研究背景與目的:尿路感染（Urinary tract infections,UTIs）是臨床上最常見(jiàn)的感染性疾病之一,多見(jiàn)于婦女、老年人和兒童。隨著耐藥菌株在全球的傳播,UTIs的治療成為臨床一項(xiàng)嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。雖然革蘭陽(yáng)性和革蘭陰性細(xì)菌均可引起UTIs,但95%的社區(qū)獲得性UTIs是由尿路致病性大腸埃希菌（Uropathogenic Escherichia coli,UPEC）引起的。藥敏試驗(yàn)表明,UPEC對(duì)常規(guī)抗生素的耐藥率非常高,甚至已突破最后一道防線（如多粘菌素）。因此,迫切需要開(kāi)發(fā)新型抗生素或方法來(lái)對(duì)抗UPEC。大多數(shù)常規(guī)抗生素影響細(xì)菌的生命結(jié)構(gòu)合成。例如,甲氧西林和萬(wàn)古霉素靶向細(xì)菌細(xì)胞壁合成,多粘菌素靶向細(xì)胞膜,喹諾酮類抑制細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中的關(guān)鍵酶。也有學(xué)者認(rèn)為,抑制細(xì)菌毒力而不是殺死病原體可能是治療細(xì)菌感染的另一種策略。多磷酸鹽激酶1（Polyphosphate kinase 1,PPK1）是多種細(xì)菌病原體中的一種重要激酶,負(fù)責(zé)多聚磷酸鹽（Polyphosphate,Poly P）合成并參與ATP代謝。研究表明,PPK1與細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性、生物膜形成、群體感應(yīng)和毒力因子的表達(dá)密切相... 

【文章來(lái)源】：廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

大腸埃希菌注：A：大腸埃希菌PPK1結(jié)構(gòu)示意圖

PPK1蛋白與化合物8/17結(jié)合的Biacore傳感圖

實(shí)驗(yàn)結(jié)果233.分子對(duì)接研究為了更好地了解化合物8和17與PPK1的相互作用，使用DiscoveryStudio進(jìn)行了分子對(duì)接研究。如圖4A所示，化合物8的最高得分姿勢(shì)顯示在分子的硝基和PPK1的氨基酸殘基Asn459/Asn461之間存在兩個(gè)氫鍵。預(yù)測(cè)到化合物8的硝基和PPK1的Asp407之間會(huì)產(chǎn)生有吸引力的電荷相互作用。另外，化合物8的苯并咪唑和苯環(huán)與PPK1側(cè)鏈的Arg375，Arg405，Tyr468和His592之間建立了疏水相互作用。而化合物17與PPK1的Trp14，Glu48，Arg53和Arg375建立了五個(gè)常規(guī)氫鍵。發(fā)現(xiàn)PPK1的Arg53通過(guò)兩個(gè)鹵素鍵與化合物17的三氟甲基相互作用。此外，在化合物17與PPK1側(cè)鏈的Trp14，Phe17，Arg375和Tyr468之間可以發(fā)現(xiàn)許多疏水相互作用（圖4B）。圖4PPK1蛋白與化合物8/17的分子對(duì)接圖注：A：化合物8與PPK1蛋白的分子對(duì)接圖；B：化合物17與PPK1蛋白的分子對(duì)接圖。4.化合物8和17對(duì)PPK1酶活性的影響為了研究化合物8和17是否可以影響PPK1的酶活性，在酶反應(yīng)體系中加入不同濃度的化合物8或17孵育，將不加化合物的酶反應(yīng)體系作為對(duì)照組，將加了DMSO的酶反應(yīng)體系作為溶劑對(duì)照組。結(jié)果如圖5所示，DMSO溶劑對(duì)照組的酶活性是對(duì)照組的（0.94±0.02）%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說(shuō)明DMSO對(duì)PPK1酶活性沒(méi)有明顯影響。與對(duì)照組相比，當(dāng)化合物8濃度為5μM、20μM、80μM、320μM時(shí)，酶活性分別是對(duì)照組的（0.71±0.04）%、（0.65±0.04）%、（0.64±0.04）%、（0.60±0.06）%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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