【摘要】:生物傳感器在臨床診斷、生物分析、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景,因而吸引了眾多研究者的興趣。近年來隨著人們環(huán)保意識(shí)的加強(qiáng),對(duì)環(huán)境檢測提出了更高的要求。酶傳感器滿足了現(xiàn)場環(huán)境監(jiān)測和化學(xué)戰(zhàn)劑快速檢測的需要,已逐步應(yīng)用于環(huán)境毒物的測定。在生物傳感器的構(gòu)建中,其關(guān)鍵技術(shù)之一就是如何將生物分子穩(wěn)定、高活性地固定到換能器表面。本文針對(duì)生物傳感器固定技術(shù)中存在的生物分子失活的問題,發(fā)展了一系列固定基質(zhì)材料和固定方法以提高固定化生物分子的活性,并以之為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)制備了過氧化氫、葡萄糖、尿素的酶傳感器; 另外,利用聚電解質(zhì)的尺寸排除效應(yīng)解決樣品中抗壞血酸的干擾; 利用納米金的吸附-解吸作用對(duì)失活酶層進(jìn)行更新,構(gòu)建了一系列一體化的單酶電極用于環(huán)境毒物的測定。其次,本文還采用酶標(biāo)雜交法研制了一種與結(jié)腸癌高度相關(guān)的基因傳感器。具體內(nèi)容如下: 1.發(fā)展了4種固定生物分子的新方法并用于固定酶構(gòu)建電化學(xué)酶傳感器。(1)在第2章中,首次研制出一種基于納米ZnO/殼聚糖有機(jī)-無機(jī)復(fù)合膜作為固定基質(zhì)的酶生物傳感器。該復(fù)合膜結(jié)合了無機(jī)材料納米ZnO和有機(jī)材料殼聚糖的優(yōu)點(diǎn)。酶的固定基于納米ZnO的吸附作用,因此避免了使用戊二醛時(shí)對(duì)酶的化學(xué)損傷。選擇典型的辣根過氧化酶作為研究對(duì)象。通過掃描電鏡觀察到納米ZnO/殼聚糖膜呈多孔狀,可使辣根過氧化酶有效地包埋在膜中,比用戊二醛交聯(lián)的酶具有更高的生物活性。電極測定H2O2溶液的濃度線性范圍是5.0×10-5~2.0×10-3 mol /L,靈敏度為43.8μA L mmol-1,在3σ處得檢測下限為2.5 ×10-6 mol /L。此基質(zhì)可用于其它生物分子的固定。(已成功用于固定抗體制得免疫傳感器) (2)在前面的研究中,我們從掃描電鏡圖中發(fā)現(xiàn)ZnO在殼聚糖中分散的均勻性有待提高。在第3章中報(bào)道了一種基于改性納米ZrO2/殼聚糖復(fù)合膜作為固定基質(zhì)的葡萄糖傳感器。首次將納米ZrO2用陰離子表面活性劑加以處理以提高其在殼聚糖溶液中的分散性。當(dāng)葡萄糖溶液濃度在1.25×10-5~ 9.50×10-3 mol /L變化時(shí),電極呈線性響應(yīng),靈敏度為0.028μA Lmmol-1。在3σ處得檢測下限為1.0×10-5 mol /L (3)在第4章中報(bào)道了一種新型尿素傳感器。以胺化PVC(PVC-NH2)作基質(zhì)的PVC膜pH電極為原電極,首先采用戊二醛將伴刀豆球蛋白交聯(lián)到pH電極上,再利用伴刀豆球蛋白(Con A)與糖蛋白間的特異性識(shí)別作用,將Con A和酶表面的麥芽糖殘基結(jié)合,采用交替沉積Con A和脲酶,進(jìn)行多層酶膜的組裝,電極在尿素濃度為6.9×10-5~1.0×10-3mol /L范圍,響應(yīng)電位與尿素濃度的對(duì)
【學(xué)位授予單位】:湖南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2005
【分類號(hào)】:TP212.2;X859
【圖文】:
weaver Burk 方程對(duì)圖 3-pp = 3.14 mmol L-1。此值低在自組裝單層電極上的 2的 6.34 mmol L-1 [156],以],表明分散在 ZrO2/CHIT
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):
2732841
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