實驗?zāi)康?本論文旨在采用正交試驗方法優(yōu)化蒙藥地梢瓜的不同溶劑提取工藝,體外評價提取物的抗氧化活性,并對其中的部分藥物單體進行分離、純化與鑒定。實驗方法:通過單因素實驗和正交設(shè)計,以總黃酮含量為指標(biāo),考察不同溶劑（水、乙醇）、溶劑濃度、提取時間、液料比和浸泡時間因素對地梢瓜提取效果的影響,優(yōu)化提取工藝。通過地梢瓜提取物清除DPPH自由基的能力及對·OH、H2O2誘導(dǎo)的DNA氧化損傷的保護作用研究其體外抗氧化活性。先后以乙醇和水為溶劑,加熱回流法提取,濃縮得到浸膏。將浸膏復(fù)溶于蒸餾水,使用石油醚、正丁醇及二氯甲烷依次萃取,并濃縮收集得到4個部位。依據(jù)高效液相圖譜顯示,對二氯甲烷部位和正丁醇部位,以大孔樹脂、硅膠柱色譜、聚酰胺色譜硅膠制備板、HPLC等進行分離,得到單體化合物。通過MS、1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR等波譜學(xué)方法鑒定化合物結(jié)構(gòu)。實驗結(jié)果:水提工藝實驗中,總黃酮提取率影響因素為液料比>浸泡時間>提取時間,最佳提取條件為提取時間2h、液料比30:1、浸泡時間2h;醇提實驗中,總黃酮提取率影響因素為乙醇濃度>液料比>浸泡時間>提取時間,最佳... 

【文章來源】：中央民族大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－５野生地梢瓜??Ｆｉｇｕｒｅ?１－５?Ｃｙｎａｎｃｈｕｔｎ?Ｔｈｅｓｉｏｉｄｅｓ?（Ｆｒｅｙｎ．）?Ｋ．?Ｓｃｈｕｍ??

第二節(jié)實驗方法??—、地梢瓜提取物清除ＤＰＰＨ自由基的能力??采用ＤＰＰＨ自由基清除模型，評價地梢瓜不同提取物的抗氧化能力。�。タ装�，樣品??孑匕中加入不同濃度的樣品溶液ｌＯＯ＾Ｌ，然后加人１００｜ａＬ的２ｘｌ〇－７ｍｏｌ／ｍＬ的ＤＰＰＨ溶液；樣??參孔中分別加人不同濃度的樣品溶液１〇〇?ＰＬ、無水乙醇丨００?ｎＬ；對照孔屮加人ＤＰＰＨ溶液??１００?ＭＬ、蒸餾水１００?ｇＬ，混勻，室溫避光靜置反應(yīng)３０?ｍｉｎ，于５１７?ｒｎｎ處測吸光值，以Ｖｃ??為對照，用半數(shù)抑制率ＩＣ５０表示抗氧化能力Ｉ５３，流程圖如圖３－１所示。??｜ｄｐｐｈ自由甚的淸除率＝［１?－?（Ａ．?—?士．）／叫ｘ?１〇〇％??９６孔板?丨?［９６？Ｌ板?丨?Ｌ?９６孔板?丨??＾?????＇??加入樣品溶Ｓ?１００ＶＪＬ?｛加入樣品溶夜１０〇ｍＬ?加入ＣＰＰＨ＃夜１００ｖｊＬ??，加入２ｘｉ〇７ｍ＞ｌ／ｒｒｔ?ＣＰＰＨ§５夜?１０〇ｊＬ?ｔ?加入跡乙酵?１００＾Ｌ?，加入蒸＿?１００ｌ－ｉＬ??ｉ?樣品孔—?Ｌ?樣參孔?１?［＿?對照孔?｜??Ｘ?１?，??混勻??室晶避光靜置反應(yīng)３０ｎｉｎ?５１７?ｎｎ＊Ｍ吸光值??圖３－１清除ＤＰＰＨ自由基流程圖??Ｆｉｇｕｒｅ?３－１?Ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ＤＰＰＨ?ｒａｄｉｃａｌ?ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ??２２??

其中，Ａ，為加入某濃度提取液反應(yīng)液的吸光度，Ａｒ是該濃度提取液在測定波長的本底吸??光度，ＡＵ為陰性對照，即不加提取液時反應(yīng)液的吸光度??二、地梢瓜提取物對？?０Ｈ誘導(dǎo)ＤＮＡ氧化損傷的保護作用??參考趙金蓮等［５４）的方法，在％板中依次加人１叫ｌＯＯｎｇ／隊ＤＮＡ、１０?０．１?ｍｏｌ／Ｌ??（ＮＨ４）２Ｆｅ（Ｓ０４）２?溶液、１０?ｐＬ?０．１７?ｍｏｌ／Ｌ?的?ＥＤＴＡ?二鈉溶液、１０?叫?０．０１５?％Ｈ２０２?溶液、１０?ｐＬ??１０?ｉ耶／ｍＬ?Ｖｃ溶液、１０?ｐＬ不同濃度的水提總提物樣品溶液＇?４０卟ＴＥ緩沖溶液，最后加??入０．５?ｐＬ?Ｇｏｌｄｖｉｅｗ染料，輕輕搖勻靜置反應(yīng)５?ｍｉｎ，以維生素Ｃ為對照，測其熒光強度（突??光測定條件為：在激發(fā)波長４８６?ｎｍ下掃描５００?－?６９５ｎｍ范圍內(nèi)的熒光光強度），流程圖如??３－２所示，??９６孔板???—???Ｊ??１００ｎｇ／＾Ｌ?ＤＮＡ?ＩｐＬ??０．１?ｍｏｌ／Ｌ?（ＮＨ４）：Ｆｃ｛Ｓ０４）２?Ｈ）ｌｉＬ??０．１７ｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ－＊ｔｌ＾?ｌＯｕＬ??Ｔ??？ＣＨ誘導(dǎo)ＤＮＡ氧化損傷破壞雙鏈結(jié)構(gòu)?＾?ＴＴ?＾??０．０１�。荆ィ龋憨枺�?ｌＯｕＬ??加入對照品或樣品修復(fù)雙鏈結(jié)構(gòu)?ｌＯｍｇｍＬＶｃｏｒ總提物樣品溶液ｌ〇ｐＬ??ＴＩＥ緩沖溶液４０丨兒??Ｇｏｌｄｖｉｅｗ染料?０?５｜ｊＬ??搖勻靜置５?ｍｍ測熒光強度??圖３－２對＿ＯＨ誘導(dǎo)ＤＮＡ氧化損傷的保護的流程圖??Ｆｉｇｕｒｅ?３－２?Ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｎ?ＤＮＡ?ｏｘｉｄａｔｉｖｅ?ｄａｍａｇｅ?ｉｎｄｕｃｅｄ?ｂｙ?ＯＨ??２３??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]徐長卿正丁醇部位化學(xué)成分研究[J]. 鄒傳生,袁銘銘,吳西,曾順,歐陽蘭,周國平.  中藥材. 2020(03)
[2]華北白前生物堿對小菜蛾生物活性的研究[J]. 石旺鵬,季榮.  中國植保導(dǎo)刊. 2017(01)
[3]地梢瓜苷對人臍靜脈內(nèi)皮細胞的保護作用及機制[J]. 司艷紅,商朝,祝云平,宋葆華,李衛(wèi)紅,商戰(zhàn)平.  中成藥. 2016(07)
[4]江蘇地產(chǎn)白首烏C21甾體苷對高血脂大鼠的肝臟保護作用和抗氧化作用研究[J]. 王冬艷,華欣,葉記林,李芹,陳雁,季琰.  河北醫(yī)藥. 2016(03)
[5]耳葉牛皮消中C21甾類化學(xué)成分的分離與鑒定[J]. 郭娜,李曉鵬,許枬,韓偉健,林曉彤,徐曉雪.  沈陽藥科大學(xué)學(xué)報. 2016(01)
[6]民族藥材青陽參的化學(xué)成分研究[J]. 昝珂,過立農(nóng),鄭健,馬雙成.  中國中藥雜志. 2016(01)
[7]毛白前根莖化學(xué)成分的研究[J]. 崔波,郭夫江,李醫(yī)明.  中成藥. 2015(12)
[8]特色蒙藥地梢瓜的研究概況[J]. 蘇麗紅,王曉琴,黃慧,杜月.  中國民族醫(yī)藥雜志. 2015(11)
[9]白首烏苷B抗結(jié)腸癌作用的研究[J]. 陳蔣麗,張玲,李艷芳,張如松,楊蘇蓓.  中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2015(10)
[10]徐長卿逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥活性部位化學(xué)成分研究[J]. 褚文希,劉小紅,劉坤,霍立娜,姚慧麗,高琪,高華,王威.  中草藥. 2015(18)

碩士論文
[1]地梢瓜胚胎生物學(xué)研究[D]. 翟學(xué)婧.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]柳葉白前化學(xué)成分及其抗氧化活性研究[D]. 李婷婷.延邊大學(xué) 2015
[3]西藏牛皮消的化學(xué)成分研究[D]. 饒麗麗.昆明理工大學(xué) 2014
[4]地梢瓜果實化學(xué)成分及三七中皂苷類成分的研究[D]. 王玎.沈陽藥科大學(xué) 2007



本文編號：3600002