目的:本課題應(yīng)用阿爾茨海默�。ˋlzheimer’s disease,AD）的5xFAD小鼠模型,給予圣草酚（Eriodictyol）干預(yù)。觀察給藥后動(dòng)物的行為學(xué)表現(xiàn)、Aβ斑塊變化、小膠質(zhì)細(xì)胞的改變并促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞增殖活化的細(xì)胞和分子機(jī)制。闡明圣草酚治療阿爾茨海默病5xFAD模型小鼠的作用及其可能的機(jī)制。為今后應(yīng)用圣草酚治療AD提供科學(xué)的理論依據(jù)。方法:本研究采用原代小膠質(zhì)細(xì)胞,在經(jīng)過不同濃度的圣草酚藥物處理后,通過ATP實(shí)驗(yàn)檢測小膠質(zhì)細(xì)胞的能量代謝以及熒光定量PCR檢測細(xì)胞炎癥水平本實(shí)驗(yàn)采用26周齡5xFAD雌性小鼠,建立AD認(rèn)知功能障礙模型。小鼠分為野生組、AD組、AD給藥組,每組7-10只小鼠,給藥方式通過藥物灌胃給予,每組小鼠均進(jìn)行隔日灌胃給藥,每周三次,持續(xù)8周。AD給藥組以圣草酚4 mg/kg為藥物終濃度,與藥物助溶劑（200μl DMSO+5 ml聚乙二醇+45 ml生理鹽水）按每只小鼠10μl/g的量給予灌胃,野生型組和AD組給予等量藥物助溶劑灌胃。在給藥期間進(jìn)行行為學(xué)檢測,并記錄動(dòng)物給藥開始及給藥結(jié)束后的體重。在小鼠8月齡時(shí)處死動(dòng)物,取小鼠腦組織,腦組織分別用來提取蛋... 

【文章來源】：山西中醫(yī)藥大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

原代小膠質(zhì)細(xì)胞不同濃度的藥物處理后ATP產(chǎn)生檢測結(jié)果

圣草酚通過促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞增殖改善阿爾茨海默病認(rèn)知功能17圖2.圣草酚處理后的原代小膠質(zhì)細(xì)胞在LPS刺激下炎癥水平檢測結(jié)果（A-D）原代小膠質(zhì)細(xì)胞在10μM圣草酚處理后經(jīng)過24h的LPS刺激，iNOS，IL-6，IL-4，IL-10的mRNA水平（n=3）數(shù)據(jù)為平均值±SEM。**P<0.01單因素方差分析。2.3圣草酚對(duì)5xFAD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響在體實(shí)驗(yàn)使用的是5xFAD基因突變小鼠，為了進(jìn)一步探究圣草酚在AD中的相關(guān)作用及機(jī)制，我們采用了的5xFAD基因突變小鼠模型，小鼠的基因型通過瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行鑒定。為了獲得足量的5xFAD基因突變小鼠，實(shí)驗(yàn)中將5xFAD與WT小鼠雜交，使其產(chǎn)生雜合型的5xFAD基因突變小鼠，并在小鼠出生30天內(nèi)進(jìn)行基因型檢測。在給藥前和藥物治療結(jié)束后，我們對(duì)小鼠體重進(jìn)行稱量，結(jié)果顯示小鼠在給藥治療前后體重?zé)o明顯差異（N.S）（圖3A），糞便也無形態(tài)差異，提示圣草酚在本實(shí)驗(yàn)所使用的的濃度范圍內(nèi)無明顯的毒副作用。在小鼠給藥2個(gè)月后，即小鼠8月齡時(shí)進(jìn)行新物體識(shí)別及Morris水迷宮測試。新物體識(shí)別結(jié)果顯示，在三天適應(yīng)期期間，野生型組（WT）與AD給藥組在第二、第三天較第一天五分鐘內(nèi)移動(dòng)距離明顯減少，而AD組小鼠在第二、第三天較第一天五分鐘內(nèi)移動(dòng)總距離無明顯差異（圖3B），表明AD小鼠給藥后對(duì)空間環(huán)境適應(yīng)能力明顯改善。而在新物體識(shí)別測試中，野生型組和AD給藥組小鼠對(duì)新物體有明顯的偏好，而AD組小鼠對(duì)新物體無明顯偏好（圖3C），表明給藥后的AD小鼠認(rèn)知能力得到明顯改善。

圖3.8月齡5xFAD小鼠體重及新物體識(shí)別測試（）小鼠給藥前后小鼠的體重（）適應(yīng)期小鼠活動(dòng)總距離（）測試期小

【參考文獻(xiàn)】：
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