結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）感染引起的一種慢性傳染病。巨噬細胞是Mtb的主要靶細胞,可通過自噬、凋亡等途徑清除Mtb,而Mtb也會通過多種機制逃避宿主細胞的殺傷作用。外泌體在細胞間信息交流中起著至關重要的作用,外泌體來源的因子可以直接影響基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯,通過影響信號傳遞改變蛋白修飾,調(diào)節(jié)蛋白定位和關鍵的酶催化反應,進而調(diào)控受體細胞的生理活動。為了探究上皮細胞來源的外泌體對BCG感染巨噬細胞后免疫反應的調(diào)控作用及機制,本研究通過提取BCG感染和未感染的上皮細胞來源的外泌體并進行鑒定,再將其作用于BCG感染的巨噬細胞,利用蛋白免疫印跡、免疫熒光、流式細胞術等技術,從形態(tài)學及分子水平對巨噬細胞炎癥、凋亡及自噬進行檢測,來揭示外泌體在巨噬細胞感染結(jié)核分枝桿菌中的調(diào)控作用,并且進一步用雷帕霉素（Rapamycin,rapa）來探究外泌體對自噬的調(diào)控作用是否依賴于mTOR通路。實驗結(jié)果如下:1.純化獲得的上皮細胞的外泌體在透射電鏡下呈圓盤狀,大小在30～150nm;表達外泌體表面分子標志CD81、CD63、HSP70;DIR紅色染料標記的... 

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第一章 文獻綜述
    1.1 炎癥反應與結(jié)核分枝桿菌
    1.2 細胞自噬與結(jié)核分枝桿菌
    1.3 細胞凋亡與結(jié)核分枝桿菌
    1.4 外泌體
    1.5 研究目的及意義
第二章 外泌體的提取與鑒定
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗步驟與方法
    2.3 結(jié)果與分析
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 上皮細胞來源外泌體對BCG感染的巨噬細胞炎癥反應的調(diào)控作用
    3.1 實驗材料
    3.2 實驗步驟與方法
    3.3 結(jié)果與分析
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 上皮細胞來源外泌體對BCG感染巨噬細胞凋亡的調(diào)控作用
    4.1 實驗材料
    4.2 實驗步驟與方法
    4.3 結(jié)果與分析
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 外泌體通過mTOR信號通路調(diào)控BCG誘導的巨噬細胞自噬
    5.1 實驗材料
    5.2 實驗步驟與方法
    5.3 結(jié)果與分析
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
第六章 結(jié)論
    6.1 肺臟上皮細胞來源的外泌體提取成功
    6.2 上皮細胞來源的外泌體可促進BCG誘導的巨噬細胞的炎癥反應
    6.3 上皮細胞來源的外泌體可促進BCG誘導的巨噬細胞的凋亡
    6.4 上皮細胞來源的外泌體可通過mTOR信號途徑調(diào)控BCG感染后巨噬細胞的自噬作用
參考文獻
附錄
致謝
個人簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]外泌體與結(jié)核分枝桿菌相互作用的研究進展[J]. 陳偲,王建軍,湯立軍.  免疫學雜志. 2013(02)



本文編號：3688909