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不同固定方式對貼壁細胞形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)的影響

發(fā)布時間:2022-11-09 21:10
  為探索和優(yōu)化貼壁細胞透射電鏡制樣方法,本試驗以鼠腎細胞系HEK293和小鼠成纖維細胞系3T3的貼壁培養(yǎng)細胞為材料,采用三種不同的固定方法,分別為先固定后刮取細胞、先刮取細胞后固定和胰蛋白酶消化后固定,對細胞進行固定和收集,于光學(xué)顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化并進行電鏡樣品的制備,比較不同固定方式下細胞形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)的差異。結(jié)果表明,先固定后刮取法能較好保持貼壁細胞原始形態(tài)特征,而先刮取后固定法和胰酶消化法都會明顯改變貼壁細胞形態(tài),使懸浮起的細胞呈近似球形。在電鏡下,三種方法都可以得到良好的超微結(jié)構(gòu),先固定后刮取的細胞形態(tài)更貼近于生理狀態(tài),但是其長條形或梭形的形態(tài)特征也給細胞超微結(jié)構(gòu)的觀察帶來一定困難;先刮取后固定法和胰蛋白酶消化法得到的細胞呈圓球形,觀察更為方便,但細胞的形態(tài)與貼壁時的生理狀態(tài)不符。本試驗為貼壁細胞電鏡制樣的基礎(chǔ)方法研究,為不同的細胞學(xué)實驗選擇適當(dāng)?shù)那肮潭ㄌ幚矸绞教峁┝丝茖W(xué)的依據(jù)。 

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 細胞培養(yǎng)
    1.2 細胞收集
        1.2.1 先固定后刮取收集法
        1.2.2 先刮取后固定收集法
        1.2.3 胰蛋白酶消化法
        1.2.4 培養(yǎng)細胞的電鏡樣品制備
2 結(jié)果
    2.1 不同固定方法對細胞形態(tài)的影響。
    2.2 不同固定方法對細胞電鏡觀察的影響
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
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[3]培養(yǎng)細胞電鏡樣品制備方法[J]. 楊怡,張颯,周濤,張德添,張學(xué)敏.  解剖學(xué)雜志. 2003(05)
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[5]培養(yǎng)細胞的超薄切片技術(shù)探討[J]. 趙剛,曾嘉,楊海賢.  天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2004(02)
[6]離心速度及時間對培養(yǎng)細胞透射電鏡樣品制備的影響[J]. 范京川,王紅,徐晨,羅子國,巫靜嫻.  重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2009(08)
[7]體外培養(yǎng)細胞原位包埋電鏡樣品的制作方法[J]. 錢晶晶,管懷進,朱昌來.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2013(05)
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本文編號:3704899

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