目的:據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計,在1975年至2016年期間,全世界的肥胖率幾乎增加了兩倍,同時伴隨著肥胖婦女不孕率和流產(chǎn)風(fēng)險的顯著增加。在妊娠早期,胚胎著床后子宮內(nèi)膜發(fā)生蛻膜樣改變（小鼠孕D5天囊胚粘附并侵入子宮內(nèi)膜,子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞隨即廣泛地增殖和分化,發(fā)生蛻膜化樣改變,孕D6、D7天形成蛻膜區(qū)）。這一過程是確保胎盤正常形成的重要基礎(chǔ),在胎盤形成以前擔(dān)負(fù)著保護和營養(yǎng)胚胎的重要作用,對妊娠的建立和維持至關(guān)重要。盡管目前的研究發(fā)現(xiàn)肥胖可能與子宮內(nèi)膜蛻膜化損傷有關(guān),但是肥胖是否導(dǎo)致孕期子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞蛻膜化異常及其具體機制尚不明確。因此,本課題擬通過一系列動物和細(xì)胞模型,探討高脂飲食所誘導(dǎo)的母體孕前肥胖是否可引起子宮內(nèi)膜蛻膜化異常,并進一步從脂代謝的角度探究其可能機制。方法:1.實驗?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建及材料收集:1)高脂肥胖小鼠模型的建立:4周齡C57BL/6J雌鼠喂養(yǎng)高脂飼料（60%kcal）/對照飼料（10%kcal）12周,每周記錄小鼠體重數(shù)據(jù)。繪制12周體重增長曲線,雙能X射線吸收法檢測小鼠體脂成分,全自動生化分析儀檢測小鼠空腹血甘油三酯（TG）和總膽固醇的水平,ELISA檢測小鼠空腹胰島素的... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

高脂誘導(dǎo)的肥胖小鼠模型構(gòu)建成功C57BL/6J雌鼠在喂養(yǎng)12周后，觀察HFD和Control小鼠的代謝參數(shù)（A-J）

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文30（圖3C，D）、蛻膜化標(biāo)志分子MMP2的表達(dá)顯著減少（圖3F）。圖3.高脂抑制體內(nèi)人工誘導(dǎo)蛻膜化和體外mESCs誘導(dǎo)蛻膜化過程觀察HFD和Control假孕小鼠體內(nèi)人工誘導(dǎo)蛻膜化手術(shù)后的子宮形態(tài)（A），并統(tǒng)計其誘導(dǎo)側(cè)（S）/非誘導(dǎo)側(cè)（US）的重量比變化（B）;Westernblot檢測小鼠子宮內(nèi)膜BMP2、PCNA等蛻膜化相關(guān)標(biāo)志分子的表達(dá)水平（E）；觀察mESCs在體外誘導(dǎo)蛻膜化后的生長狀態(tài)（C）;鬼筆環(huán)肽染色（G-ACTIN）觀察mESCs在體外誘導(dǎo)后的蛻膜化水平（D）；Westernblot檢測細(xì)

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文32圖4.HFD導(dǎo)致早孕小鼠子宮內(nèi)膜的線粒體功能損傷透射電鏡（TEM）觀察孕鼠D6天子宮內(nèi)膜的線粒體形態(tài)（紅色箭頭所指是腫脹的線粒體）（A）;GC-MS檢測孕鼠D7子宮蛻膜組織中的ATP水平（B）;Mitotracker探針檢測體外培養(yǎng)蛻膜細(xì)胞的線粒體跨膜電位（△Ψm）（Ca）及其統(tǒng)計分析結(jié)果（Cb）;RT-PCR檢測孕鼠D7天子宮內(nèi)膜的OXPHOS水平（D）。*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。Figure4.HFDleadstoabnormalmitochondrialfunctionofendometriuminearlypregnantmice.WeusedtransmissionelectronmicroscopytoobservethemitochondrialmorphologyoftheendometriumondayD6ofpregnantmice(thearrowreferstotheswollenmitochondria)(A);ATPlevelsindecidualtissueofD6weredetectedbyGC-MS(B);Mitotrackerprobewasusedtodetectmitochondrialmembranepotential(Ca)indecidualcellsanditsresultswerestatisticallyanalyzed(Cb);RT-PCRwasusedtodetectthelevelofOXPHOSontheendometriumofdayD7ofpregnantmice(D).Alldataareexpressedasmean±SEM.*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001.3.5高脂早孕小鼠子宮內(nèi)膜脂代謝紊亂

【參考文獻】：
期刊論文
[1]AMPK/mTOR信號通路的研究進展[J]. 張新穎,毛景東,楊曉燕,李樹森,杜立銀.  微生物學(xué)雜志. 2019(03)



本文編號：3039366