背景:目前的研究表明,生物鐘基因Per1在多種腫瘤中表達下調(diào),在促進腫瘤進展中發(fā)揮重要作用。然而,生物鐘基因Per1在腫瘤中的生物學功能和作用機制尚不清楚。目的:研究口腔鱗癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）中生物鐘基因Per1的表達水平及其表達改變的臨床意義,并探索Per1表達在體外和體內(nèi)的生物學功能。方法:收集有完整隨訪資料和臨床資料的86例OSCC患者癌及癌旁病理組織標本,用免疫組化檢測86例OSCC患者癌組織及癌旁組織標本中Per1的表達水平,Per1表達差異對OSCC患者預后的影響采用Kaplan-Meier生存分析和log-rank檢驗,Per1的表達與OSCC患者臨床病理參數(shù)的相關性分析采用卡方檢驗。在OSCC細胞中分別用過表達Per1的慢病毒和Per1-shRNA慢病毒對Per1進行過表達和敲減后,在電鏡下觀察自噬體形成,用MTT實驗和CCK8實驗檢測細胞增殖,細胞凋亡檢測使用Tunel實驗和流式細胞實驗,LC3B、Beclin1、P62、p-mTOR、mTOR、p-AKT、AKT蛋白的表達水平檢測使用western blotting... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

生物鐘基因Per1在口腔鱗癌組織和細胞中表達降低

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文41圖2.過表達和沉默Per1后，OSCC細胞增殖和凋亡的變化。FIGURE2.ChangesintheproliferationandapoptosisofOSCCcellsaftertheoverexpressionandsilencingofPer1.A-B.穩(wěn)轉(zhuǎn)過表達和沉默Per1OSCC細胞的效率檢測表明，Per1過表達SCC15細胞中，Per1mRNA和蛋白表達水平顯著升高；Per1敲減的TSCCA細胞中，Per1mRNA和蛋白表達顯著降低。C.流式細胞實驗檢測結(jié)果顯示：SCC15細胞中過表達Per1后細胞凋亡指數(shù)顯著升高，TSCCA細胞中沉默Per1后細胞凋亡指數(shù)顯著降低。D.TUNEL實驗檢測發(fā)現(xiàn)，在TSCCA細胞中沉默Per1后Tunel陽性率明顯降低，而在SCC15細胞中過表達Per1后Tunel陽性率明顯升高。E-F.MTT實驗和CCK8實驗結(jié)果顯示：在SCC15細胞中過表達Per1后增殖能力明顯降低，沉默Per1的TSCCA細胞的增殖能力明顯升高。*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001；****P<0.0001。

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文42圖3.過表達和沉默Per1后，OSCC細胞自噬和AKT/mTOR通路活性的變化。FIGURE3.ChangesinautophagyandAKT/mTORpathwayactivityinOSCCcellsaftertheoverexpressionandsilencingofPer1.A.TEM實驗檢測結(jié)果表明：過表達Per1的SCC15細胞中的自噬小體密度顯著增加，沉


本文編號：3261937