目的:研究熱療（Hyperthermia,HT）聯(lián)合順鉑（Cisplatin,DDP）對體外培養(yǎng)的人胃癌耐藥細(xì)胞株SGC-7901/DDP增殖的影響,并探討其可能的分子機(jī)制。為熱療聯(lián)合順鉑在胃癌耐藥患者體內(nèi)的研究和臨床治療提供依據(jù)。方法:在體外對人胃癌耐藥細(xì)胞株SGC-7901/DDP進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng),分為對照組、順鉑組、熱療組與熱療聯(lián)合順鉑組。采用相差顯微鏡觀察該細(xì)胞株分別在41℃、44℃、47℃及50℃下培養(yǎng)12 h、24 h、36 h后的細(xì)胞形態(tài);MTT實(shí)驗(yàn)檢測SGC-7901/DDP在不同時(shí)間和溫度下的增殖情況,41℃、44℃、47℃與1μg/ml、2μg/ml、3μg/ml順鉑在最適熱療時(shí)間下聯(lián)合作用后的增殖情況;Annexin V-FITC/PI雙染法檢測對照組、順鉑組（2μg/ml）、熱療組（47℃）及熱療聯(lián)合順鉑組（47℃和2μg/ml）SGC-7901/DDP細(xì)胞在最適熱療時(shí)間下的早期凋亡情況。采用高通量芯片技術(shù)檢測對照組、順鉑組及熱療聯(lián)合順鉑組細(xì)胞中的mRNA表達(dá)譜、lncRNA表達(dá)譜變化;通過實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)驗(yàn)證熱療聯(lián)合順鉑組比對照組中TCONS_0... 

【文章來源】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

熱療溫度和熱療時(shí)間梯度下SGC-7901/DDP細(xì)胞的形態(tài)

基于細(xì)胞形態(tài)觀察結(jié)果，我們通過 MTT 實(shí)驗(yàn)做進(jìn)一步驗(yàn)證。MTT 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，細(xì)胞增殖抑制率隨熱療溫度增加及熱療時(shí)間的延長不斷升高，見圖 2，44℃熱療 36 h 后抑制率達(dá)到 24.74％，可見細(xì)胞在 41℃與 44℃條件下受抑制情況不明顯；當(dāng)熱療溫度達(dá)到 47℃時(shí)，8.91％、55.75％與 67.40％分別為作用 12 h、24 h、36 h 后的細(xì)胞增殖抑制率，細(xì)胞明顯受到抑制。熱療溫度 50℃時(shí)，細(xì)胞增殖抑制率依次為 29.35％、83.51％與92.21％，見表 1。MTT 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與細(xì)胞形態(tài)變化基本一致�；跓岑熉�(lián)合順鉑的處理方式，干預(yù) 36h 后細(xì)胞生長過密，導(dǎo)致除干預(yù)因素外的抑制因素，結(jié)合圖 2 的結(jié)果，將選用 24 h 作為下文熱療與順鉑聯(lián)合作用的培養(yǎng)時(shí)間。

熱療聯(lián)合順鉑抑制人胃癌耐藥細(xì)胞SGC-7901/DDP增殖及其分子機(jī)制的研究253.4HT聯(lián)合DDP影響SGC-7901/DDP細(xì)胞早期凋亡基于上述培養(yǎng)條件，SGC-7901/DDP細(xì)胞經(jīng)過不同干預(yù)后的凋亡情況見圖4。本次檢測結(jié)果是根據(jù)特定門控內(nèi)的細(xì)胞比例而獲得細(xì)胞在不同凋亡時(shí)期的凋亡細(xì)胞比例。結(jié)果表明，順鉑與熱療分別誘導(dǎo)3.30％與9.01％的SGC-7901/DDP細(xì)胞早期凋亡。相比熱療組，熱療聯(lián)合順鉑組細(xì)胞的早期凋亡率增加了1.8倍（16.5％），見圖5�？梢�，順鉑對細(xì)胞的早期凋亡無明顯誘導(dǎo)作用，而熱療聯(lián)合順鉑可以使細(xì)胞的早期凋亡率增加。熱療增強(qiáng)了順鉑干預(yù)SGC-7901/DDP細(xì)胞的敏感性。圖4對照組、順鉑組、熱療組、熱療聯(lián)合順鉑組細(xì)胞凋亡率改變


本文編號(hào)：2919280