糞腸球菌是醫(yī)院內(nèi)和動物感染的重要病原體,對人、畜健康和食品安全構(gòu)成嚴(yán)重的威脅。一般認(rèn)為腸道表皮屏障是細(xì)菌性病原體侵入的優(yōu)先入口,黏附并定植到腸上皮細(xì)胞是其感染的關(guān)鍵步驟。菌毛在革蘭氏陰性和陽性細(xì)菌的感染中起著關(guān)鍵的作用,但動物源性糞腸球菌ebp菌毛基因的攜帶情況、保守性以及它的致病作用還不清楚。本研究通過對動物源性糞腸球菌的ebp基因分布情況、保守性進(jìn)行分析,并原核表達(dá)ebp菌毛蛋白,制備高效價、高特異性的多克隆抗體,以分析其致病作用和免疫原性,從而為動物源性糞腸球菌感染的預(yù)防和治療打下良好的基礎(chǔ)。使用Nallapareddy等人所描述的引物,采用PCR方法對2006年至2011年間從河南省不同地區(qū)分離的50株動物源性糞腸球菌ebp基因的攜帶情況進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示50株動物源性糞腸球菌全部攜帶ebpABC基因。再根據(jù)GenBank上已發(fā)表的糞腸球菌OG1RF株的ebp基因序列,使用Primer Premier 5.0設(shè)計(jì)ebpABC全基因引物,對10株動物源性糞腸球菌ebp菌毛蛋白的編碼基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增,產(chǎn)物經(jīng)膠回收試劑盒純化回收,與pMD18-T載體連接,轉(zhuǎn)化入大腸桿菌DH5α感受... 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
文獻(xiàn)綜述
引言
實(shí)驗(yàn)一 動物源性糞腸球菌ebp菌毛基因的檢測與序列分析
    1.材料
    2.方法
    3.結(jié)果與分析
    4.討論
實(shí)驗(yàn)二 動物源性糞腸球菌ebp菌毛蛋白的原核表達(dá)與純化
    1.材料
    2.方法
    3.結(jié)果與分析
    4.討論
實(shí)驗(yàn)三 動物源性糞腸球菌ebp菌毛蛋白多克隆抗體的制備及生物膜阻斷研究
    1.材料
    2.方法
    3.結(jié)果與分析
    4.討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
英文摘要
發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3532231