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新疆沙冬青AnEREBP轉(zhuǎn)錄因子克隆及表達調(diào)控分析

發(fā)布時間:2024-02-22 12:57
  惡劣的環(huán)境嚴重影響植物的正常生長和發(fā)育進程,為了適應不利的環(huán)境變化,許多植物進化出了復雜的調(diào)控機制,如改變植物激素的合成,通過信號轉(zhuǎn)導調(diào)控基因表達來提高植物的抗逆性。AP2/ERF超家族是一類植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族,是多種脅迫反應的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。為了探究AP2/ERF家族成員在新疆沙冬青抵抗逆境過程中的重要作用以及調(diào)控機制,本研究以新疆沙冬青為材料,通過基因克隆及課題組前期RNA-Seq獲得3個AP2/ERF基因序列,命名為AnEREBP1(MH260902.1)、AnEREBP2(MH260903.1)及AnEREBP3(JQ360514.1);同時,利用生物信息學、實時熒光定量(qRT-PCR)及凝膠遷移率(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)等分析對這3個基因的潛在功能進行了系統(tǒng)地分析,試驗主要結(jié)論如下:1.通過cDNA末端快速擴增技術(shù)(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)技術(shù)以及染色體步移技術(shù)對新疆沙冬青AnEREBP3基因的全長和啟動子進行克隆,通過簡并引物克隆得到同源區(qū)段383 bp,進...

【文章頁數(shù)】:91 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-1序列拼接示意圖

圖2-1序列拼接示意圖

沈陽農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文19圖2-1序列拼接示意圖Fig.2-1SequenceMosaicdiagram2.2.7啟動子克隆2.2.7.1新疆沙冬青葉片DNA提取利用植物DNA提取試劑盒按照說明書提取新疆沙冬青DNA。2.2.7.2引物設(shè)計利用在線引物設(shè)計軟件Primer-BL....


圖2-2基因同源區(qū)擴增電泳結(jié)果

圖2-2基因同源區(qū)擴增電泳結(jié)果

沈陽農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文21圖2-2基因同源區(qū)擴增電泳結(jié)果Fig.2-2Electrophoresisresultsofhomologousamplificationofthegene注:M:D2000Marker;1:AnEREBP3基因同源區(qū)擴增片段2.3.1.2TA克隆菌落....


圖2-3菌落PCRFig.2-3ColonyPCR

圖2-3菌落PCRFig.2-3ColonyPCR

沈陽農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文21圖2-2基因同源區(qū)擴增電泳結(jié)果Fig.2-2Electrophoresisresultsofhomologousamplificationofthegene注:M:D2000Marker;1:AnEREBP3基因同源區(qū)擴增片段2.3.1.2TA克隆菌落....


圖2-4同源區(qū)測序結(jié)果

圖2-4同源區(qū)測序結(jié)果

沈陽農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文21圖2-2基因同源區(qū)擴增電泳結(jié)果Fig.2-2Electrophoresisresultsofhomologousamplificationofthegene注:M:D2000Marker;1:AnEREBP3基因同源區(qū)擴增片段2.3.1.2TA克隆菌落....



本文編號:3906786

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