由細(xì)菌污染引起的食源性疾病是影響人類(lèi)健康和食品安全的最大問(wèn)題之一。為避免食源性致病菌引起的食品安全問(wèn)題,在食品制造過(guò)程中添加防腐劑以抑制致病菌生長(zhǎng)。而人工合成的化學(xué)防腐劑在實(shí)際應(yīng)用中很可能因不恰當(dāng)使用對(duì)人體健康產(chǎn)生危害。因此,尋找綠色,安全的天然防腐抗菌劑來(lái)抑制食品中的微生物污染對(duì)保障公共食品安全具有重要意義。表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（Epigallocatechin gallate,EGCG）是綠茶中含量最多的多酚物質(zhì),具有抗氧化,抗癌,抗炎癥等多種生物活性,而且對(duì)多種微生物具有抑制作用,是一種潛在的天然防腐抗菌劑。金黃色葡萄球菌（金葡菌）是一種常見(jiàn)的食源性致病菌,在世界范圍內(nèi)引起極高發(fā)生頻率的食物中毒事件。α-溶血素（α-hemolysin,Hla）是金葡菌hla基因編碼的胞外成孔毒素,能誘導(dǎo)宿主的炎癥反應(yīng),在金葡菌感染中發(fā)揮重要作用。目前尚無(wú)研究報(bào)道EGCG對(duì)金葡菌Hla誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的影響。因此本文旨在探討EGCG對(duì)金葡菌Hla誘導(dǎo)的NLRP3蛋白復(fù)合體激活的抑制作用,從蛋白水平揭示其分子機(jī)制。在體外實(shí)驗(yàn)中,通過(guò)藥敏實(shí)驗(yàn)證明EGCG對(duì)金葡菌具有良好的抑制作用,測(cè)得EGCG對(duì)金葡菌... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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EGCG化學(xué)結(jié)構(gòu)

技術(shù)路線(xiàn)圖

吉林大學(xué)碩士學(xué)位論文22度達(dá)到64μg/mL時(shí)，紙片周?chē)?xì)菌生長(zhǎng)在一定程度上被抑制，因此在紙片周?chē)霈F(xiàn)了抑菌圈。隨著EGCG濃度提高，抑菌圈逐漸擴(kuò)大。當(dāng)EGCG濃度達(dá)到256μg/mL時(shí)，濾紙片周?chē)囊志χ睆竭_(dá)到11mm，說(shuō)明EGCG對(duì)金葡菌的抑菌圈大小與EGCG濃度呈劑量依賴(lài)性關(guān)系，表明EGCG對(duì)金葡菌的抑制呈明顯的劑量依賴(lài)性。圖2.1EGCG對(duì)金葡菌8325-4瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)Fig.2.1AgardiskdiffusionassayforEGCGagainstS.aureus8325-4.2.3.3EGCG對(duì)金黃色葡萄球菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定通過(guò)測(cè)定在EGCG作用下，金葡菌培養(yǎng)不同時(shí)間后的菌液OD600，繪制EGCG對(duì)金葡菌8325-4與DU1090在MH培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線(xiàn)，如圖2.2所示。在空白對(duì)照組（PBS處理）中，金葡菌8325-4菌株在不含EGCG的培養(yǎng)基中呈現(xiàn)正常的生長(zhǎng)情況。在實(shí)驗(yàn)藥物組中，不同濃度EGCG處理使金葡菌生長(zhǎng)情況受到不同程度的影響。當(dāng)EGCG在16-32μg/mL濃度范圍內(nèi)時(shí)，OD600值變化與對(duì)照組情況無(wú)明顯差異，培養(yǎng)24h后，菌液的OD600值可達(dá)到2.5左右，呈現(xiàn)正常的生長(zhǎng)情況。當(dāng)EGCG濃度提高到64μg/mL時(shí)，在生長(zhǎng)過(guò)程中OD600值呈現(xiàn)緩慢的增長(zhǎng)速率，在24h后菌液的OD600值達(dá)到1.33±0.11，與空白對(duì)照組相比，8325-4菌株生長(zhǎng)受到明顯抑制，生長(zhǎng)速率受EGCG影響減慢。當(dāng)EGCG濃度達(dá)到128μg/mL即MIC值時(shí)，OD600值在24h內(nèi)無(wú)明顯變化，說(shuō)明金葡菌8325-4的生長(zhǎng)被完全抑制。在相同EGCG處理?xiàng)l件下，DU1090菌株顯示出與8325-4類(lèi)似的生長(zhǎng)情況，說(shuō)明EGCG對(duì)金葡菌8325-4與DU1090菌株的生長(zhǎng)均具有呈明顯劑量依賴(lài)性的抑制作用。

【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]舍曲林對(duì)金黃色葡萄球菌多重耐藥逆轉(zhuǎn)以及毒力抑制作用的研究[D]. 謝勝海.華南理工大學(xué) 2019
[2]食品中金黃色葡萄球菌快速檢測(cè)測(cè)試片基質(zhì)的開(kāi)發(fā)[D]. 侯典朋.黑龍江東方學(xué)院 2018
[3]鹽酸小檗堿抑制金黃色葡萄球菌α-溶血素及其誘導(dǎo)的氧化損傷[D]. 車(chē)美垚.吉林大學(xué) 2018



本文編號(hào)：3358103