家蠶p62蛋白(又名sequestosome-1,SilkDB:BGIBMGA002620-PA)具有多個(gè)功能結(jié)構(gòu)域,在細(xì)胞自噬、凋亡等生命過(guò)程中起著十分重要的作用。家蠶p62的一個(gè)旁系同源蛋白(paralog)Ref(2)P比p62缺少一個(gè)PB1結(jié)構(gòu)域,其他結(jié)構(gòu)域完全相同。本論文主要研究了家蠶p62及Ref(2)P蛋白的核質(zhì)穿梭特性及對(duì)BmNPV多角體蛋白亞細(xì)胞定位的影響,初步探討了病毒與宿主之間的“博弈”關(guān)系。主要結(jié)果如下:1.家蠶自噬受體蛋白p62及Ref(2)P核質(zhì)穿梭特性分析⑴參考人類p62蛋白的核質(zhì)穿梭特性,構(gòu)建eGFP與p62、Ref(2)P的融合表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染BmN細(xì)胞后,激光共聚焦顯微鏡分析發(fā)現(xiàn)p62和Ref(2)P在細(xì)胞質(zhì)中呈斑點(diǎn)狀分布;加入出核轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑來(lái)普霉素B(Leptomycin B,LMB),p62及Ref(2)P被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核內(nèi)。這些結(jié)果表明家蠶p62和Ref(2)P蛋白是CRM1依賴的核質(zhì)穿梭蛋白。另外,p62(K8A/D59A)入核時(shí)間遠(yuǎn)快于野生型p62蛋白,表明PB1結(jié)構(gòu)域?qū)62蛋白滯留在細(xì)胞質(zhì)中起到重要作用。⑵以結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單的Ref(2)P為研...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖1.1核孔復(fù)合體的結(jié)構(gòu)特征

圖1.1核孔復(fù)合體的結(jié)構(gòu)特征[19]Figure1.1Structuralcharacteristicsofthenuclearporecomplex1.1.2.2核定位信號(hào)序列和出核信號(hào)序列核定位信號(hào)序列（nuclearlocalizationsign....

圖1.2蛋白質(zhì)的核質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程簡(jiǎn)化圖

家蠶自噬受體蛋白p62及Ref(2)P的核質(zhì)穿梭和翻譯后修飾研究節(jié)復(fù)合物通過(guò)NPC，當(dāng)復(fù)合物運(yùn)送到細(xì)胞核后，RanGTP與Importin-β結(jié)合并改變其構(gòu)象，解離復(fù)合物，將貨物蛋白釋放到細(xì)胞核中（圖1.2a）[41]。另一種是含有非典型NLS的蛋白質(zhì)，可以與....

圖1.3p62的結(jié)構(gòu)域及相互作用蛋白[62]

家蠶自噬受體蛋白p62及Ref(2)P的核質(zhì)穿梭和翻譯后修飾研究身通過(guò)PB1結(jié)構(gòu)域相互作用，形成二聚體，進(jìn)而促進(jìn)自噬[59]。LIR基序可以促進(jìn)p62蛋白分子與LC3的結(jié)合，從而有利于蛋白質(zhì)通過(guò)自噬途徑降解[60]。UBA結(jié)構(gòu)域有利于p62與被泛素化鏈標(biāo)....

圖1.4p62在DNA損傷修復(fù)中的圖示

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文蛋白進(jìn)行修復(fù)[70]，p62蛋白入核后，能與DNA修復(fù)相關(guān)蛋白形成聚集體，包括FLNA和RAD51，進(jìn)而直接在細(xì)胞核內(nèi)通過(guò)泛素-蛋白酶體途徑降解聚集體，導(dǎo)致DNA損傷修復(fù)的效率降低。因此細(xì)胞核內(nèi)p62蛋白的水平會(huì)影響DNA損傷修復(fù)的效率。....

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