目的:研究小干擾RNA（siRNA）誘導(dǎo)的自噬相關(guān)基因7（ATG7）沉默對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞順鉑（DDP）化療敏感性的影響。方法:1.MTT法選取順鉑作用于卵巢癌SKOV3細(xì)胞系的條件。2.活性氧（ROS）檢測(cè)試劑盒檢測(cè)應(yīng)用不同濃度順鉑時(shí)卵巢癌SKOV3細(xì)胞系產(chǎn)生的活性氧水平。3.Western blot檢測(cè)應(yīng)用不同濃度順鉑時(shí)卵巢癌SKOV3細(xì)胞系自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、P62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和ATG7的表達(dá)水平。4.應(yīng)用siRNA技術(shù)使卵巢癌SKOV3細(xì)胞系中ATG7基因沉默,Western blot檢測(cè)siRNA對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞系中ATG7基因的干擾效果。5.MTT法檢測(cè)siRNA-ATG7干擾前后順鉑對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞系存活率的影響。6.Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)siRNA-ATG7干擾前后順鉑對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞系凋亡率的影響。7.線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒（JC-1）檢測(cè)siRNA-ATG7干擾前后順鉑對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞系早期凋亡的影響。8.應(yīng)用倒置顯微鏡觀察siRNA-ATG7干擾前后順鉑誘導(dǎo)的卵巢癌SKOV3細(xì)胞系細(xì)胞形態(tài)的變... 

【文章來源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

順鉑對(duì)SKOV3細(xì)胞的增殖的抑制情況

順鉑處理后SKOV3細(xì)胞內(nèi)活性氧水平

Fig.2 Levels of Intracellular reactive oxygen species in SKOV3 cells treated with cisplatin 3.順鉑上調(diào)人卵巢癌 SKOV3 細(xì)胞系自噬水平 用 Western blot 檢測(cè)人卵巢癌 SKOV3 細(xì)胞經(jīng)順鉑處理后，自噬相關(guān)蛋白 BecIin-1，P62 和 ATG7 的表達(dá)水平。如圖 3 所示，隨著順鉑濃度的增加，Beclin-1 和 ATG7 蛋白的表達(dá)水平逐漸升高，而 P62 蛋白的表達(dá)水平逐漸降低，LC3-Ⅱ/Ⅰ比值增加，表明自噬水平隨著順鉑濃度的增加而增強(qiáng)。結(jié)果表明順鉑可以上調(diào)人卵巢癌 SKOV3 細(xì)胞系自噬水平。


本文編號(hào)：2963994