褪黑素（Melatonin;N-乙酰-5-甲氧基色胺）是色氨酸的天然衍生物,且是幾乎所有生物體（包括動(dòng)物和植物）體內(nèi)合成的中心生物分子,其結(jié)構(gòu)中具有吲哚雜環(huán),可與羥基（-OH）和烷基過氧自由基（ROO^-）等反應(yīng)。褪黑素可以作為抗氧化劑參與許多細(xì)胞行為,在生物體外和體內(nèi)都是極好的自由基清除劑,參與并協(xié)助植物體對(duì)各種非生物脅迫環(huán)境的的保護(hù)響應(yīng)活動(dòng)。植物藻類中的萊茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）是一種單細(xì)胞真核綠藻（團(tuán)藻目,衣藻屬）,生長速度快,具有完成測(cè)序的基因組和簡單的分子遺傳學(xué)特性,成為很受歡迎的微藻模式生物,被用于植物功能基因及次生代謝產(chǎn)物等方面的研究,然而有關(guān)微藻中褪黑素的相關(guān)研究仍然比較薄弱。本研究以模式微藻中的萊茵衣藻為受體,分別進(jìn)行了外源褪黑素和內(nèi)源褪黑素過量表達(dá)兩種情況下對(duì)萊茵衣藻響應(yīng)鹽脅迫的生理作用,旨在探討鹽脅迫的非生物脅迫環(huán)境中,褪黑素對(duì)微藻生長的保護(hù)力,為微藻中褪黑素的功能研究提供參考。論文一方面研究了在不同濃度的外源褪黑素的情況下,主要選用藻類生長,形態(tài)觀察,膜脂過氧化,抗氧化酶活性和細(xì)胞內(nèi)褪黑素濃度為測(cè)量指標(biāo),考... 

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語對(duì)照表
第一章 緒論
    1.1 鹽脅迫對(duì)植物的影響及植物的耐鹽性機(jī)制
        1.1.1 鹽脅迫對(duì)植物的影響
        1.1.2 植物的耐鹽性機(jī)制
    1.2 褪黑素在植物中的研究進(jìn)展
        1.2.1 褪黑素的發(fā)現(xiàn)
        1.2.2 褪黑素的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)
        1.2.3 褪黑素的生物合成途徑
        1.2.4 褪黑素的功能
        1.2.5 褪黑素的其他功能
    1.3 褪黑素在藻類中的研究進(jìn)展
    1.4 目的及意義
第二章 外源褪黑素對(duì)萊茵衣藻在鹽脅迫下的生理作用
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料及培養(yǎng)
        2.1.1 試劑及試劑盒
        2.1.2 試劑的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)處理
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 衣藻生長
        2.3.2 衣藻細(xì)胞形態(tài)觀察
        2.3.3 衣藻細(xì)胞內(nèi)MT的提取
        2.3.4 衣藻細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶的提取
        2.3.5 衣藻細(xì)胞內(nèi)丙二醛的提取
    2.4 數(shù)據(jù)處理及分析
    2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.5.1 褪黑素對(duì)萊茵衣藻在鹽或非鹽脅迫下細(xì)胞生長的影響
        2.5.2 褪黑素對(duì)萊茵衣藻形態(tài)變化的影響
        2.5.3 褪黑素對(duì)萊茵衣藻細(xì)胞內(nèi)褪黑素濃度的影響
        2.5.4 褪黑素對(duì)萊茵衣藻在鹽或非鹽脅迫下細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶活性的影響
        2.5.5 褪黑素對(duì)萊茵衣藻丙二醛(MDA)含量的影響
    2.6 討論
第三章 玻璃珠法遺傳轉(zhuǎn)化萊茵衣藻
    3.1 材料
        3.1.1 藻株與菌株
        3.1.2 試劑及試劑盒
        3.1.3 試劑的配制
    3.2 方法
        3.2.1 萊茵衣藻核表達(dá)載體pDBle-AANAT的構(gòu)建
        3.2.2 萊茵衣藻的遺傳轉(zhuǎn)化
        3.2.3 轉(zhuǎn)化萊茵衣藻藻株的篩選及陽性鑒定
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 萊茵衣藻表達(dá)載體pDBle-AANAT的構(gòu)建
        3.3.2 萊茵衣藻的遺傳轉(zhuǎn)化
        3.3.3 轉(zhuǎn)化萊茵衣藻藻株的篩選及陽性鑒定
    3.4 討論
第四章 過表達(dá)內(nèi)源褪黑素對(duì)萊茵衣藻在鹽脅迫下的生理作用
    4.1 材料
        4.1.1 藻株及培養(yǎng)
        4.1.2 試劑及試劑盒
        4.1.3 試劑的配制
    4.2 方法
        4.2.1 轉(zhuǎn)化藻株及未轉(zhuǎn)化藻株細(xì)胞內(nèi)褪黑素濃度的測(cè)定
        4.2.2 鹽脅迫處理衣藻藻細(xì)胞及抗氧化系統(tǒng)相關(guān)指標(biāo)、膜過氧化產(chǎn)物丙二醛的測(cè)定
        4.2.3 統(tǒng)計(jì)分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 衣藻細(xì)胞內(nèi)褪黑素濃度的變化
        4.3.2 鹽脅迫對(duì)衣藻細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶的影響
        4.3.3 鹽脅迫對(duì)衣藻細(xì)胞內(nèi)丙二醛的影響
    4.4 討論
論文的主要結(jié)論、創(chuàng)新點(diǎn)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]褪黑素合成酶基因轉(zhuǎn)化煙草及轉(zhuǎn)化植株抗氧化系統(tǒng)變化[J]. 王英娟,賈敬芬,步懷宇,趙宇瑋,許耀,Carl Hirschie Johnson,Jan Kolár.  生物工程學(xué)報(bào). 2009(07)



本文編號(hào)：3689228