血管緊張素(1-7)對高糖誘導(dǎo)的MIN6細(xì)胞去分化及Fox01細(xì)胞內(nèi)定位的影響
發(fā)布時間:2024-07-10 19:32
目的:體外培養(yǎng)小鼠MIN6細(xì)胞,并給予Ang(1-7)干預(yù),利用免疫熒光技術(shù)在共聚焦顯微鏡下觀察細(xì)胞表面因子MafA、Ngn3的表達(dá)情況,及FoxO1在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)位置的變化,從而探討Ang(1-7)能否改善高糖誘導(dǎo)下的MIN6細(xì)胞去分化。方法:1.將小鼠MIN6細(xì)胞用按照一定比例配制的DMEN培養(yǎng)基接種于25ml培養(yǎng)瓶中,置于37℃、5%CO2濃度的細(xì)胞孵箱中進(jìn)行培養(yǎng)。每24小時更換培養(yǎng)液1次,待細(xì)胞生長至貼滿瓶壁80%時進(jìn)行傳代培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長狀況,選取第3-4代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。2.將細(xì)胞隨機(jī)分為四組,A組為正常對照無干預(yù)措施;B組加入提前配制的25mmol/L高糖溶液;C組加入25mmol/L高糖溶液+10-5mol/L的Ang(1-7)溶液,(先加入Ang(1-7),30分鐘后加入高糖溶液);D組加入25mmol/L高糖溶液+10-5mol/L的Ang(1-7)+10-5mol/L的A-779溶液(先加入A-779,30分鐘后加入Ang(1-7),再過30分鐘加高糖溶液);相同條件下共同培養(yǎng)24小時。3.利用免...
【文章頁數(shù)】:43 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
常用縮寫詞中英文對照表
前言
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑
1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器
1.4 實(shí)驗(yàn)主要試劑配制方法
2 研究方法
2.1 MIN-6 小鼠胰島細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 細(xì)胞爬片
2.2.1 玻片制備
2.2.2 細(xì)胞爬片
2.3 實(shí)驗(yàn)分組
2.4 細(xì)胞免疫化學(xué)染色
2.5 激光共聚焦顯微鏡成像
2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 顯微鏡下觀察各組MIN-6 細(xì)胞生長狀況
3.2 MIN-6 細(xì)胞表面標(biāo)志物MafA、Ngn3 的表達(dá)情況
3.3 不同干預(yù)條件下 MIN6 細(xì)胞去分化標(biāo)志物 Ngn3 表達(dá)情況
3.4 不同干預(yù)條件下 Fox O1 在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)位置情況
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷
本文編號:4004621
【文章頁數(shù)】:43 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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ABSTRACT
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前言
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑
1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器
1.4 實(shí)驗(yàn)主要試劑配制方法
2 研究方法
2.1 MIN-6 小鼠胰島細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 細(xì)胞爬片
2.2.1 玻片制備
2.2.2 細(xì)胞爬片
2.3 實(shí)驗(yàn)分組
2.4 細(xì)胞免疫化學(xué)染色
2.5 激光共聚焦顯微鏡成像
2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 顯微鏡下觀察各組MIN-6 細(xì)胞生長狀況
3.2 MIN-6 細(xì)胞表面標(biāo)志物MafA、Ngn3 的表達(dá)情況
3.3 不同干預(yù)條件下 MIN6 細(xì)胞去分化標(biāo)志物 Ngn3 表達(dá)情況
3.4 不同干預(yù)條件下 Fox O1 在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)位置情況
4 討論
5 結(jié)論
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