第一章BMSCs體外培養(yǎng)及鑒定目的:建立體外培養(yǎng)、鑒定BMSCs完整體系,為動物體內(nèi)實驗提供細(xì)胞來源。方法:1.取普通級雄性新西蘭兔股骨及脛骨,全骨髓貼壁法分離原代BMSCs。2.倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化,流式細(xì)胞儀檢測CD34、CD45、CD29、CD44、CD90表面分子標(biāo)志物表達(dá)率。3.對分離培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行成骨、脂肪及軟骨誘導(dǎo)分化,誘導(dǎo)周期結(jié)束后行特異性染色（茜素紅、油紅O、阿利辛藍(lán)染色）。結(jié)果:本實驗分離、培養(yǎng)的原代細(xì)胞形態(tài)均一,呈長梭形,漩渦狀、稻穗樣分布。高表達(dá)CD29、CD44及CD90,低表達(dá)CD34、CD45。三系誘導(dǎo)可見脂滴、骨鹽、膠原纖維形成,證實所培養(yǎng)細(xì)胞為BMSCs。第二章BMP-4對BMSCs體外增殖及成軟骨分化影響目的:探明Ad-BMP-4對BMSCs體外增殖及相關(guān)成軟骨蛋白分泌的影響。方法:1.取P2代細(xì)胞,設(shè)立病毒梯度組,感染細(xì)胞,觀察綠色熒光蛋白表達(dá)情況,檢測綠色熒光蛋白表達(dá)量以確定最佳MOI。2.取P2代細(xì)胞,設(shè)立對照組、空載組、實驗組,于鋪板第0d、1d、3d、5d、7d行CCK-8法檢測細(xì)胞增殖。3.取P2代細(xì)胞,設(shè)立對照組、空載組、實驗組... 

【文章來源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 BMSCs體外培養(yǎng)及鑒定
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
第二章 BMP-4對BMSCs體外增殖及成軟骨分化影響
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
第三章 Ad-BMP-4-BMSCs復(fù)合同種異體骨軟骨柱修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄 A 英文縮略詞表
附錄 B 支架材料在軟骨組織工程中的應(yīng)用進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
附錄 C 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]新型殼聚糖水凝膠結(jié)合軟骨細(xì)胞修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的實驗研究(英文)[J]. Ming ZHAO,Zhu CHEN,Kang LIU,Yu-qing WAN,Xu-dong LI,Xu-wei LUO,Yi-guang BAI,Ze-long YANG,Gang FENG.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(11)
[2]軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)支架材料的軟骨組織工程實驗研究[J]. 張晨,景士兵,楊琨,徐燕莉,聶軍,王燕妮,文曉泉,高景恒.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2008(07)
[3]PLGA-[ASP-PEG]三嵌段基質(zhì)材料對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞黏附增殖及誘導(dǎo)成骨分化的研究[J]. 段智霞,鄭啟新,郭曉東,白玉,袁泉,陳順廣.  中國骨傷. 2008(04)



本文編號：3175484