人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)腦缺血大鼠外周血Foxp3基因表達(dá)的影響
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【摘要】:目的通過(guò)觀(guān)察人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCB-MSCs)靜脈移植對(duì)腦梗死大鼠外周血Foxp3基因表達(dá)的影響,探討hUCB-MSCs改善缺血性腦損傷的可能機(jī)制。方法選擇雄性健康SD大鼠100只,隨機(jī)分為四組(1)假手術(shù)組(n=10)、(2)模型組(n=30)、(3)生理鹽水組(n=30)、(4)hUCB-MSCs組(n=30)。假手術(shù)組大鼠,分離右側(cè)頸總、頸內(nèi)及頸外動(dòng)脈,不切開(kāi)血管,不插入線(xiàn)栓,其余3組制均制作大鼠大腦中動(dòng)脈缺血模型(MCAO)。各組大鼠分別取10只,分別以熒光RT-PCR法測(cè)定術(shù)后1、7、14、28 d外周血單個(gè)核細(xì)胞中Foxp3 mRNA表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定外周血CD4+T細(xì)胞中CD4+CD25+Foxp3Tregs細(xì)胞的百分含量,改良mNSS評(píng)分法測(cè)定神經(jīng)功能缺損,TUNEL法檢測(cè)腦缺血周邊區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)。采用熒光定量PCR法測(cè)定大鼠術(shù)后1、7、14、28 d腦組織中IL-10與TNF-α的表達(dá)量。結(jié)果1)hUCB-MSCs組14、28 d神經(jīng)功能缺損評(píng)分明顯低于模型組及生理鹽水組(P0.05);2)hUCB-MSCs組28 d凋亡細(xì)胞數(shù)明顯少于模型組及生理鹽水組(P0.05)。3)模型組、生理鹽水組及hUCB-MSCs組1、7、14、28 d外周血Foxp3 mRNA表達(dá)明顯高于假手術(shù)組(P0.01)。hUCB-MSCs組1、7 d外周血Foxp3 mRNA表達(dá)明顯高于模型組和生理鹽水組(P0.05)。4)hUCB-MSCs組7、14d時(shí)IL-10的表達(dá)量明顯高于生理鹽水組及模型組(P0.05),hUCB-MSCs組7、14d時(shí)TNF-α的表達(dá)量明顯低于生理鹽水組及模型組(P0.05)。5)模型及生理鹽水組與假手術(shù)組比較,在缺血再灌注后14、28d時(shí)CD4+CD25+Treg細(xì)胞比例明顯升高,(P0.05);hUCB-MSCs組在缺血再灌注后7、14、28d時(shí)CD4+CD25+Foxp3Tregs細(xì)胞較假手術(shù)組百分含量明顯升高,(P0.05);與hUCB-MSCs組比較,模型組及生理鹽水組7、14、28d時(shí)CD4+CD25+Foxp3Tregs細(xì)胞比例明顯偏低(P0.05,)。結(jié)論hUCB-MSCs移植改善大鼠缺血性腦損害的機(jī)制可能與上調(diào)免疫炎性反應(yīng)初期Foxp3 mRNA表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R743.3
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1287070
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