不完全佐劑和完全佐劑分別與牛二型膠原蛋白制備的SD大鼠CIA模型的比較研究
發(fā)布時(shí)間:2021-03-19 10:04
目的:制作膠原誘導(dǎo)的類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Collagen-induced rheumatoid arthritis,CIA)模型;動(dòng)態(tài)比較不完全弗氏佐劑(Incomplete Freund’s adjuvant,IFA)和完全弗氏佐劑(Complete Freund’s adjuvant,CFA)分別與牛II型膠原蛋白(Calf II collagen,CII)充分乳化后形成的的乳化劑誘導(dǎo)形成的兩種SD大鼠CIA模型的效果。方法:選用35只8周齡雌性SPF級(jí)SD大鼠,隨機(jī)分為生理鹽水對(duì)照組(7只),CII+IFA模型組(14只)和CII+CFA模型組(14只)。生理鹽水對(duì)照組皮內(nèi)注射生理鹽水,CII+IFA模型組皮內(nèi)注射CII+IFA乳化劑,CII+CFA模型組皮內(nèi)注射CII+CFA乳化劑,建立SD大鼠CIA模型。在初次免疫前及免疫后每3天觀察一次大鼠一般狀態(tài);測(cè)量三組大鼠體重,足爪體積,評(píng)價(jià)關(guān)節(jié)炎指數(shù)。在免疫第0,7,14,21,28,35,42天不同時(shí)間點(diǎn)收集胸腺,腎上腺,脾臟,膝關(guān)節(jié)處滑膜組織和踝關(guān)節(jié)及血液標(biāo)本。測(cè)量測(cè)胸腺,腎上腺,脾臟的質(zhì)量指數(shù);采用魏氏血沉法檢測(cè)紅細(xì)胞沉降率(Ery...
【文章來(lái)源】:蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省
【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
乳化劑穩(wěn)定性鑒定圖
12(10)透明二甲苯15min×2次。(11)中性樹(shù)膠封片。在光學(xué)顯微鏡鏡下觀察滑膜組織和踝關(guān)節(jié)的病理學(xué)變化。4.血沉的測(cè)定在初次免疫第0,7,14,21,28,35,42天不同時(shí)間點(diǎn)10%水利氯醛麻醉10min后,使用黑色帽含有枸櫞酸鈉的負(fù)壓采血管抽取下腔靜脈血3ml,并標(biāo)記。在2小時(shí)內(nèi)使用魏氏血沉法測(cè)量血沉。操作方法:(1)吸血混勻全血吸入Westergren血沉管內(nèi)至刻度“0”處,拭去管外殘留余血。(2)立血沉管將血沉管直立于血沉架上(圖2)。(3)讀數(shù)1h(或2h)末準(zhǔn)確讀取紅細(xì)胞下沉后露出的血漿段高度,即為紅細(xì)胞沉降率。(4)計(jì)量方法XXmm/h。圖2.魏氏血沉法測(cè)量血沉示意圖Figure2.SchematicdiagramofWei"serythrocytesedimentationratemeasurement5.臟器質(zhì)量分?jǐn)?shù)初次免疫日及之后的每周IFA與CFA兩組各處死兩只,生理組處死一只大鼠取脾臟,胸腺,腎上腺在電子天平上測(cè)量臟器質(zhì)量并記錄。臟器質(zhì)量分?jǐn)?shù):胸腺,脾臟和腎上腺質(zhì)量分?jǐn)?shù)是每10g體重臟器的重量(mg)。
14結(jié)果1.一般情況觀察生理鹽水組SD大鼠精神狀態(tài)良好,活動(dòng)自如,毛發(fā)白亮、有光澤度,攝食及飲水正常。兩模型組在初次注射第1天之后注射部位針眼處可形成小潰瘍,肉眼可見(jiàn)CFA+CII組潰瘍(圖3)更加嚴(yán)重,多數(shù)一周內(nèi)可以結(jié)痂自愈。隨著病情的發(fā)展,模型組大鼠與生理鹽水組相比,飲食減少,毛發(fā)光澤度下降,干枯容易脫落,精神狀態(tài)欠佳,活動(dòng)減少且行動(dòng)遲緩。圖3.模型組SD大鼠尾部免疫注射部位感染圖Figure3.InfectiondiagramoftailinjectionsiteofSDratsinmodelgroup在初次免疫后第12天左右,開(kāi)始出現(xiàn)關(guān)節(jié)紅腫輕度腫脹感,部分關(guān)節(jié)呈急性炎癥表現(xiàn),表面皮膚充血粉紅發(fā)亮,活動(dòng)受限。關(guān)節(jié)炎成對(duì)稱(chēng)性,以后肢更加明顯。在第15天部分大鼠關(guān)節(jié)炎明顯不能負(fù)重,至實(shí)驗(yàn)結(jié)束保持腫脹。12天及12天之后的發(fā)病率及模型成功率見(jiàn)表2。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]He-Ne激光結(jié)合丹參對(duì)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響[J]. 陳霞,余艷琴,計(jì)晶晶,陸改玲,郝金奇,周澐,趙飛,景麗霞. 激光生物學(xué)報(bào). 2017(03)
[2]黃芪桂枝五物湯對(duì)CIA模型大鼠關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞凋亡的影響[J]. 劉佳維,王永輝,李艷彥,張永剛,趙樂(lè),張若楠. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2017(14)
[3]雷公藤和雷公藤加逍遙散對(duì)CIA大鼠模型的抗炎作用及肝損傷情況的對(duì)比研究[J]. 喬歡,閆潤(rùn)紅. 世界中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2017(03)
[4]維藥野西瓜對(duì)膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎大鼠模型的治療機(jī)制研究[J]. 李培奇,周文濤,娜爾給扎·艾爾肯,甫拉提·熱西提,褚冰,陳恒碩,王雪,周曉濤. 中國(guó)民族民間醫(yī)藥. 2016(20)
[5]雙藤痹痛凝膠膏劑對(duì)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎模型大鼠的作用[J]. 嚴(yán)國(guó)鴻,黃燕,李煌,褚克丹,徐偉,夏裕發(fā),呂鳳芹. 中藥藥理與臨床. 2014(01)
[6]從“濕熱瘀毒證”論治膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎急性發(fā)作期的臨床研究[J]. 范利鋒,翁庚民. 世界中醫(yī)藥. 2013(03)
[7]風(fēng)濕寧膠囊對(duì)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 馬艷苗,王永輝,李艷彥,高麗,周然. 中醫(yī)雜志. 2013(04)
[8]臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎大鼠免疫相關(guān)易栓狀態(tài)的干預(yù)作用[J]. 林傳明,顧健,張育,沈連軍,馬莉,倪軍,汪中強(qiáng),吳蔚. 中華血液學(xué)雜志. 2012 (03)
[9]實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型建立及病理機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 宋珊珊,張玲玲,魏偉. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2011(12)
[10]昆明山海棠對(duì)CIA大鼠模型中HIF-1α表達(dá)的影響[J]. 白玲,陳森洲,梁爽,李莎莎,王雯. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2011(10)
本文編號(hào):3089407
【文章來(lái)源】:蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省
【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
乳化劑穩(wěn)定性鑒定圖
12(10)透明二甲苯15min×2次。(11)中性樹(shù)膠封片。在光學(xué)顯微鏡鏡下觀察滑膜組織和踝關(guān)節(jié)的病理學(xué)變化。4.血沉的測(cè)定在初次免疫第0,7,14,21,28,35,42天不同時(shí)間點(diǎn)10%水利氯醛麻醉10min后,使用黑色帽含有枸櫞酸鈉的負(fù)壓采血管抽取下腔靜脈血3ml,并標(biāo)記。在2小時(shí)內(nèi)使用魏氏血沉法測(cè)量血沉。操作方法:(1)吸血混勻全血吸入Westergren血沉管內(nèi)至刻度“0”處,拭去管外殘留余血。(2)立血沉管將血沉管直立于血沉架上(圖2)。(3)讀數(shù)1h(或2h)末準(zhǔn)確讀取紅細(xì)胞下沉后露出的血漿段高度,即為紅細(xì)胞沉降率。(4)計(jì)量方法XXmm/h。圖2.魏氏血沉法測(cè)量血沉示意圖Figure2.SchematicdiagramofWei"serythrocytesedimentationratemeasurement5.臟器質(zhì)量分?jǐn)?shù)初次免疫日及之后的每周IFA與CFA兩組各處死兩只,生理組處死一只大鼠取脾臟,胸腺,腎上腺在電子天平上測(cè)量臟器質(zhì)量并記錄。臟器質(zhì)量分?jǐn)?shù):胸腺,脾臟和腎上腺質(zhì)量分?jǐn)?shù)是每10g體重臟器的重量(mg)。
14結(jié)果1.一般情況觀察生理鹽水組SD大鼠精神狀態(tài)良好,活動(dòng)自如,毛發(fā)白亮、有光澤度,攝食及飲水正常。兩模型組在初次注射第1天之后注射部位針眼處可形成小潰瘍,肉眼可見(jiàn)CFA+CII組潰瘍(圖3)更加嚴(yán)重,多數(shù)一周內(nèi)可以結(jié)痂自愈。隨著病情的發(fā)展,模型組大鼠與生理鹽水組相比,飲食減少,毛發(fā)光澤度下降,干枯容易脫落,精神狀態(tài)欠佳,活動(dòng)減少且行動(dòng)遲緩。圖3.模型組SD大鼠尾部免疫注射部位感染圖Figure3.InfectiondiagramoftailinjectionsiteofSDratsinmodelgroup在初次免疫后第12天左右,開(kāi)始出現(xiàn)關(guān)節(jié)紅腫輕度腫脹感,部分關(guān)節(jié)呈急性炎癥表現(xiàn),表面皮膚充血粉紅發(fā)亮,活動(dòng)受限。關(guān)節(jié)炎成對(duì)稱(chēng)性,以后肢更加明顯。在第15天部分大鼠關(guān)節(jié)炎明顯不能負(fù)重,至實(shí)驗(yàn)結(jié)束保持腫脹。12天及12天之后的發(fā)病率及模型成功率見(jiàn)表2。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]He-Ne激光結(jié)合丹參對(duì)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響[J]. 陳霞,余艷琴,計(jì)晶晶,陸改玲,郝金奇,周澐,趙飛,景麗霞. 激光生物學(xué)報(bào). 2017(03)
[2]黃芪桂枝五物湯對(duì)CIA模型大鼠關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞凋亡的影響[J]. 劉佳維,王永輝,李艷彥,張永剛,趙樂(lè),張若楠. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2017(14)
[3]雷公藤和雷公藤加逍遙散對(duì)CIA大鼠模型的抗炎作用及肝損傷情況的對(duì)比研究[J]. 喬歡,閆潤(rùn)紅. 世界中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2017(03)
[4]維藥野西瓜對(duì)膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎大鼠模型的治療機(jī)制研究[J]. 李培奇,周文濤,娜爾給扎·艾爾肯,甫拉提·熱西提,褚冰,陳恒碩,王雪,周曉濤. 中國(guó)民族民間醫(yī)藥. 2016(20)
[5]雙藤痹痛凝膠膏劑對(duì)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎模型大鼠的作用[J]. 嚴(yán)國(guó)鴻,黃燕,李煌,褚克丹,徐偉,夏裕發(fā),呂鳳芹. 中藥藥理與臨床. 2014(01)
[6]從“濕熱瘀毒證”論治膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎急性發(fā)作期的臨床研究[J]. 范利鋒,翁庚民. 世界中醫(yī)藥. 2013(03)
[7]風(fēng)濕寧膠囊對(duì)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響[J]. 馬艷苗,王永輝,李艷彥,高麗,周然. 中醫(yī)雜志. 2013(04)
[8]臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)膠原誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎大鼠免疫相關(guān)易栓狀態(tài)的干預(yù)作用[J]. 林傳明,顧健,張育,沈連軍,馬莉,倪軍,汪中強(qiáng),吳蔚. 中華血液學(xué)雜志. 2012 (03)
[9]實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型建立及病理機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 宋珊珊,張玲玲,魏偉. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2011(12)
[10]昆明山海棠對(duì)CIA大鼠模型中HIF-1α表達(dá)的影響[J]. 白玲,陳森洲,梁爽,李莎莎,王雯. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2011(10)
本文編號(hào):3089407
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