第一章BMSCs體外培養(yǎng)及鑒定目的:建立體外培養(yǎng)、鑒定BMSCs完整體系,為動物體內實驗提供細胞來源。方法:1.取普通級雄性新西蘭兔股骨及脛骨,全骨髓貼壁法分離原代BMSCs。2.倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化,流式細胞儀檢測CD34、CD45、CD29、CD44、CD90表面分子標志物表達率。3.對分離培養(yǎng)細胞進行成骨、脂肪及軟骨誘導分化,誘導周期結束后行特異性染色（茜素紅、油紅O、阿利辛藍染色）。結果:本實驗分離、培養(yǎng)的原代細胞形態(tài)均一,呈長梭形,漩渦狀、稻穗樣分布。高表達CD29、CD44及CD90,低表達CD34、CD45。三系誘導可見脂滴、骨鹽、膠原纖維形成,證實所培養(yǎng)細胞為BMSCs。第二章BMP-4對BMSCs體外增殖及成軟骨分化影響目的:探明Ad-BMP-4對BMSCs體外增殖及相關成軟骨蛋白分泌的影響。方法:1.取P2代細胞,設立病毒梯度組,感染細胞,觀察綠色熒光蛋白表達情況,檢測綠色熒光蛋白表達量以確定最佳MOI。2.取P2代細胞,設立對照組、空載組、實驗組,于鋪板第0d、1d、3d、5d、7d行CCK-8法檢測細胞增殖。3.取P2代細胞,設立對照組、空載組、實驗組... 

【文章來源】：蚌埠醫(yī)學院安徽省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 BMSCs體外培養(yǎng)及鑒定
    材料和方法
    結果
    討論
第二章 BMP-4對BMSCs體外增殖及成軟骨分化影響
    材料和方法
    結果
    討論
第三章 Ad-BMP-4-BMSCs復合同種異體骨軟骨柱修復關節(jié)軟骨缺損
    材料和方法
    結果
    討論
結論
參考文獻
致謝
附錄 A 英文縮略詞表
附錄 B 支架材料在軟骨組織工程中的應用進展
    參考文獻
附錄 C 攻讀學位期間發(fā)表文章


【參考文獻】：
期刊論文
[1]新型殼聚糖水凝膠結合軟骨細胞修復兔關節(jié)軟骨缺損的實驗研究(英文)[J]. Ming ZHAO,Zhu CHEN,Kang LIU,Yu-qing WAN,Xu-dong LI,Xu-wei LUO,Yi-guang BAI,Ze-long YANG,Gang FENG.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(11)
[2]軟骨脫細胞基質支架材料的軟骨組織工程實驗研究[J]. 張晨,景士兵,楊琨,徐燕莉,聶軍,王燕妮,文曉泉,高景恒.  中國修復重建外科雜志. 2008(07)
[3]PLGA-[ASP-PEG]三嵌段基質材料對骨髓間充質干細胞黏附增殖及誘導成骨分化的研究[J]. 段智霞,鄭啟新,郭曉東,白玉,袁泉,陳順廣.  中國骨傷. 2008(04)



本文編號：3175484