【摘要】：多氯聯(lián)苯是一類典型的環(huán)境持久性污染物,具有持久性、高蓄積性、高毒性,在環(huán)境中廣泛分布,其在生物體內(nèi)的羥基代謝物,仍具有一定程度的蓄積性以及潛在的激素干擾效應(yīng),成為環(huán)境和食品安全領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。本文以研究多氯聯(lián)苯在生物體內(nèi)的羥基化代謝途徑及其產(chǎn)物為目的,建立了氣相色譜/質(zhì)譜法檢測(cè)水產(chǎn)品以及小鼠組織中羥基多氯聯(lián)苯的方法,分別研究了PCB101在小鼠以及鰻魚體內(nèi)的蓄積代謝情況,確定了PCB101在小鼠體內(nèi)主要的羥基代謝產(chǎn)物并與鰻魚體內(nèi)代謝情況進(jìn)行比較,對(duì)PCB101以及其兩種主要羥基代謝物對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的增殖效應(yīng)進(jìn)行研究。 論文建立了氣相色譜/質(zhì)譜法檢測(cè)水產(chǎn)品中羥基多氯聯(lián)苯的方法,結(jié)果表明：硅烷化衍生羥基多氯聯(lián)苯的最佳條件為60℃,衍生40min,樣品提取前,采用鹽酸酸化,對(duì)提取液用SPE硅膠小柱凈化,硅烷化衍生,分別用單重四極桿質(zhì)譜以及串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè),七種羥基多氯聯(lián)苯的回收率范圍在70.6-101.1%內(nèi),相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍為4.6-12.0%。優(yōu)化后的預(yù)處理?xiàng)l件節(jié)省了有機(jī)溶劑的用量,增加了檢測(cè)的種類,單重四極桿質(zhì)譜根據(jù)目標(biāo)化合物的特征碎片離子檢測(cè),檢測(cè)限范圍為0.32-0.63μg/kg,而串聯(lián)質(zhì)譜利用選擇性反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式,檢測(cè)限范圍在0.02-0.14μg/kg之間；兩種質(zhì)譜檢測(cè)器均能夠更加準(zhǔn)確的定性,降低假陽性的幾率。 論文建立了小鼠組織中PCB101及其羥基代謝物的氣相色譜/質(zhì)譜檢測(cè)方法,采用等體積比正己烷/乙酸乙酯進(jìn)行提取時(shí),多氯聯(lián)苯和羥基多氯聯(lián)苯成為共萃物,共同存在于提取液中,根據(jù)酚羥基的性質(zhì),本研究用KOH堿液反萃的方法對(duì)多氯聯(lián)苯和羥基多氯聯(lián)苯進(jìn)行分離,確定了KOH溶液最佳濃度為0.5mol/L對(duì)于小鼠肌肉中多氯聯(lián)苯加標(biāo)平均回收率為82.8%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.2%,羥基多氯聯(lián)苯的加標(biāo)回收率范圍在為76.1-101.0%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.8-8.9%范圍；小鼠血液中多氯聯(lián)苯加標(biāo)回收率為85.6%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.7%,羥基多氯聯(lián)苯的加標(biāo)回收率范圍為74.3-113.2%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍為1.5-7.0%,本方法中多氯聯(lián)苯最低檢測(cè)限為0.52μg/kg,羥基多氯聯(lián)苯最低檢測(cè)限范圍為0.18-0.35μg/kg。 研究了PCB101在小鼠以及鰻魚體內(nèi)的蓄積代謝情況。按照1/400LD50的劑量對(duì)小鼠進(jìn)行腹腔注射PCB101后,小鼠體內(nèi)的多氯聯(lián)苯在染毒后7d內(nèi),蓄積量達(dá)到最高值,在染毒30-60d之間,體內(nèi)PCB101蓄積量趨于穩(wěn)定,下降趨勢(shì)不明顯,確定了PCB101在小鼠體內(nèi)主要代謝成3-OH-PCB101和4'-OH-PCB101兩種,推斷其代謝途徑是在細(xì)胞色素P450氧化酶系統(tǒng)的作用下,在間、對(duì)位上進(jìn)行羥基取代形成,另外兩種羥基代謝物可能是3'-OH-PCB101和4-OH-2,2',3,5,5'PCB;對(duì)鰻魚按照1μg/kg的劑量進(jìn)行經(jīng)口染毒,鰻魚各組織在染毒5d內(nèi),達(dá)到最高蓄積值；在鰻魚體內(nèi),未檢出3-OH-PCB101和4'-OH-PCB101。 研究了PCB101及其兩種代謝物3-OH-PCB101和4'-OH-PCB101對(duì)MCF-7人乳腺癌細(xì)胞株的增殖效應(yīng)。三種化合物的暴露濃度分別為5×10-6、5×10-7、5×10-8、5×10-9mol/L,實(shí)驗(yàn)設(shè)正常組、溶劑對(duì)照(乙醇)、雌激素對(duì)照。研究發(fā)現(xiàn)MCF-7細(xì)胞在三種化合物不同濃度的干擾下,在暴露24、48、72、96h時(shí)檢測(cè),三種化合物對(duì)MCF-7未表現(xiàn)出明顯增殖作用。 通過本研究,對(duì)反應(yīng)水產(chǎn)品中羥基多氯聯(lián)苯的蓄積以及氯聯(lián)苯的真實(shí)污染水平有著現(xiàn)實(shí)的意義,為羥基多氯聯(lián)苯可能引起的水產(chǎn)品安全問題提供技術(shù)支持,為以后相關(guān)科學(xué)研究以及相關(guān)管理部門對(duì)水產(chǎn)品質(zhì)量安全的相關(guān)決策制定提供參考。
【學(xué)位授予單位】：中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：X171.5

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 張海波;粉末活性炭對(duì)水中PCBs的吸附性能及主要影響因素研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：2669274