實(shí)驗(yàn)?zāi)康?本論文旨在采用正交試驗(yàn)方法優(yōu)化蒙藥地梢瓜的不同溶劑提取工藝,體外評(píng)價(jià)提取物的抗氧化活性,并對(duì)其中的部分藥物單體進(jìn)行分離、純化與鑒定。實(shí)驗(yàn)方法:通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交設(shè)計(jì),以總黃酮含量為指標(biāo),考察不同溶劑（水、乙醇）、溶劑濃度、提取時(shí)間、液料比和浸泡時(shí)間因素對(duì)地梢瓜提取效果的影響,優(yōu)化提取工藝。通過(guò)地梢瓜提取物清除DPPH自由基的能力及對(duì)·OH、H2O2誘導(dǎo)的DNA氧化損傷的保護(hù)作用研究其體外抗氧化活性。先后以乙醇和水為溶劑,加熱回流法提取,濃縮得到浸膏。將浸膏復(fù)溶于蒸餾水,使用石油醚、正丁醇及二氯甲烷依次萃取,并濃縮收集得到4個(gè)部位。依據(jù)高效液相圖譜顯示,對(duì)二氯甲烷部位和正丁醇部位,以大孔樹(shù)脂、硅膠柱色譜、聚酰胺色譜硅膠制備板、HPLC等進(jìn)行分離,得到單體化合物。通過(guò)MS、1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR等波譜學(xué)方法鑒定化合物結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:水提工藝實(shí)驗(yàn)中,總黃酮提取率影響因素為液料比>浸泡時(shí)間>提取時(shí)間,最佳提取條件為提取時(shí)間2h、液料比30:1、浸泡時(shí)間2h;醇提實(shí)驗(yàn)中,總黃酮提取率影響因素為乙醇濃度>液料比>浸泡時(shí)間>提取時(shí)間,最佳... 

【文章來(lái)源】：中央民族大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－５野生地梢瓜??Ｆｉｇｕｒｅ?１－５?Ｃｙｎａｎｃｈｕｔｎ?Ｔｈｅｓｉｏｉｄｅｓ?（Ｆｒｅｙｎ．）?Ｋ．?Ｓｃｈｕｍ??

第二節(jié)實(shí)驗(yàn)方法??—、地梢瓜提取物清除ＤＰＰＨ自由基的能力??采用ＤＰＰＨ自由基清除模型，評(píng)價(jià)地梢瓜不同提取物的抗氧化能力。�。タ装澹瑯悠�??孑匕中加入不同濃度的樣品溶液ｌＯＯ＾Ｌ，然后加人１００｜ａＬ的２ｘｌ〇－７ｍｏｌ／ｍＬ的ＤＰＰＨ溶液；樣??參孔中分別加人不同濃度的樣品溶液１〇〇?ＰＬ、無(wú)水乙醇丨００?ｎＬ；對(duì)照孔屮加人ＤＰＰＨ溶液??１００?ＭＬ、蒸餾水１００?ｇＬ，混勻，室溫避光靜置反應(yīng)３０?ｍｉｎ，于５１７?ｒｎｎ處測(cè)吸光值，以Ｖｃ??為對(duì)照，用半數(shù)抑制率ＩＣ５０表示抗氧化能力Ｉ５３，流程圖如圖３－１所示。??｜ｄｐｐｈ自由甚的淸除率＝［１?－?（Ａ．?—?士．）／叫ｘ?１〇〇％??９６孔板?丨?［９６？Ｌ板?丨?Ｌ?９６孔板?丨??＾?????＇??加入樣品溶Ｓ?１００ＶＪＬ?｛加入樣品溶夜１０〇ｍＬ?加入ＣＰＰＨ＃夜１００ｖｊＬ??，加入２ｘｉ〇７ｍ＞ｌ／ｒｒｔ?ＣＰＰＨ§５夜?１０〇ｊＬ?ｔ?加入跡乙酵?１００＾Ｌ?，加入蒸＿?１００ｌ－ｉＬ??ｉ?樣品孔—?Ｌ?樣參孔?１?［＿?對(duì)照孔?｜??Ｘ?１?，??混勻??室晶避光靜置反應(yīng)３０ｎｉｎ?５１７?ｎｎ＊Ｍ吸光值??圖３－１清除ＤＰＰＨ自由基流程圖??Ｆｉｇｕｒｅ?３－１?Ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ＤＰＰＨ?ｒａｄｉｃａｌ?ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ??２２??

其中，Ａ，為加入某濃度提取液反應(yīng)液的吸光度，Ａｒ是該濃度提取液在測(cè)定波長(zhǎng)的本底吸??光度，ＡＵ為陰性對(duì)照，即不加提取液時(shí)反應(yīng)液的吸光度??二、地梢瓜提取物對(duì)？?０Ｈ誘導(dǎo)ＤＮＡ氧化損傷的保護(hù)作用??參考趙金蓮等［５４）的方法，在％板中依次加人１叫ｌＯＯｎｇ／隊(duì)ＤＮＡ、１０?０．１?ｍｏｌ／Ｌ??（ＮＨ４）２Ｆｅ（Ｓ０４）２?溶液、１０?ｐＬ?０．１７?ｍｏｌ／Ｌ?的?ＥＤＴＡ?二鈉溶液、１０?叫?０．０１５?％Ｈ２０２?溶液、１０?ｐＬ??１０?ｉ耶／ｍＬ?Ｖｃ溶液、１０?ｐＬ不同濃度的水提總提物樣品溶液＇?４０卟ＴＥ緩沖溶液，最后加??入０．５?ｐＬ?Ｇｏｌｄｖｉｅｗ染料，輕輕搖勻靜置反應(yīng)５?ｍｉｎ，以維生素Ｃ為對(duì)照，測(cè)其熒光強(qiáng)度（突??光測(cè)定條件為：在激發(fā)波長(zhǎng)４８６?ｎｍ下掃描５００?－?６９５ｎｍ范圍內(nèi)的熒光光強(qiáng)度），流程圖如??３－２所示，??９６孔板???—???Ｊ??１００ｎｇ／＾Ｌ?ＤＮＡ?ＩｐＬ??０．１?ｍｏｌ／Ｌ?（ＮＨ４）：Ｆｃ｛Ｓ０４）２?Ｈ）ｌｉＬ??０．１７ｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ－＊ｔｌ＾?ｌＯｕＬ??Ｔ??？ＣＨ誘導(dǎo)ＤＮＡ氧化損傷破壞雙鏈結(jié)構(gòu)?＾?ＴＴ?＾??０．０１！＞％Ｈ：〇２?ｌＯｕＬ??加入對(duì)照品或樣品修復(fù)雙鏈結(jié)構(gòu)?ｌＯｍｇｍＬＶｃｏｒ總提物樣品溶液ｌ〇ｐＬ??ＴＩＥ緩沖溶液４０丨兒??Ｇｏｌｄｖｉｅｗ染料?０?５｜ｊＬ??搖勻靜置５?ｍｍ測(cè)熒光強(qiáng)度??圖３－２對(duì)＿ＯＨ誘導(dǎo)ＤＮＡ氧化損傷的保護(hù)的流程圖??Ｆｉｇｕｒｅ?３－２?Ｐｒｏｃｅｓｓ?ｏｆ?ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｎ?ＤＮＡ?ｏｘｉｄａｔｉｖｅ?ｄａｍａｇｅ?ｉｎｄｕｃｅｄ?ｂｙ?ＯＨ??２３??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]地梢瓜胚胎生物學(xué)研究[D]. 翟學(xué)婧.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]柳葉白前化學(xué)成分及其抗氧化活性研究[D]. 李婷婷.延邊大學(xué) 2015
[3]西藏牛皮消的化學(xué)成分研究[D]. 饒麗麗.昆明理工大學(xué) 2014
[4]地梢瓜果實(shí)化學(xué)成分及三七中皂苷類(lèi)成分的研究[D]. 王玎.沈陽(yáng)藥科大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3600002