本論文旨在發(fā)掘斑馬魚體內類似于哺乳動物cd34家族基因的同源基因,克隆并檢測其發(fā)育時序、制作相應的抗血清。在NCBI數(shù)據(jù)庫和Ensembl數(shù)據(jù)庫中存在預測為斑馬魚podxl的基因,該基因屬于cd34基因家族成員,但尚未在該數(shù)據(jù)庫中發(fā)現(xiàn)標注為斑馬魚cd34和podxl2這兩個cd34基因家族其他成員的基因存在。我們通過對哺乳動物cd34和podxl2基因的共線性分析和初步的同源性分析,在Ensembl數(shù)據(jù)庫中獲得了斑馬魚cd34兩個直系同源基因序列(si:ch211-286o17.1和si:dkey-261h17.1)和podxl2同源基因(ZGC:171566),我們將cd34同源基因分別命名為cd34l1和cd34l2。關于cd34l1和cd34l2在斑馬魚體內發(fā)育時序表達以及發(fā)揮的功能尚未知曉,為了逐步解決這些問題,本文以模式生物斑馬魚為研究對象,采用RACE的方法克隆cd34l1、cd34l2、podxl和podxl2的cDNA序列并對其進行生物信息學分析。采用半定量RT-PCR檢測了斑馬魚cd34家族的發(fā)育時序表達情況,對于cd34l1和cd34l2在斑馬魚早期發(fā)育時序表達情況...

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【學位級別】：碩士

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圖1.1cd34、podxl和podxl2基因組結構示意圖[21]

斑馬魚cd34家族成員cDNA克壟發(fā)育時序分析及CD34多克隆抗血清制備2域和糖胺聚糖鏈，將其基因命名為endoglycan。Northernblot分析人（Homosapiens）胰腺、腎臟、肌肉、肝臟、心臟、骨髓、PBL、胸腺、淋巴結和脾臟中均能夠檢測到endoglycan的....

圖1.2人和小鼠CD34家族進化樹（鄰接法，自舉檢驗1000次）

第一章綜述3圖1.2人和小鼠CD34家族進化樹（鄰接法，自舉檢驗1000次）Fig1.2PhylogenetictreeofhumanandmouseCD34family(Neighbour-joining,bootstrapped1000)1.4.1CD34結構CD34mRNA....

圖1.3斑馬魚造血發(fā)育[51]

第一章綜述9兩個階段，分別為初級造血和次級造血，如圖1.3所示[51]。圖1.3斑馬魚造血發(fā)育[51]A：造血作用首先發(fā)生在ICM中，然后發(fā)生在AGM區(qū)和CHT中。之后在腎臟和胸腺中也發(fā)現(xiàn)造血細胞。原位雜交30hpf的gata-1（ICM），36hpf的c-myb（AGM），第4....

圖2.2斑馬魚、人和小鼠cd34、podxl和podxl2基因結構圖

斑馬魚cd34家族成員cDNA克壟發(fā)育時序分析及CD34多克隆抗血清制備28ABC圖2.2斑馬魚、人和小鼠cd34、podxl和podxl2基因結構圖A：斑馬魚、人和小鼠cd34基因結構圖；B：斑馬魚、人和小鼠podxl基因結構圖；C：斑馬

本文編號：3957550