有氧糖酵解作為腫瘤細胞特有的一種代謝模式,成為抗腫瘤治療研究的熱點。但是,許多研究發(fā)現,腫瘤細胞能夠在有氧糖酵解受損時存活下來。除了有氧糖酵解之外,“谷氨酰胺成癮”是腫瘤細胞代謝的第二大特點。在腫瘤細胞中谷氨酰胺產生的谷氨酸具有多種代謝途徑,包括被腫瘤細胞排出胞外以換取胱氨酸,參與生成抗氧化劑谷胱甘肽（glutathione,GSH）以及轉化為α-酮戊二酸（α-ketoglutarate,α-KG）進入三羧酸循環(huán)（Tricarboxylic acid cycle,TCA）供能。研究表明,膠質瘤細胞的有氧糖酵解與谷氨酰胺代謝具有協同效應以滿足腫瘤細胞對生物能和生物合成的需求。因此,更好地理解腫瘤細胞有氧糖酵解與谷氨酰胺代謝之間的關系可能會找到新的治療方案。在本研究中,我們發(fā)現抑制神經膠質瘤細胞糖酵解或剝奪葡萄糖,谷氨酸外排異常增加。我們進一步發(fā)現,抑制糖酵解或葡萄糖饑餓會誘導谷氨酸/胱氨酸反向轉運蛋白xCT（glutamate/cystine antiporter xCT或SLC7A11）和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-glutamate cysteine synthase,γ-GCS）... 

【文章來源】：山西大學山西省

【文章頁數】：62 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 神經膠質瘤研究現狀
        1.1.1 神經膠質瘤概述
        1.1.2 神經膠質瘤的臨床表現
        1.1.3 神經膠質瘤治療現狀和進展
    1.2 腫瘤細胞的代謝重編程
        1.2.1 代謝重編程概述
        1.2.2 有氧糖酵解與腫瘤細胞的關系
        1.2.3 谷氨酸代謝與腫瘤細胞的關系
    1.3 腫瘤細胞氧化還原平衡
        1.3.1 腫瘤細胞氧化還原平衡概述
        1.3.2 谷氨酸胱氨酸轉運系統與腫瘤細胞的關系
        1.3.3 還原型谷胱甘肽與腫瘤細胞的關系
    1.4 論文的設計思路
        1.4.1 研究內容與意義
        1.4.2 實驗流程圖
        1.4.3 研究的創(chuàng)新點
第二章 OPA衍生化檢測膠質瘤胞外谷氨酰胺和谷氨酸
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 細胞株
        2.2.2 實驗試劑
        2.2.3 實驗儀器
        2.2.4 相關試劑的配制
    2.3 實驗方法
        2.3.1 OPA衍生化谷氨酰胺和谷氨酸
        2.3.2 HPLC檢測OPA衍生化谷氨酰胺和谷氨酸的標準品
    2.4 實驗結果
        2.4.1 OPA衍生化谷氨酰胺和谷氨酸最佳波長的確定
        2.4.2 HPLC檢測OPA衍生化谷氨酰胺和谷氨酸的標準品
    2.5 討論
第三章 糖酵解阻斷時谷氨酸代謝回補維持氧化還原平衡
    3.1 引言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 細胞株
        3.2.2 實驗試劑
        3.2.3 實驗儀器
        3.2.4 相關試劑的配制
    3.3 實驗方法
        3.3.1 細胞培養(yǎng)
        3.3.2 葡萄糖和乳酸含量的檢測
        3.3.3 谷氨酸含量的檢測
        3.3.4 實時熒光定量PCR檢測mRNA水平
        3.3.5 蛋白質免疫印跡分析
        3.3.6 谷氨酸脫氫酶（GLUD1）活性的檢測
        3.3.7 還原型谷胱甘肽（GSH）含量的檢測
        3.3.8 活性氧（ROS）含量的檢測
        3.3.9 統計學分析
    3.4 實驗結果
        3.4.1 抑制糖酵解降低葡萄糖消耗并減少乳酸分泌
        3.4.2 糖酵解阻斷時谷氨酸外排增多
        3.4.3 抑制糖酵解促進xCT和γ-GCS的轉錄水平升高
        3.4.4 抑制糖酵解上調xCT和γ-GCS的蛋白表達并降低GLUD1 活性
        3.4.5 糖酵解阻斷時谷氨酸代謝回補維持氧化還原平衡
    3.5 討論
第四章 阻斷谷氨酸的氧化還原途徑增強糖酵解抑制劑敏感性
    4.1 引言
    4.2 實驗材料
        4.2.1 細胞株
        4.2.2 實驗試劑
        4.2.3 實驗儀器
        4.2.4 相關試劑的配制
    4.3 實驗方法
        4.3.1 細胞培養(yǎng)
        4.3.2 MTT檢測細胞增殖
        4.3.3 還原型谷胱甘肽（GSH）含量的檢測
        4.3.4 活性氧（ROS）含量的檢測
        4.3.5 統計學分析
    4.4 實驗結果
        4.4.1 糖酵解抑制劑聯合xCT或γ-GCS的抑制劑降低谷胱甘肽水平
        4.4.2 糖酵解抑制劑聯合xCT或γ-GCS的抑制劑降低細胞活力
    4.5 討論
總結與展望
參考文獻
附錄1 縮略語
附錄2 實驗儀器
附錄3 相關溶液的配制
致謝
個人簡況及聯系方式



本文編號：3160745