紫甘薯多糖的制備及結構初步分析
發(fā)布時間:2021-02-21 18:24
多糖具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、抗氧化、抗病毒、降血糖等多種生物活性與藥理作用,其作用機理通常與多糖的結構有著緊密的關系。由于多糖種類繁多,結構復雜,因此人們對多糖的結構、活性、構效關系方面還在進行著不斷的探索和研究。甘薯[Ipomoea batatas(L.)Lam.]是甘薯屬旋花科一年或多年生草本植物,《本草綱目》中記載,甘薯性平、味甘、無毒、益氣力、健脾胃、補虛乏、強腎陰。紫色甘薯作為甘薯中的一種特殊品種,是日本在20世紀90年代培育出的一種甘薯新品種,已有較廣泛的研究和應用。本文以紫甘薯為研究對象,通過提取分離純化得到紫甘薯多糖,并對其結構進行較為全面的解析,初步考察對不同腫瘤細胞增殖的抑制作用,為后續(xù)探究結構與生物活性的關系提供有力的依據(jù)。紫甘薯粗多糖提取條件為:液料比為20:1、提取溫度80℃、提取時間2小時、提取次數(shù)1次以及醇沉濃度75%,在此提取條件下獲得紫甘薯粗多糖,提取率為6.1%,多糖含量為45.61%。紫甘薯粗多糖進一步經(jīng)Sevag法脫蛋白、硅藻土吸附法除色素,得到了多糖含糖量為69.12%的紫甘薯多糖(PSPP)。PSPP經(jīng)纖維素DEAE-52層析柱純化,得到了兩種...
【文章來源】:哈爾濱商業(yè)大學黑龍江省
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
緒論
1.1 紫甘薯的研究現(xiàn)狀
1.1.1 紫甘薯概述
1.1.2 紫甘薯成分研究
1.1.3 紫甘薯的保健作用
1.2 多糖結構研究進展
1.2.1 多糖的概述
1.2.2 多糖的提取
1.2.3 多糖的分離純化
1.2.4 多糖初級結構分析
1.2.5 多糖高級結構分析
1.3 本課題來源及研究的目的意義
1.3.1 課題來源
1.3.2 本課題的研究目的及意義
1.4 本課題的研究內(nèi)容
2 紫甘薯多糖的提取、分離純化及理化性質
2.1 引言
2.2 實驗材料與儀器
2.2.1 實驗材料
2.2.2 主要儀器
2.2.3 主要試劑
2.3 實驗方法
2.3.1 紫甘薯粗多糖的制備
2.3.2 紫甘薯粗多糖蛋白含量測定
2.3.3 紫甘薯粗多糖除色素
2.3.4 紫甘薯粗多糖除蛋白
2.3.5 紫甘薯多糖紫外光譜掃描
2.3.6 紫甘薯粗多糖含量測定
2.3.7 DEAE-52 陰離子交換層析柱分離純化
2.3.8 Sephacryl S-300 凝膠層析柱分離純化
2.3.9 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa理化性質
2.4 實驗結果與分析
2.4.1 紫外光譜分析
2.4.2 紫甘薯多糖分離純化
2.4.3 多糖含量測定
2.4.4 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa的理化性質
2.5 本章小結
3 紫甘薯多糖的初級結構解析
3.1 引言
3.2 實驗材料與儀器
3.2.1 實驗材料
3.2.2 主要儀器
3.2.3 主要試劑
3.3 實驗方法
3.3.1 樣品的能譜分析
3.3.2 紅外光譜檢測
3.3.3 拉曼光譜檢測
3.3.4 純度分析及分子量測定
3.3.5 樣品的甲基化
3.3.6 核磁共振(NMR)分析
3.4 實驗結果分析
3.4.1 EDS圖譜分析
3.4.2 紅外光譜分析
3.4.3 拉曼光譜分析
3.4.4 純度及分子量測定結果
3.4.5 甲基化結果
3.4.6 核磁共振波譜分析
3.5 本章小結
4 紫甘薯多糖的高級結構解析
4.1 引言
4.2 實驗材料與儀器
4.2.1 實驗材料
4.2.2 主要儀器
4.2.3 主要試劑
4.3 實驗方法
4.3.1 剛果紅實驗
4.3.2 熱特性測定實驗
4.3.3 粒徑及電位測定實驗
4.3.4 X-射線衍射(XRD)測定實驗
4.3.5 圓二色譜(CD)掃描測定實驗
4.3.6 場發(fā)射掃描電鏡(FE-SEM)觀測
4.3.7 原子力顯微鏡(AFM)觀測
4.4 實驗結果與分析
4.4.1 剛果紅實驗結果
4.4.2 熱特性實驗結果
4.4.3 粒徑及電位實驗結果
4.4.4 X-射線衍射實驗結果
4.4.5 圓二色譜實驗結果
4.4.6 掃描電鏡實驗結果
4.4.7 原子力顯微鏡實驗結果
4.5 本章小結
5 紫甘薯多糖對腫瘤細胞的增殖的影響
5.1 引言
5.2 實驗部分
5.2.1 實驗儀器
5.2.2 實驗試劑
5.2.3 腫瘤細胞系
5.2.4 試劑配制
5.3 實驗方法
5.3.1 細胞培養(yǎng)
5.3.2 MTT法檢測細胞活力
5.4 實驗結果
5.4.1 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa對人乳腺癌MCF-7 細胞增殖的影響
5.4.2 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa對人胃癌SCG-7901 細胞增殖的影響
5.4.3 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa對人胃癌HCG-27 細胞增殖的影響
5.4.4 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa對人結腸癌LOVO細胞增殖的影響
5.4.5 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa對人肝癌HepG2 細胞增殖的影響
5.5 本章小結
6 討論
6.1 紫甘薯多糖的制備
6.2 紫甘薯多糖的初級結構鑒定
6.3 紫甘薯多糖的高級結構鑒定
6.4 紫甘薯多糖對腫瘤細胞增殖的影響
結論
參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]5種食用菌多糖的結構特征及抗氧化活性對比[J]. 商佳琦,鄒丹陽,滕翔宇,范榮,付玲,李雪晴,劉寧,邵美麗. 食品工業(yè)科技. 2020(15)
[2]藍靛果多糖功能特性、結構及抗糖基化活性[J]. 徐雅琴,劉檸月,李大龍,任耀宇,董曉彤,楊昱,王麗波. 食品科學. 2020(02)
[3]桑黃子實體多糖超聲波微波協(xié)同輔助提取及活性研究[J]. 應瑞峰,黃梅桂,王耀松,吳彩娥,李婷婷,范龔健. 食品研究與開發(fā). 2019(21)
[4]不同純化程度豌豆水溶性多糖的電鏡掃描分析[J]. 張淑杰,權威,姜宏偉,康玉凡. 農(nóng)業(yè)生物技術學報. 2019(10)
[5]甘薯多糖SPP-Ⅰ的制備與結構初步研究[J]. 汲晨鋒,張子依,陳錦瑞,王昊,綦崢,于蕾,劉日嘉,宋冬雪,劉斌. 哈爾濱商業(yè)大學學報(自然科學版). 2019(03)
[6]不同品種紫甘薯花色苷含量與組分分析[J]. 張毅,孔秀林,王洪云,孫健,朱紅,岳瑞雪,張文婷,鈕福祥. 江蘇師范大學學報(自然科學版). 2019(02)
[7]蒸汽爆破提取牛膝多糖工藝優(yōu)化及抗氧化性研究[J]. 易軍鵬,王賽,李欣,楊亞皇,趙鵬成,朱文學. 食品與機械. 2018(06)
[8]Box-Behnken響應面法優(yōu)化甘薯糖蛋白提取工藝[J]. 田璐,李凌燕,王偉青,汪長鋼,肖海峻,潘妍,金啟厚. 安徽農(nóng)業(yè)科學. 2018(04)
[9]甘薯在糧食供給結構優(yōu)化中的作用分析[J]. 楊園園,蘇文瑾,雷劍,王連軍,柴沙沙,沈興國,楊新筍. 湖北農(nóng)業(yè)科學. 2017(16)
[10]天花粉多糖的除蛋白工藝優(yōu)化研究[J]. 于丹,陳楠,張穎,孟凡佳,都曉偉. 化學工程師. 2017(06)
博士論文
[1]抗氧化活性茶多糖構效關系研究[D]. 艾于杰.華中農(nóng)業(yè)大學 2019
[2]人口結構變化對中國食物消費需求和進口的影響研究[D]. 李國景.中國農(nóng)業(yè)大學 2019
[3]黃柏花粉酸性多糖結構表征及對輻射誘導氧化應激的防護[D]. 王雪飛.哈爾濱工業(yè)大學 2018
[4]香加皮多糖提取純化及其在煙草中的保潤增香效應研究[D]. 王小莉.河南農(nóng)業(yè)大學 2018
[5]基于傅里葉變換紅外光譜的生物毒性測試方法及咪唑類離子液體毒性作用機制研究[D]. 胡立新.中國科學院大學(中國科學院廣州地球化學研究所) 2018
[6]南極海洋菌Pseudoaltermonas sp. S-5胞外多糖的結構與免疫活性研究[D]. 白云貴.山東大學 2012
[7]甘薯多糖分離純化及生物活性研究[D]. 田春宇.大連理工大學 2011
[8]微生物胞外多糖的結構及其抗氧化活性研究[D]. 郭守東.中國海洋大學 2010
碩士論文
[1]滇紫甘薯新品種在東川區(qū)的適應性評價[D]. 楊志剛.云南農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]綠豆皮可溶性膳食纖維的制備及其性質研究[D]. 王雅琪.河南科技大學 2017
[3]大豆皮多糖提取及干法接枝改性研究[D]. 王飛運.河南工業(yè)大學 2016
[4]金黃喇叭菌多糖的分離純化、結構分析及生物活性的研究[D]. 陳耀華.華南理工大學 2013
[5]紫甘薯花青素雙水相提取工藝及酒精性肝損傷預防效果研究[D]. 劉興麗.中國農(nóng)業(yè)科學院 2013
[6]桑椹色素提取工藝研究[D]. 王芳.陜西科技大學 2013
[7]番薯的引種與明清福建沿海社會(1594年~1911年)[D]. 歐陽春林.福建師范大學 2012
[8]水提紫甘薯色素廢渣減肥、通便保健功能評價及產(chǎn)品開發(fā)研究[D]. 楊解順.昆明醫(yī)學院 2011
[9]房縣小冬菇中香菇多糖的精制、結構鑒定和體外抗腫瘤活性研究[D]. 李石軍.華中科技大學 2011
[10]不同紫色甘薯品種的生長差異及其對增強UV-B輻射的響應[D]. 孫榮琴.云南農(nóng)業(yè)大學 2009
本文編號:3044741
【文章來源】:哈爾濱商業(yè)大學黑龍江省
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
緒論
1.1 紫甘薯的研究現(xiàn)狀
1.1.1 紫甘薯概述
1.1.2 紫甘薯成分研究
1.1.3 紫甘薯的保健作用
1.2 多糖結構研究進展
1.2.1 多糖的概述
1.2.2 多糖的提取
1.2.3 多糖的分離純化
1.2.4 多糖初級結構分析
1.2.5 多糖高級結構分析
1.3 本課題來源及研究的目的意義
1.3.1 課題來源
1.3.2 本課題的研究目的及意義
1.4 本課題的研究內(nèi)容
2 紫甘薯多糖的提取、分離純化及理化性質
2.1 引言
2.2 實驗材料與儀器
2.2.1 實驗材料
2.2.2 主要儀器
2.2.3 主要試劑
2.3 實驗方法
2.3.1 紫甘薯粗多糖的制備
2.3.2 紫甘薯粗多糖蛋白含量測定
2.3.3 紫甘薯粗多糖除色素
2.3.4 紫甘薯粗多糖除蛋白
2.3.5 紫甘薯多糖紫外光譜掃描
2.3.6 紫甘薯粗多糖含量測定
2.3.7 DEAE-52 陰離子交換層析柱分離純化
2.3.8 Sephacryl S-300 凝膠層析柱分離純化
2.3.9 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa理化性質
2.4 實驗結果與分析
2.4.1 紫外光譜分析
2.4.2 紫甘薯多糖分離純化
2.4.3 多糖含量測定
2.4.4 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa的理化性質
2.5 本章小結
3 紫甘薯多糖的初級結構解析
3.1 引言
3.2 實驗材料與儀器
3.2.1 實驗材料
3.2.2 主要儀器
3.2.3 主要試劑
3.3 實驗方法
3.3.1 樣品的能譜分析
3.3.2 紅外光譜檢測
3.3.3 拉曼光譜檢測
3.3.4 純度分析及分子量測定
3.3.5 樣品的甲基化
3.3.6 核磁共振(NMR)分析
3.4 實驗結果分析
3.4.1 EDS圖譜分析
3.4.2 紅外光譜分析
3.4.3 拉曼光譜分析
3.4.4 純度及分子量測定結果
3.4.5 甲基化結果
3.4.6 核磁共振波譜分析
3.5 本章小結
4 紫甘薯多糖的高級結構解析
4.1 引言
4.2 實驗材料與儀器
4.2.1 實驗材料
4.2.2 主要儀器
4.2.3 主要試劑
4.3 實驗方法
4.3.1 剛果紅實驗
4.3.2 熱特性測定實驗
4.3.3 粒徑及電位測定實驗
4.3.4 X-射線衍射(XRD)測定實驗
4.3.5 圓二色譜(CD)掃描測定實驗
4.3.6 場發(fā)射掃描電鏡(FE-SEM)觀測
4.3.7 原子力顯微鏡(AFM)觀測
4.4 實驗結果與分析
4.4.1 剛果紅實驗結果
4.4.2 熱特性實驗結果
4.4.3 粒徑及電位實驗結果
4.4.4 X-射線衍射實驗結果
4.4.5 圓二色譜實驗結果
4.4.6 掃描電鏡實驗結果
4.4.7 原子力顯微鏡實驗結果
4.5 本章小結
5 紫甘薯多糖對腫瘤細胞的增殖的影響
5.1 引言
5.2 實驗部分
5.2.1 實驗儀器
5.2.2 實驗試劑
5.2.3 腫瘤細胞系
5.2.4 試劑配制
5.3 實驗方法
5.3.1 細胞培養(yǎng)
5.3.2 MTT法檢測細胞活力
5.4 實驗結果
5.4.1 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa對人乳腺癌MCF-7 細胞增殖的影響
5.4.2 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa對人胃癌SCG-7901 細胞增殖的影響
5.4.3 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa對人胃癌HCG-27 細胞增殖的影響
5.4.4 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa對人結腸癌LOVO細胞增殖的影響
5.4.5 紫甘薯多糖PSPP-Ⅰa對人肝癌HepG2 細胞增殖的影響
5.5 本章小結
6 討論
6.1 紫甘薯多糖的制備
6.2 紫甘薯多糖的初級結構鑒定
6.3 紫甘薯多糖的高級結構鑒定
6.4 紫甘薯多糖對腫瘤細胞增殖的影響
結論
參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]5種食用菌多糖的結構特征及抗氧化活性對比[J]. 商佳琦,鄒丹陽,滕翔宇,范榮,付玲,李雪晴,劉寧,邵美麗. 食品工業(yè)科技. 2020(15)
[2]藍靛果多糖功能特性、結構及抗糖基化活性[J]. 徐雅琴,劉檸月,李大龍,任耀宇,董曉彤,楊昱,王麗波. 食品科學. 2020(02)
[3]桑黃子實體多糖超聲波微波協(xié)同輔助提取及活性研究[J]. 應瑞峰,黃梅桂,王耀松,吳彩娥,李婷婷,范龔健. 食品研究與開發(fā). 2019(21)
[4]不同純化程度豌豆水溶性多糖的電鏡掃描分析[J]. 張淑杰,權威,姜宏偉,康玉凡. 農(nóng)業(yè)生物技術學報. 2019(10)
[5]甘薯多糖SPP-Ⅰ的制備與結構初步研究[J]. 汲晨鋒,張子依,陳錦瑞,王昊,綦崢,于蕾,劉日嘉,宋冬雪,劉斌. 哈爾濱商業(yè)大學學報(自然科學版). 2019(03)
[6]不同品種紫甘薯花色苷含量與組分分析[J]. 張毅,孔秀林,王洪云,孫健,朱紅,岳瑞雪,張文婷,鈕福祥. 江蘇師范大學學報(自然科學版). 2019(02)
[7]蒸汽爆破提取牛膝多糖工藝優(yōu)化及抗氧化性研究[J]. 易軍鵬,王賽,李欣,楊亞皇,趙鵬成,朱文學. 食品與機械. 2018(06)
[8]Box-Behnken響應面法優(yōu)化甘薯糖蛋白提取工藝[J]. 田璐,李凌燕,王偉青,汪長鋼,肖海峻,潘妍,金啟厚. 安徽農(nóng)業(yè)科學. 2018(04)
[9]甘薯在糧食供給結構優(yōu)化中的作用分析[J]. 楊園園,蘇文瑾,雷劍,王連軍,柴沙沙,沈興國,楊新筍. 湖北農(nóng)業(yè)科學. 2017(16)
[10]天花粉多糖的除蛋白工藝優(yōu)化研究[J]. 于丹,陳楠,張穎,孟凡佳,都曉偉. 化學工程師. 2017(06)
博士論文
[1]抗氧化活性茶多糖構效關系研究[D]. 艾于杰.華中農(nóng)業(yè)大學 2019
[2]人口結構變化對中國食物消費需求和進口的影響研究[D]. 李國景.中國農(nóng)業(yè)大學 2019
[3]黃柏花粉酸性多糖結構表征及對輻射誘導氧化應激的防護[D]. 王雪飛.哈爾濱工業(yè)大學 2018
[4]香加皮多糖提取純化及其在煙草中的保潤增香效應研究[D]. 王小莉.河南農(nóng)業(yè)大學 2018
[5]基于傅里葉變換紅外光譜的生物毒性測試方法及咪唑類離子液體毒性作用機制研究[D]. 胡立新.中國科學院大學(中國科學院廣州地球化學研究所) 2018
[6]南極海洋菌Pseudoaltermonas sp. S-5胞外多糖的結構與免疫活性研究[D]. 白云貴.山東大學 2012
[7]甘薯多糖分離純化及生物活性研究[D]. 田春宇.大連理工大學 2011
[8]微生物胞外多糖的結構及其抗氧化活性研究[D]. 郭守東.中國海洋大學 2010
碩士論文
[1]滇紫甘薯新品種在東川區(qū)的適應性評價[D]. 楊志剛.云南農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]綠豆皮可溶性膳食纖維的制備及其性質研究[D]. 王雅琪.河南科技大學 2017
[3]大豆皮多糖提取及干法接枝改性研究[D]. 王飛運.河南工業(yè)大學 2016
[4]金黃喇叭菌多糖的分離純化、結構分析及生物活性的研究[D]. 陳耀華.華南理工大學 2013
[5]紫甘薯花青素雙水相提取工藝及酒精性肝損傷預防效果研究[D]. 劉興麗.中國農(nóng)業(yè)科學院 2013
[6]桑椹色素提取工藝研究[D]. 王芳.陜西科技大學 2013
[7]番薯的引種與明清福建沿海社會(1594年~1911年)[D]. 歐陽春林.福建師范大學 2012
[8]水提紫甘薯色素廢渣減肥、通便保健功能評價及產(chǎn)品開發(fā)研究[D]. 楊解順.昆明醫(yī)學院 2011
[9]房縣小冬菇中香菇多糖的精制、結構鑒定和體外抗腫瘤活性研究[D]. 李石軍.華中科技大學 2011
[10]不同紫色甘薯品種的生長差異及其對增強UV-B輻射的響應[D]. 孫榮琴.云南農(nóng)業(yè)大學 2009
本文編號:3044741
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