本文關(guān)鍵詞：通絡(luò)治痹湯對兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)軟骨及血清IL-1β、TNF-α含量影響的實驗研究　出處：《南京中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:通過對兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型的動物實驗研究,證實"通絡(luò)治痹湯"對于KOA的治療效果及其對KOA的作用機制,為臨床應(yīng)用通絡(luò)治痹湯治療膝骨關(guān)節(jié)炎提供數(shù)據(jù)支持。方法:選取40只健康新西蘭兔,隨機分為通絡(luò)治痹湯組、藤黃健骨丸組、模型組、空白組,每組10只。除空白組外,其余各組采用改良Hulth法制備兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型后,通絡(luò)治痹湯組以通絡(luò)治痹湯顆粒沖劑灌胃,藤黃健骨丸組以藤黃健骨丸溶解液灌胃,空白組、模型組以生理鹽水灌胃,中藥劑量的確定按陳奇《中藥藥理研究方法學(xué)(第二版)》中的方法,藥物組分劑量按成人臨床日用量5倍給藥,以成人體重以60 kg為標準,兔每日每公斤體重劑量為:(120ml/60kg)×兔體重(kg)計算。每天1次,持續(xù)灌胃8周。8周后于實驗動物取材,標本處理后采用HE染色后光鏡下觀察軟骨細胞結(jié)構(gòu)及形態(tài)的變化,并行軟骨Mankin's評分。對于血清用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)檢測血清中IL-1β、TNF-α含量的變化。結(jié)果:1.空白組關(guān)節(jié)軟骨表面及關(guān)節(jié)邊緣光整,顏色鮮活,無骨贅增生及軟骨損壞;光鏡下軟骨細胞排列整齊,四層結(jié)構(gòu)明顯。模型組關(guān)節(jié)軟骨損壞明顯,軟骨色澤變白,局部可見片狀軟骨脫落,關(guān)節(jié)邊緣骨贅增生明顯;光鏡下軟骨細胞減少,有細胞簇集現(xiàn)象,潮線紊亂消失。而通絡(luò)治痹湯組與藤黃組無明顯差別,軟骨破壞程度及光鏡下層次結(jié)構(gòu)較模型組優(yōu),比空白組差。2.軟骨Mankin's評分結(jié)果:通絡(luò)治痹湯組及藤黃健骨丸組的評分積分明顯低于模型組(P0.05);通絡(luò)治痹湯組、藤黃健骨丸組及模型組與空白組比較,前三者評分積分高(P0.05)。3.ELISA法檢測:①IL-1β含量:通絡(luò)治痹湯組及藤黃健骨丸組血清中IL-1β含量明顯低于模型組(*P0.05);通絡(luò)治痹湯組、藤黃健骨丸組及模型組高于空白對照組(#P0.05)。②TNF-α含量:模型組血清TNF-α含量明顯高于通絡(luò)治痹湯組、藤黃健骨丸組及空白對照組(*P0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義;其中通絡(luò)治痹湯組及藤黃健骨丸組血清TNF-α含量高于空白對照組(#P0.05)。結(jié)論:1.改良Hulth法能成功模擬膝骨關(guān)節(jié)炎模型。2.炎性因子IL-1β及TNF-α通過誘導(dǎo)關(guān)節(jié)軟骨細胞的損害而致膝骨關(guān)節(jié)炎發(fā)病。3.通絡(luò)治痹湯能顯著降低兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型血清IL-1β及TNF-α含量,通過抑制IL-1β和TNF-α含量,延緩KOA病情進展,發(fā)揮其對KOA的治療作用。
[Abstract]:Objective: to confirm the therapeutic effect of Tongluo Zhibi decoction on KOA and the mechanism of its effect on KOA by experimental study on rabbit knee osteoarthritis model. Methods: 40 healthy New Zealand rabbits were randomly divided into Tongluo Zhibi decoction group, Fuhuang Jiangu pill group, model group and blank group. Except the blank group, the other groups were treated with modified Hulth method to establish rabbit knee osteoarthritis model, Tongluo Zhibi decoction group was treated with Tongluo Zhibi decoction granule. Lianghuang Jiangu pills group was treated with the dissolving liquid of Fuhuang Jiangu pill, the blank group and the model group were perfused with normal saline. The dosage of traditional Chinese medicine was determined according to Chen Qi's method of Pharmacological Research of traditional Chinese Medicine (second Edition). The drug component dose was given 5 times as much as the clinical daily dose of adults, and the adult body weight was 60 kg. The weight dose per kilogram of rabbits was 120 ml / 60 kg / day 脳 1 / kg / kg / kg / day. Once a day for 8 weeks, the samples were taken from the experimental animals. The structure and morphology of chondrocytes were observed by HE staining under light microscope. The IL-1 尾 in serum was detected by Elisa (enzyme linked immunosorbent assay (Elisa)). The change of TNF- 偽 content. Results: 1. In the blank group, the articular cartilage surface and articular edge were smooth, fresh color, no osteophyte proliferation and cartilage damage; Under the light microscope, the chondrocytes were arranged neatly and the four-layer structure was obvious. In the model group, the articular cartilage was damaged obviously, the cartilage color became white, the flake cartilage fell off, and the osteophyte proliferation on the edge of the joint was obvious. Under light microscope, there were fewer chondrocytes, cell cluster, and tidal line disorder disappeared. There was no significant difference between Tongluozhubi decoction group and Fuyangyangyanggroup. The degree of cartilage destruction and the hierarchical structure under light microscope were better than that in the model group. Compared with blank group, the Mankin's score of cartilage: the score of Tongluo Zhibi decoction group and Fuhuang Jiangu pill group was significantly lower than that of model group (P 0.05). Tongluo Zhibi decoction group, Fuhuang Jiangu pill group and model group were compared with the blank group. The content of IL-1 尾 in serum of Tongluo Zhibi decoction group and Fuhuangjianggu pill group was significantly lower than that of model group (3.) the content of IL-1 尾 in serum of Tongluo Zhibi decoction group and Fuhuang Jiangu pill group was significantly lower than that of model group (. P0.05; The content of TNF- 偽 in Tongluo Zhibi decoction group, Fuhuang Jiangu pill group and model group was higher than that in the blank control group. The serum TNF- 偽 content in model group was significantly higher than that in Tongluozhi decoction group. The difference was statistically significant between the Fuhuang Jiangu pill group and the blank control group. The serum TNF- 偽 content in Tongluo Zhibi decoction group and Fuhuang Jiangu pill group was higher than that in the blank control group (#P0.05). ... conclusion:. 1. The modified Hulth method can successfully simulate the knee osteoarthritis model .2.The inflammatory factors IL-1 尾 and TNF- 偽 can induce the damage of articular chondrocytes and induce the pathogenesis of knee osteoarthritis. 3. Tongluo Zhibi decoction. The serum levels of IL-1 尾 and TNF- 偽 were significantly decreased in rabbit knee osteoarthritis model. By inhibiting the contents of IL-1 尾 and TNF- 偽, the progression of KOA was delayed and its therapeutic effect on KOA was given full play.
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5;R-332

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本文編號：1386483