發(fā)布時間：2022-10-09 19:32

　　褪黑素（Melatonin;N-乙酰-5-甲氧基色胺）是色氨酸的天然衍生物,且是幾乎所有生物體（包括動物和植物）體內合成的中心生物分子,其結構中具有吲哚雜環(huán),可與羥基（-OH）和烷基過氧自由基（ROO^-）等反應。褪黑素可以作為抗氧化劑參與許多細胞行為,在生物體外和體內都是極好的自由基清除劑,參與并協(xié)助植物體對各種非生物脅迫環(huán)境的的保護響應活動。植物藻類中的萊茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）是一種單細胞真核綠藻（團藻目,衣藻屬）,生長速度快,具有完成測序的基因組和簡單的分子遺傳學特性,成為很受歡迎的微藻模式生物,被用于植物功能基因及次生代謝產物等方面的研究,然而有關微藻中褪黑素的相關研究仍然比較薄弱。本研究以模式微藻中的萊茵衣藻為受體,分別進行了外源褪黑素和內源褪黑素過量表達兩種情況下對萊茵衣藻響應鹽脅迫的生理作用,旨在探討鹽脅迫的非生物脅迫環(huán)境中,褪黑素對微藻生長的保護力,為微藻中褪黑素的功能研究提供參考。論文一方面研究了在不同濃度的外源褪黑素的情況下,主要選用藻類生長,形態(tài)觀察,膜脂過氧化,抗氧化酶活性和細胞內褪黑素濃度為測量指標,考... 

【文章頁數】：88 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語對照表
第一章 緒論
    1.1 鹽脅迫對植物的影響及植物的耐鹽性機制
        1.1.1 鹽脅迫對植物的影響
        1.1.2 植物的耐鹽性機制
    1.2 褪黑素在植物中的研究進展
        1.2.1 褪黑素的發(fā)現(xiàn)
        1.2.2 褪黑素的性質和結構
        1.2.3 褪黑素的生物合成途徑
        1.2.4 褪黑素的功能
        1.2.5 褪黑素的其他功能
    1.3 褪黑素在藻類中的研究進展
    1.4 目的及意義
第二章 外源褪黑素對萊茵衣藻在鹽脅迫下的生理作用
    2.1 實驗材料及培養(yǎng)
        2.1.1 試劑及試劑盒
        2.1.2 試劑的配制
    2.2 實驗處理
    2.3 實驗方法
        2.3.1 衣藻生長
        2.3.2 衣藻細胞形態(tài)觀察
        2.3.3 衣藻細胞內MT的提取
        2.3.4 衣藻細胞內抗氧化酶的提取
        2.3.5 衣藻細胞內丙二醛的提取
    2.4 數據處理及分析
    2.5 實驗結果
        2.5.1 褪黑素對萊茵衣藻在鹽或非鹽脅迫下細胞生長的影響
        2.5.2 褪黑素對萊茵衣藻形態(tài)變化的影響
        2.5.3 褪黑素對萊茵衣藻細胞內褪黑素濃度的影響
        2.5.4 褪黑素對萊茵衣藻在鹽或非鹽脅迫下細胞內抗氧化酶活性的影響
        2.5.5 褪黑素對萊茵衣藻丙二醛(MDA)含量的影響
    2.6 討論
第三章 玻璃珠法遺傳轉化萊茵衣藻
    3.1 材料
        3.1.1 藻株與菌株
        3.1.2 試劑及試劑盒
        3.1.3 試劑的配制
    3.2 方法
        3.2.1 萊茵衣藻核表達載體pDBle-AANAT的構建
        3.2.2 萊茵衣藻的遺傳轉化
        3.2.3 轉化萊茵衣藻藻株的篩選及陽性鑒定
    3.3 結果
        3.3.1 萊茵衣藻表達載體pDBle-AANAT的構建
        3.3.2 萊茵衣藻的遺傳轉化
        3.3.3 轉化萊茵衣藻藻株的篩選及陽性鑒定
    3.4 討論
第四章 過表達內源褪黑素對萊茵衣藻在鹽脅迫下的生理作用
    4.1 材料
        4.1.1 藻株及培養(yǎng)
        4.1.2 試劑及試劑盒
        4.1.3 試劑的配制
    4.2 方法
        4.2.1 轉化藻株及未轉化藻株細胞內褪黑素濃度的測定
        4.2.2 鹽脅迫處理衣藻藻細胞及抗氧化系統(tǒng)相關指標、膜過氧化產物丙二醛的測定
        4.2.3 統(tǒng)計分析
    4.3 結果
        4.3.1 衣藻細胞內褪黑素濃度的變化
        4.3.2 鹽脅迫對衣藻細胞內抗氧化酶的影響
        4.3.3 鹽脅迫對衣藻細胞內丙二醛的影響
    4.4 討論
論文的主要結論、創(chuàng)新點與展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間取得的科研成果


【參考文獻】：
期刊論文
[1]褪黑素合成酶基因轉化煙草及轉化植株抗氧化系統(tǒng)變化[J]. 王英娟,賈敬芬,步懷宇,趙宇瑋,許耀,Carl Hirschie Johnson,Jan Kolár.  生物工程學報. 2009(07)



本文編號：3689228