目的探索PIP5K1γ及其SUMO化修飾與角質(zhì)形成細(xì)胞功能的關(guān)系。方法及內(nèi)容第一部分:PIP5K1γ能夠特異的發(fā)生SUMO化修飾:在HEK293T細(xì)胞中分別轉(zhuǎn)染HA-PIP5K1α、HA-PIP5K1β、HA-PIP5K1γ質(zhì)粒以及FLAG-UBC9,通過免疫共沉淀及蛋白免疫印跡檢測(cè)發(fā)現(xiàn)何種類型的PIP5K可以與UBC9結(jié)合;在HEK293T細(xì)胞中過表達(dá)HA-PIP5K1γ、FLAG-SUMO1和Myc-UBC9,通過免疫共沉淀和蛋白免疫印跡方法檢測(cè)PIP5K1γ的是否確實(shí)發(fā)生SUMO化修飾;在HEK293T細(xì)胞中過表達(dá)HA-PIP5K1γ、FLAG-SUMO1、RGS-HIS-SENP1和RGS-HIS-SENP1mutant,通過免疫共沉淀和蛋白免疫印跡法檢測(cè)進(jìn)一步確定PIP5K1γ的SUMO化修飾的作用。在大腸桿菌中過表達(dá)GST-PIP5K1γ和pE1E2S1,共培養(yǎng)后裂解細(xì)菌提取蛋白,通過免疫共沉淀和蛋白免疫印跡法檢測(cè)PIP5K1γ的SUMO化修飾;同時(shí),內(nèi)源性PIP5K1γ的SUMO化修飾則在角質(zhì)形成細(xì)胞HaCat中免疫沉淀內(nèi)源性PIP5K1γ后經(jīng)蛋白免疫印跡法和SUMO1抗... 

【文章來源】：蚌埠醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮寫表
引言
第一部分 關(guān)于PIP5K1γ的SUMO化修飾的研究
    1. 材料與方法
    2. 結(jié)果
    3. 小結(jié)
第二部分PIP5K1γ的SUMOylation修飾位點(diǎn)的探索以及PIP5K1γ在角質(zhì)細(xì)胞功能中的作用研究
    1. 材料與方法
    2. 結(jié)果
    3. 小結(jié)
第三部分PIP5K1γ的SUMOylation對(duì)角質(zhì)細(xì)胞功能的作用研究及其作用機(jī)制研究
    1. 材料與方法
    2. 結(jié)果
    3. 小結(jié)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：2988436