目的:研究熱療（Hyperthermia,HT）聯(lián)合順鉑（Cisplatin,DDP）對體外培養(yǎng)的人胃癌耐藥細胞株SGC-7901/DDP增殖的影響,并探討其可能的分子機制。為熱療聯(lián)合順鉑在胃癌耐藥患者體內(nèi)的研究和臨床治療提供依據(jù)。方法:在體外對人胃癌耐藥細胞株SGC-7901/DDP進行常規(guī)培養(yǎng),分為對照組、順鉑組、熱療組與熱療聯(lián)合順鉑組。采用相差顯微鏡觀察該細胞株分別在41℃、44℃、47℃及50℃下培養(yǎng)12 h、24 h、36 h后的細胞形態(tài);MTT實驗檢測SGC-7901/DDP在不同時間和溫度下的增殖情況,41℃、44℃、47℃與1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml順鉑在最適熱療時間下聯(lián)合作用后的增殖情況;Annexin V-FITC/PI雙染法檢測對照組、順鉑組（2μg/ml）、熱療組（47℃）及熱療聯(lián)合順鉑組（47℃和2μg/ml）SGC-7901/DDP細胞在最適熱療時間下的早期凋亡情況。采用高通量芯片技術(shù)檢測對照組、順鉑組及熱療聯(lián)合順鉑組細胞中的mRNA表達譜、lncRNA表達譜變化;通過實時熒光定量聚合酶鏈式反應驗證熱療聯(lián)合順鉑組比對照組中TCONS_0... 

【文章來源】：甘肅中醫(yī)藥大學甘肅省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

熱療溫度和熱療時間梯度下SGC-7901/DDP細胞的形態(tài)

基于細胞形態(tài)觀察結(jié)果，我們通過 MTT 實驗做進一步驗證。MTT 實驗結(jié)果顯示，細胞增殖抑制率隨熱療溫度增加及熱療時間的延長不斷升高，見圖 2，44℃熱療 36 h 后抑制率達到 24.74％，可見細胞在 41℃與 44℃條件下受抑制情況不明顯；當熱療溫度達到 47℃時，8.91％、55.75％與 67.40％分別為作用 12 h、24 h、36 h 后的細胞增殖抑制率，細胞明顯受到抑制。熱療溫度 50℃時，細胞增殖抑制率依次為 29.35％、83.51％與92.21％，見表 1。MTT 實驗結(jié)果與細胞形態(tài)變化基本一致�；跓岑熉�(lián)合順鉑的處理方式，干預 36h 后細胞生長過密，導致除干預因素外的抑制因素，結(jié)合圖 2 的結(jié)果，將選用 24 h 作為下文熱療與順鉑聯(lián)合作用的培養(yǎng)時間。

熱療聯(lián)合順鉑抑制人胃癌耐藥細胞SGC-7901/DDP增殖及其分子機制的研究253.4HT聯(lián)合DDP影響SGC-7901/DDP細胞早期凋亡基于上述培養(yǎng)條件，SGC-7901/DDP細胞經(jīng)過不同干預后的凋亡情況見圖4。本次檢測結(jié)果是根據(jù)特定門控內(nèi)的細胞比例而獲得細胞在不同凋亡時期的凋亡細胞比例。結(jié)果表明，順鉑與熱療分別誘導3.30％與9.01％的SGC-7901/DDP細胞早期凋亡。相比熱療組，熱療聯(lián)合順鉑組細胞的早期凋亡率增加了1.8倍（16.5％），見圖5。可見，順鉑對細胞的早期凋亡無明顯誘導作用，而熱療聯(lián)合順鉑可以使細胞的早期凋亡率增加。熱療增強了順鉑干預SGC-7901/DDP細胞的敏感性。圖4對照組、順鉑組、熱療組、熱療聯(lián)合順鉑組細胞凋亡率改變


本文編號：2919280