環(huán)境污染物、偶然的化學接觸以及電離和紫外線輻射都可以直接或間接增加細胞內(nèi)活性氧（ROS）的水平,作為氣體交換的重要器官,肺常常受到ROS的攻擊。ROS會加速肺的纖維化進程,也可以促進肺癌細胞的遷移能力,但ROS參與肺纖維化和肺癌細胞遷移的具體機制有待深入研究。其中,上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）在肺纖維化過程中具有重要的作用。過量的ROS會引起DNA的氧化損傷。因此,對DNA損傷修復產(chǎn)物8-氧鳥嘌呤（8-oxoG）與肺EMT關(guān)系的研究十分必要;另外,肺癌細胞遷移是造成肺癌病人死亡的主要原因。趨化因子SDF-1與其特異性受體CXCR4和ACKR3參與腫瘤細胞向靶器官的遷移和侵襲。然而,在肺癌細胞遷移過程中ROS與CXCR4和ACKR3的關(guān)系尚不明確。因此,本論文重點研究了:（1）8-oxoG與肺支氣管上皮細胞發(fā)生EMT的關(guān)系;（2）ROS對肺腺癌細胞遷移能力、CXCR4和ACKR3的影響。一方面,通過免疫熒光技術(shù)和實時熒光定量PCR檢測了8-oxoG對肺支氣管上皮細胞形態(tài)的影響和EMT標志基因的影響;隨后,向小鼠氣管灌注GOx或者8-oxoG,觀察了對肺組織顯微結(jié)構(gòu)的影響;另一方面,通過Tran... 

【文章來源】：山西大學山西省

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

EMT示意圖

活性氧促進肺支氣管細胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和肺腺癌細胞遷移的機制研究8圖1.3SDF-1/CXCR4信號通路模式圖（YujunTang，2019）Figure1.3SDF-1/CXCR4signalpathpattern(YujunTang,2019)一些實驗研究表明，離體或體內(nèi)阻斷CXCR4與SDF-1的相互作用可抑制NSCLC細胞的生長、遷移、血管生成和轉(zhuǎn)移，提高癌細胞對化療的敏感性[113]。表達CXCR4的肺癌細胞可遷移到高水平表達SDF-1的組織或器官，包括淋巴結(jié)、對側(cè)肺、肝和

活性氧促進肺支氣管細胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和肺腺癌細胞遷移的機制研究16圖2.18-oxoG誘導HBEC細胞形態(tài)變化Figure2.18-oxoG-inducedmorphologicalchangesinHBECcells2.28-oxoG對BEAS-2B細胞中EMT標志基因mRNA表達量的影響為了研究8-oxoG對BEAS-2B細胞EMT相關(guān)標志基因mRNA表達量的影響，利用實時熒光定量PCR檢測8-oxoG刺激BEAS-2B細胞0、1、3、6、12和24h后EMT相關(guān)標志基因的mRNA表達量，結(jié)果如圖2.3所示。與對照組相比，α-SMA（圖2.2A）在3，12和24h的mRNA表達量顯著升高（*p<0.05），與EMT的發(fā)生相符；SNAI1（圖2.2B）在1和3h的mRNA表達量顯著升高（*p<0.05），這可能與SNAI1調(diào)控應激性基因的表達有關(guān)，這提示我們，由SNAI1調(diào)控的靶基因可能會隨之升高或者降低其表達量，而SNAI1作為上游調(diào)控基因會抑制E-cadherin的轉(zhuǎn)錄；E-cadherin（圖2.2C）在12h的mRNA表達量顯著升高（*p<0.05），其余時間無顯著性，這似乎與EMT的變化不符，可能是E-cadherin需要基因的應激性反應有關(guān)，不排除需要更長的時間才會表現(xiàn)出下降的可能性；雖然β-catenin（圖2.2D）的mRNA表達量在各時間點無顯著變化，但推測是β-catenin在細胞中表達位置發(fā)生改變，由細胞質(zhì)進入細胞核；collagenI（圖2.2E）在6和24h的mRNA表達量顯著升高（*p<0.05），這可能與其作為膠原蛋白需要上調(diào)表達量以合成膠原纖維促進EMT進程有關(guān)；FSP1（圖2.2F）在1、3、6和12h的mRNA表達量顯著升高（*p<0.05），這可能有其是成纖維細胞特異性的蛋白有關(guān)，表達量上調(diào)后進行轉(zhuǎn)錄翻譯促進EMT進程。這些基因的變化情況提示我們EMT的發(fā)生需要一定的時間，上皮細胞標志基因表達量下降受上游基因調(diào)控需要一定的反應時間，而且可能是與間質(zhì)細胞標志基因表達量上升


本文編號：2946023