發(fā)布時間：2021-06-29 08:37

　　目的:通過檢測淫羊藿素（ICT）對TDP-43感染SH-SY5Y細(xì)胞中自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,探索ICT對TDP-43感染SH-SY5Y細(xì)胞損傷模型的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法:用加載有TDP-43基因的病毒感染生長狀態(tài)良好的SH-SY5Y細(xì)胞構(gòu)建TDP-43誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞損傷模型,通過CCK-8法檢測不同感染時間細(xì)胞活力變化以確定最佳感染時間。感染后通過實時熒光定量PCR（q PCR）檢測TDP-43m RNA的表達(dá)水平及Western blot檢測TDP-43的表達(dá)水平以驗證模型建立成功。用1μmol/L ICT對TDP-43細(xì)胞損傷模型進(jìn)行藥物干預(yù)48小時,用CCK-8法檢測藥物干預(yù)前后細(xì)胞活力變化,同時通過Western blot法檢測TDP-43細(xì)胞損傷模型在藥物干預(yù)前后TDP-43蛋白及凋亡蛋白Caspase-3、自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、LC3-II/I、p62表達(dá)水平變化,以評估ICT干預(yù)TDP-43誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞損傷模型的效果及可能機(jī)制。結(jié)果:加載有TDP-43基因的病毒感染SH-SY5Y細(xì)胞12 h后,通過CCK-8法檢測示TDP-43組細(xì)胞活力較CON組下... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

在顯微鏡下觀察不同濃度MOI病毒感染SH-SY5Y細(xì)胞的形態(tài)200×B顯微鏡下NOR組與CON組細(xì)胞形態(tài)比較200×CNOR組與CON組細(xì)胞活力比較（注：差異無統(tǒng)計學(xué)意義）

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文周彥均19圖2顯微鏡下觀察不同感染時間對SH-SY5Y細(xì)胞的變化100×圖3感染8、10、12、14、16h后細(xì)胞模型活力的變化（注：a表示TDP-43與CON組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05，n=5）

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文周彥均19圖2顯微鏡下觀察不同感染時間對SH-SY5Y細(xì)胞的變化100×圖3感染8、10、12、14、16h后細(xì)胞模型活力的變化（注：a表示TDP-43與CON組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05，n=5）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]淫羊藿苷在阿爾茨海默病中的神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 李瑩,黃南渠,馮飛,羅勇.  中藥藥理與臨床. 2019(01)
[2]雷帕霉素抗阿爾茲海默病的機(jī)制研究[J]. 顧覺奮.  國外醫(yī)藥(抗生素分冊). 2018(02)
[3]細(xì)胞凋亡與自噬關(guān)系的探討[J]. 裴曉川,張媛媛,張志華.  國際輸血及血液學(xué)雜志. 2016 (06)
[4]自噬途徑常用分子生物學(xué)指標(biāo)在反映自噬活性上的意義[J]. 潘明嬌,王小丹,喻陸.  醫(yī)學(xué)綜述. 2015(05)
[5]老年癡呆患者認(rèn)知功能障礙的分析[J]. 范妮,何紅波,肖計劃,賈艷濱.  中國心理衛(wèi)生雜志. 2002(09)

碩士論文
[1]淫羊藿苷/素對AD樣SH-SY5Y細(xì)胞p-Tau、GSK-3β及PP2A表達(dá)水平影響的研究[D]. 李瑩.遵義醫(yī)科大學(xué) 2019



本文編號：3256121