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金黃色葡萄球菌α-溶血素對NLRP3炎性小體的誘導(dǎo)及EGCG的干預(yù)機制

發(fā)布時間:2021-08-23 15:12
  由細(xì)菌污染引起的食源性疾病是影響人類健康和食品安全的最大問題之一。為避免食源性致病菌引起的食品安全問題,在食品制造過程中添加防腐劑以抑制致病菌生長。而人工合成的化學(xué)防腐劑在實際應(yīng)用中很可能因不恰當(dāng)使用對人體健康產(chǎn)生危害。因此,尋找綠色,安全的天然防腐抗菌劑來抑制食品中的微生物污染對保障公共食品安全具有重要意義。表沒食子兒茶素沒食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)是綠茶中含量最多的多酚物質(zhì),具有抗氧化,抗癌,抗炎癥等多種生物活性,而且對多種微生物具有抑制作用,是一種潛在的天然防腐抗菌劑。金黃色葡萄球菌(金葡菌)是一種常見的食源性致病菌,在世界范圍內(nèi)引起極高發(fā)生頻率的食物中毒事件。α-溶血素(α-hemolysin,Hla)是金葡菌hla基因編碼的胞外成孔毒素,能誘導(dǎo)宿主的炎癥反應(yīng),在金葡菌感染中發(fā)揮重要作用。目前尚無研究報道EGCG對金葡菌Hla誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的影響。因此本文旨在探討EGCG對金葡菌Hla誘導(dǎo)的NLRP3蛋白復(fù)合體激活的抑制作用,從蛋白水平揭示其分子機制。在體外實驗中,通過藥敏實驗證明EGCG對金葡菌具有良好的抑制作用,測得EGCG對金葡菌... 

【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

金黃色葡萄球菌α-溶血素對NLRP3炎性小體的誘導(dǎo)及EGCG的干預(yù)機制


EGCG化學(xué)結(jié)構(gòu)

技術(shù)路線圖,吉林大學(xué),碩士學(xué)位,論文


技術(shù)路線圖

生長曲線,金葡菌,瓊脂


吉林大學(xué)碩士學(xué)位論文22度達到64μg/mL時,紙片周圍細(xì)菌生長在一定程度上被抑制,因此在紙片周圍出現(xiàn)了抑菌圈。隨著EGCG濃度提高,抑菌圈逐漸擴大。當(dāng)EGCG濃度達到256μg/mL時,濾紙片周圍的抑菌圈直徑達到11mm,說明EGCG對金葡菌的抑菌圈大小與EGCG濃度呈劑量依賴性關(guān)系,表明EGCG對金葡菌的抑制呈明顯的劑量依賴性。圖2.1EGCG對金葡菌8325-4瓊脂擴散實驗Fig.2.1AgardiskdiffusionassayforEGCGagainstS.aureus8325-4.2.3.3EGCG對金黃色葡萄球菌生長曲線測定通過測定在EGCG作用下,金葡菌培養(yǎng)不同時間后的菌液OD600,繪制EGCG對金葡菌8325-4與DU1090在MH培養(yǎng)基中的生長曲線,如圖2.2所示。在空白對照組(PBS處理)中,金葡菌8325-4菌株在不含EGCG的培養(yǎng)基中呈現(xiàn)正常的生長情況。在實驗藥物組中,不同濃度EGCG處理使金葡菌生長情況受到不同程度的影響。當(dāng)EGCG在16-32μg/mL濃度范圍內(nèi)時,OD600值變化與對照組情況無明顯差異,培養(yǎng)24h后,菌液的OD600值可達到2.5左右,呈現(xiàn)正常的生長情況。當(dāng)EGCG濃度提高到64μg/mL時,在生長過程中OD600值呈現(xiàn)緩慢的增長速率,在24h后菌液的OD600值達到1.33±0.11,與空白對照組相比,8325-4菌株生長受到明顯抑制,生長速率受EGCG影響減慢。當(dāng)EGCG濃度達到128μg/mL即MIC值時,OD600值在24h內(nèi)無明顯變化,說明金葡菌8325-4的生長被完全抑制。在相同EGCG處理條件下,DU1090菌株顯示出與8325-4類似的生長情況,說明EGCG對金葡菌8325-4與DU1090菌株的生長均具有呈明顯劑量依賴性的抑制作用。

【參考文獻】:
碩士論文
[1]舍曲林對金黃色葡萄球菌多重耐藥逆轉(zhuǎn)以及毒力抑制作用的研究[D]. 謝勝海.華南理工大學(xué) 2019
[2]食品中金黃色葡萄球菌快速檢測測試片基質(zhì)的開發(fā)[D]. 侯典朋.黑龍江東方學(xué)院 2018
[3]鹽酸小檗堿抑制金黃色葡萄球菌α-溶血素及其誘導(dǎo)的氧化損傷[D]. 車美垚.吉林大學(xué) 2018



本文編號:3358103

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