結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）感染引起的一種慢性傳染病。巨噬細(xì)胞是Mtb的主要靶細(xì)胞,可通過(guò)自噬、凋亡等途徑清除Mtb,而Mtb也會(huì)通過(guò)多種機(jī)制逃避宿主細(xì)胞的殺傷作用。外泌體在細(xì)胞間信息交流中起著至關(guān)重要的作用,外泌體來(lái)源的因子可以直接影響基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯,通過(guò)影響信號(hào)傳遞改變蛋白修飾,調(diào)節(jié)蛋白定位和關(guān)鍵的酶催化反應(yīng),進(jìn)而調(diào)控受體細(xì)胞的生理活動(dòng)。為了探究上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體對(duì)BCG感染巨噬細(xì)胞后免疫反應(yīng)的調(diào)控作用及機(jī)制,本研究通過(guò)提取BCG感染和未感染的上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體并進(jìn)行鑒定,再將其作用于BCG感染的巨噬細(xì)胞,利用蛋白免疫印跡、免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)等技術(shù),從形態(tài)學(xué)及分子水平對(duì)巨噬細(xì)胞炎癥、凋亡及自噬進(jìn)行檢測(cè),來(lái)揭示外泌體在巨噬細(xì)胞感染結(jié)核分枝桿菌中的調(diào)控作用,并且進(jìn)一步用雷帕霉素（Rapamycin,rapa）來(lái)探究外泌體對(duì)自噬的調(diào)控作用是否依賴于mTOR通路。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.純化獲得的上皮細(xì)胞的外泌體在透射電鏡下呈圓盤狀,大小在30～150nm;表達(dá)外泌體表面分子標(biāo)志CD81、CD63、HSP70;DIR紅色染料標(biāo)記的... 

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 炎癥反應(yīng)與結(jié)核分枝桿菌
    1.2 細(xì)胞自噬與結(jié)核分枝桿菌
    1.3 細(xì)胞凋亡與結(jié)核分枝桿菌
    1.4 外泌體
    1.5 研究目的及意義
第二章 外泌體的提取與鑒定
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)步驟與方法
    2.3 結(jié)果與分析
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 上皮細(xì)胞來(lái)源外泌體對(duì)BCG感染的巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)的調(diào)控作用
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)步驟與方法
    3.3 結(jié)果與分析
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 上皮細(xì)胞來(lái)源外泌體對(duì)BCG感染巨噬細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)步驟與方法
    4.3 結(jié)果與分析
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第五章 外泌體通過(guò)mTOR信號(hào)通路調(diào)控BCG誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞自噬
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料
    5.2 實(shí)驗(yàn)步驟與方法
    5.3 結(jié)果與分析
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
第六章 結(jié)論
    6.1 肺臟上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體提取成功
    6.2 上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體可促進(jìn)BCG誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)
    6.3 上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體可促進(jìn)BCG誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞的凋亡
    6.4 上皮細(xì)胞來(lái)源的外泌體可通過(guò)mTOR信號(hào)途徑調(diào)控BCG感染后巨噬細(xì)胞的自噬作用
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]外泌體與結(jié)核分枝桿菌相互作用的研究進(jìn)展[J]. 陳偲,王建軍,湯立軍.  免疫學(xué)雜志. 2013(02)



本文編號(hào)：3688909