胞的機制之一。
【關鍵詞】:雙氫青蒿素 人增生性瘢痕成纖維細胞 轉化生長因子-β1 Ⅰ型膠原
【學位授予單位】:遼寧中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R622
【目錄】:
- 摘要4-6
- abstract6-8
- 英文縮略語8-9
- 前言9-12
- 材料與方法12-27
- 實驗結果(附論文圖片)27-35
- 討論35-40
- 結論40-41
- 本研究創(chuàng)新性的自我評價41-42
- 參考文獻42-46
- 附錄 綜述46-56
- 參考文獻51-56
- 在學期間科研成績56-57
- 致謝57-58
- 個人簡介58
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2 程恅W;鄔伯安;c謖,
本文編號:865906
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