本文關鍵詞：牛脾臟抗菌肽BSN27的分離、純化及活性分析　出處：《河南科技學院》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMPs)是廣泛分布于生物體內(nèi),能夠抑制細菌、真菌、原生動物以及某些病毒等具有廣譜抗菌活性的一類生物小分子(10k Da)多肽。哺乳動物的脾臟具有多種生物學功能,其中包括分泌多種多肽類活性物質(zhì),參與機體免疫反應。本研究旨在從荷斯坦牛的脾臟中分離純化出新型抗菌肽,多肽合成后對其抗菌活性進行檢測,從而篩選出活性較強的抗菌肽。這項研究可為牛脾臟源抗菌肽的相關研究奠定基礎。本試驗通過無菌操作方法獲得牛脾臟,運用組織勻漿、超聲破碎、乙酸浸提和高速離心方法獲得脾臟粗提物,后經(jīng)陽離子交換層析和反向高效液相色譜(RP-HPLC)對粗提物進行分離、純化,用大腸桿菌(ATCC8099)、金黃色葡萄球菌(ATCC6538)作為抗菌活性試驗的指示菌株,獲得了一個抑菌活性較強的抗菌肽。經(jīng)MALDI-TOF-MS質(zhì)譜鑒定和序列比對分析得出,得到該抗菌肽的氨基酸序列,將其命名為BSN27。通過抗菌肽數(shù)據(jù)庫APD3的分析表明,BSN27有27個氨基酸殘基,由5種氨基酸構成,纈氨酸(Ile,I)占14%(4個),苯丙氨酸(Phe,F)占11%(3個),脯氨酸(Pro,P)占51%(14個),酪氨酸(Tyr,Y)占3%(1個),精氨酸(Arg,R)占18%(5個);帶凈電荷數(shù)為+5;總疏水率為25%,GRAVY值為-0.7333,表明其為親水多肽;因富含脯氨酸(P),BSN27可能是一種抗菌肽;與抗菌肽牛Bac5、新西蘭鹿P9、綿羊Oa Bac5、山羊Ch Bac5和豬SP-B的同源性分別為62.79%、60%、55.81%、53.48%和50%。利用多肽合成儀合成牛脾臟抗菌肽BSN27,進行抗菌活性檢測。結(jié)果表明,合成抗菌肽BSN27除對大腸桿菌(ATCC8099)、金黃色葡萄球菌(ATCC6538)有很好抑菌效果。
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【學位授予單位】：河南科技學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：Q51
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本文編號：1348181